- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用___________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是___________(填字母代号)。
A．启动子 B．tetR C．复制原点 D．ampR(3)过程①可采用的操作方法是____________(填字母代号)。
A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是___________。
(5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的____________性。
(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_______________(填字母代号)技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原-抗体杂交 D．PCR
正确答案
(1)Hind Ⅲ和BamH I 氨苄青霉素
(2)A
(3)C
(4)胚胎移植技术
(5)全能
(6)C
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解，请据图回答：
(1)图中②所示的结构是___________。
(2)图示过程应用了多种生物工程技术，其中__________技术是过程③的基础。
(3)过程④通常用②做受体细胞的原因是②细胞尚未__________。
(4)过程④的完成需要用到的基因操作工具有_____________。
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是_____________。
正确答案
(1)内细胞团(或胚胎干细胞)
(2)动物细胞培养
(3)增殖分化
(4)限制酶、DNA连接酶和(运)载体
(5)(基本)没有(免疫)排斥(异)反应
人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。下图是利用牛奶乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
(1)以上过程中涉及到的现代生物技术，属于细胞水平的有：______。
(2)在基因工程中，我们称①为目的基因，获取目的基因时可能用到的工具酶是________。在①进入③之前要构件基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有_________，实现①进入③的常用方法是________。
(3)图中②一般经过________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在________时期进行。
(4)把⑤送入⑦的最佳时期是________。用这种方法生产药物与工厂化生产药物的优越性在于__________。
正确答案
(1)核移植技术、动物细胞培养
(2)限制酶；启动子、终止子、标记基因；显微注射法
(3)胰蛋白酶或胶原蛋白酶；减数第二次分裂中期
(4)桑葚胚或囊胚；节约资源、降低成本等
人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大，通常从人血中提取。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：
Ⅰ．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ．将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ．电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。请回答下列问题：
(1)一般情况下，良种奶牛所排出的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，通过________的方法可以获得更多卵母细胞。
(2)步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对精子进行__________处理。
(3)步骤Ⅱ中，将目的基因导入受精卵最为有效的方法是__________。导入前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤属于基因工程操作“四步曲”中的___________。
(4)实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐、有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和_____________。
(5)若需迅速得到大量转基因奶牛，可采用下列处理方法：在步骤Ⅳ中将早期胚胎分离成若干个胚胎，让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时，应选择发育至____________阶段的胚胎进行操作，分割时必须注意要将早期胚胎中的_______________均等分割。
正确答案
(1)用促性腺激素处理(或使其超数排卵处理，或从屠宰场已屠宰母牛的卵巢中采集、培养，答出其中之一即可)
(2)获能
(3)显微注射(技术)；基因表达载体的构建
(4)动物血清
(5)囊胚(或桑椹胚)；内细胞团
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