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简答题

(选做题)生物技术实践

(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在乎板上产生______,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间的_______表示。

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:

Ⅰ中的主要成分为________;Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

(3)为构建基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环,每次循环包括三步:_______。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________。

(4)除植酸酶外,微生物还能应用在哪些酶的生产中?(至少写两种)

正确答案

(1)透明圈   植酸钠的消耗量(减少量)或磷酸(肌醇)的生成量(产量)

(2)小分子杂质   凝胶色谱法:根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法:根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化)

(3)变性、复性和延伸(长)   加热(或高温处理)

(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶

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水稻种子中70%的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外,是多种动物的抗营养因子;同时,排出的大量磷进入水体易引起水华。

(1)磷元素除了形成植酸外,还可以出现在下列__________分子或结构中(多选)。

A.核糖  B.ATP  C.核糖体  D.核膜

(2)种植芦苇能有效抑制水华的发生,表明芦苇与引起水华的藻类关系是___________。

(3)植酸酶可降解植酸,在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_______利用率。

(4)酵母菌中植酸酶的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。

据图回答:

①.植酸酶___________(Ⅰ/Ⅱ)属于分泌蛋白。

②.若植酸酶Ⅰ和Ⅱ的肽链组成不同,其差异体现在____________。

③.提纯的植酸酶需做活性条件测定,下图为测定结果。图中的自变量可为__________(答一种);因变量可以通过测定__________来表示。

(5)为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻,培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。

据图回答:

①.图中基因组文库_____________(小于/等于/大于)cDNA文库。

②.B过程需要的酶是_________;A、C过程中___________(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。

③.目的基因I和Ⅱ除从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中_______和_______为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是_________________。

(6)已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低,但易感病。下图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性状分别由两对基因控制,并独立遗传。

采用上图育种过程,需从__________代开始筛选,经筛选淘汰后,在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是__________。选留植株多代自交,经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品种。

正确答案

(1)B、C、D

(2)竞争关系

(3)营养成分

(4)①.Ⅰ    ②.氨基酸的种类、数量和排列顺序不同    ③.温度(或pH)       单位时间内植酸的降解量(或植酸降解产物的生成量)

(5)①.大于    ②.逆转录酶    可以    ③.DNA      cDNA      耐高温

(6)F     1/9

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