热门试卷

解：（1）由于分化的细胞中基因选择性表达，皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，无胰岛素mRNA，所以不能利用人的皮肤细胞来完成①过程．

（2）过程②表示的为逆转录过程，遗传信息传递为mRNA→DNA，因此需要的酶为逆转录酶．过程③由双链DNA形成单链DNA的过程，需要解旋酶和ATP．

（3）在利用A、B获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成C重组质粒．

（4）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl2处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．

（5）图中的B起到运载体的作用，它应该符合能在宿主细胞中正常生存并复制，具有标记基因，具有多个限制酶的切点等条件，能起到这种作用的有质粒、噬菌体、动植物病毒等．图中的D是基因工程中的受体细胞，能作这种细胞的有大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞等．

故答案为：

（1）不能　皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA

（2）逆转录酶　解旋酶

（3）同一种限制性内切酶　黏性末端　DNA连接酶

（4）CaCl2

（5）能在宿主细胞中正常生存并复制，具有标记基因，具有多个限制酶的切点　质粒、噬菌体、动植物病毒 　受体　大肠杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞

解：（1）过程①是利用PCR技术获取目的基因的过程，应提取海栖热袍菌的基因组DNA作模板；同时根据LDH（或目的）基因的核苷酸序列合成引物．

（2）将目的基因导入大肠杆菌的转化方法是：先用 Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程．

（3）图示大肠杆菌42℃条件下启动子活性完全激发，所以应该在此温度下进行培养．目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交．

故答案为：

（1）海栖热袍菌       LDH（或目的）

（2）Ca2+（或CaCl2）

（3）42        蛋白质

解：（1）在基因工程中，重组Ti质粒上的潮霉素抗性基因被称为标记基因；铁结合蛋白基因被称为目的基因，获取该基因后常用PCR技术进行扩增．

（2）为获得较纯净的农杆菌用于该项研究，可采用平板划线（或稀释涂布平板）法对农杆菌进行接种培养．为筛选出含重组Ti质粒的愈伤组织，应在培养基2中添加适量的潮霉素，故从用途上归类，该培养基属于选择培养基．图中所用培养基通常都使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．

（3）该基因工程的目的基因为铁结合蛋白基因，因此检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻种子中铁含量．

（4）植物组织培养主要包括脱分化和再分化两个阶段，即图中MS培养基中发生的过程为脱分化，培养基3中发生的过程为再分化．

故答案为：

（1）标记    目的     PCR   

（2）平板划线（或稀释涂布平板）   潮霉素   选择   高压蒸汽灭菌   

（3）种子中铁含量   

（4）脱分化  再分化

解：（1）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定．

（2）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．

（3）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现了表达的过程，在基因工程中称为转化．

（4）目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上是目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键，可通过DNA分子杂交技术进行检测目的基因是否导入受体细胞．

故答案为：

（1）目的基因的获取　基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）　将目的基因导入受体细胞　

（2）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上

（3）转化

（4）目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上   DNA分子杂交