- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图,据图回答:
(1)过程①表示采取_________的方法来获取目的基因。
(2)形成图中②含有目的基因的DNA(重组质粒)需要的酶包括:________和__________。
(3)图中③过程用人工方法,使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内,一般将受体大肠杆菌用___________处理,使细胞成为_______,从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒,可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有_________的培养基上,若细菌能够生长,说明:已导入了重组质粒或普通质粒A,理由:___________。
(4)基因工程的第四步中,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质,用到的技术分别是_______、________。
正确答案
(1)反转录
(2)限制酶;DNA连接酶
(3)Ca2+(或CaCl2 );感受态细胞;(氨苄)青霉素;普通质粒A和重组质粒都有抗氨苄青霉素基因
(4)DNA分子杂交技术;抗原-抗体杂交技术
基因工程,是在DNA上进行的分子水平的设计施工,需要有专门的工具。基因的“剪刀”指的是____________________,基因的针线指的是___________,基因的运载工具______________。基因工程操作的基本步骤___________、__________、_____________、_______________。
正确答案
限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 提取目的基因 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有_______个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越_____。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是_____。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_____酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_______。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_______的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
正确答案
(1)0、2
(2)高
(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质
下图分别表示的是基因的结构示意图和科学家通过基因工程培育抗虫棉时,从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因开始,到“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请回答下列有关问题:
(1)图C中的目的基因是从图A和图B中哪一个基因提取的?___________,说明理由____________。
(2)图C中①过程需要工具酶是________和__________。
(3)图C中的III是导入目的基因的受体细胞,经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析,该植株含有一个携带目的基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上该转基因植株自交F1代中仍具有抗虫特性的植株占植株总数的_________,原因是_____________。
(4)科学家认为,此种“转基因的抗虫棉”种植后,也可能出现以前从没有过的不抗虫植株,此植株形成的原因最可能是_________________。
(5)如果在长期种植过程中,抗虫棉逐渐丧失抗虫特性,用现代进化理论解释原因:______________。
正确答案
(1)A基因 抗虫棉培育用的目的基因是从原核生物苏云金芽孢杆菌体内提取的,原核生物基因的编码区是连续的、不间隔的
(2)限制性内切酶 DNA连接酶
(3)3/4 雌雄配子各有1/2含抗虫基因,受精时雌雄配子随机结合(答案合理即可给分)
(4)基因突变
(5)长期选择,使棉铃虫种群内抗性基因频率不断提高的结果
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaI切割,原因是_________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_______。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_______酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了____。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在____的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
正确答案
(1)0、2
(2)高
(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质
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