- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
________、________和_________是基因工程中常用的运载体。
正确答案
质粒 噬菌体 动植物病毒
下图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答:
(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行___________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有___________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是,其合成的产物是_____________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________________。
正确答案
(1)目的基因和载体连接物 载体和载体连接物 目的基因和目的基因连接物 分离、纯化(或筛选)
(2)载体和载体连接物 目的基因和载体连接物、载体和载体连接物
(3)启动子 mRNA
(4)EcoRⅠ和BamHⅠ
假设A、b代表玉米的优良基因,这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种,为培育出优良品种AAbb,可采用的方法如下图所示:
(1)由品种AABB、aabb经过①、②、③过程培育出新品种的育种方式称为_____________。若经过②过程产生的子代总数为1552株,则其中基因型为AAbb理论上有____________株。基因型为Aabb的类型经过过程③,子代中AAbb与aabb的数量比是_______________。
(2)过程⑤常采用_____________由AaBb得到Ab个体。与“过程①②③”的育种方法相比,过程⑤⑥的优势是_________________。
(3)过程④在完成目的基因与运载体的结合时,必须用到的工具酶是____________。与过程⑦的育种方式相比,过程④育种的优势是_________________。
正确答案
(1)杂交育种 97 1:1
(2)花药离体培养法 明显缩短了育种年限
(3)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 定向地改造生物的遗传性状
一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究,该菌株不能利用乳糖,这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒,一种含有正常的乳糖操纵基因,另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶,获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌,并向其中加入高浓度的重组质粒,使细菌增殖。再将实验组细菌(含重组质粒)和对照组细菌(不含重组质粒)放入下图所示环境中让其生长。请回答下列问题:
(1)在基因工程的基本操作程序中,________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具,若要提取限制酶,可选择的生物是________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒,为了促进细菌更好地吸收重组质粒,还应用_____处理细菌,使细菌处于___________。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生,细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落_________。
A.只有1、2和4号 B.只有3、5和6号 C.只有1、2、3和4号 D.只有4、5和6号
(4)如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶,则细菌最可能在_____号和____号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如下表,在该培养基中用乳糖作为唯一能源,则细菌能在哪些培养基中长出菌落______。
A.只有10号 B.只有8号 C.7号和8号 D.8号和10号
正确答案
(1)基因表达载体的构建 大肠杆菌 在质粒DNA上切割(答案合理即可)
(2)Ca2+ 感受态 葡萄糖是单糖,可被细菌吸收,确保细菌均能在此培养基中正常生长(答案合理即可)
(3)C
(4)1 4
(5)C
1993年,中国科学家成功培育出转基因抗虫棉。
(1)转基因抗虫棉能有效地杀死棉铃虫,从而降低该种害虫的_________。
(2)如果要获取豇豆细胞中的抗虫基因,一般是采用__________的方法;转基因抗虫棉细胞中的抗虫基因是采用_______的方法获得。两种抗虫基因的结构不同之处是:豇豆抗虫基因的编码区是________。
(3)如果下图中的标记基因是质粒(作运载体)中唯一的标记基因,那么目的基因不能插入的位点是图中的_______处。(用图中的字母填写)
(4)要使运载体与抗虫基因连接,首先应使用______进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为,则能与该运载体连接的抗虫基因分子末端是________。采用_______将运载体与抗虫基因连接,连接后得到的DNA分子称为________。
(5)将连接得到的DNA分子导入土壤农杆菌,然后用该菌去感染棉花细胞,利用_______的表达来检测目的基因已经成功导入。再利用_________技术将受体细胞诱导成具有抗虫能力的棉花小植株。
(6)基因工程成功的标志是__________的成功表达。
正确答案
(1)种群密度(种群数量)
(2)人工合成基因(反转录法、化学合成法) 直接分离法(鸟枪法、散弹射击法) 间隔的、不连续的
(3)B、C、D
(4)(同种)限制性内切酶 DNA连接酶 重组DNA(重组质粒)
(5)标记基因 植物组织培养
(6)目的基因(抗虫基因)
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