- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
组织型纤溶酶原激活剂(tPA)在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用,如图是利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA)的图解,据图回答下列问题:
(1)过程①在构建的基因表达载体中,应将tPA基因与______基因的启动子等调控组件结合.
(2)在单个成纤维细胞的培养过程中,需要在培养箱中加入一定量的二氧化碳,目的是______.
(3)④涉及到的生物技术为______,得到的转基因牛C称之为转基因克隆动物.
(4)从A到B过程中所用的胚胎工程技术是______.从分子水平上看,若______,则可确定转基因牛培育成功.
正确答案
解:(1)要利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA),在构建的基因表达载体中,应将tPA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合,使目的基因在乳腺组织中特异性表达.
(2)动物细胞培养过程中,需要在培养箱中加入一定量的二氧化碳,目的是维持培养液的pH.
(3)④过程采用了体细胞核移植技术.
(4)从A到B的⑤过程中采用了早期胚胎培养技术.从分子水平上看,若转基因牛的乳汁中含有tPA,则可确定转基因牛培育成功.
故答案为:
(1)乳腺蛋白
(2)维持培养液的pH值
(3)体细胞核移植技术
(4)早期胚胎培养 转基因牛的乳汁中含有tPA
解析
解:(1)要利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂(tPA),在构建的基因表达载体中,应将tPA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合,使目的基因在乳腺组织中特异性表达.
(2)动物细胞培养过程中,需要在培养箱中加入一定量的二氧化碳,目的是维持培养液的pH.
(3)④过程采用了体细胞核移植技术.
(4)从A到B的⑤过程中采用了早期胚胎培养技术.从分子水平上看,若转基因牛的乳汁中含有tPA,则可确定转基因牛培育成功.
故答案为:
(1)乳腺蛋白
(2)维持培养液的pH值
(3)体细胞核移植技术
(4)早期胚胎培养 转基因牛的乳汁中含有tPA
应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品.请据图回答下列问题:
(1)在培育转人生长激素基因牛的过程中,①过程需要的工具酶是______和______.②过程常用的方法是______.
(2)转基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的前端必须有______,它是______识别和结合的部位.除此之外构建好的表达载体中还必须有______、______和______.
(3)动物细胞培养过程中,培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2,CO2的主要作用是______.为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境,还要在细胞培养液中添加一定量的______,以防培养过程中的污染.
(4)在抗虫棉培育过程中,进行④过程最常用的方是______.⑤过程用到的技术是______,该技术的原理是利用植物细胞的______,首先经过脱分化形成______,在经过______过程产生胚状体或丛芽,最终培育出完整的抗虫棉植株.
正确答案
解:(1)由图可知,①过程表示基因表达载体的构建,该过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶;当受体细胞为动物细胞时,导入目的基因的方法为显微注射法.
(2)在基因表达载体中,人生长激素基因的前端必须有启动子,是RNA聚合酶识别和结合位点,驱动基因转录出信使RNA,最终获得生长激素.除此之外构建好的表达载体中还必须有终止子、目的基因和标记基因.
(3)动物细胞培养过程中,培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2,CO2的主要作用是维持培养液的PH.为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境,还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染.
(4)在抗虫棉培育过程中,④将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法.⑤过程用到的技术是植物组织培养,该技术的原理是利用植物细胞的全能性,首先经过脱分化形成愈伤组织,在经过再分化过程产生胚状体或丛芽,最终培育出完整的抗虫棉植株.
故答案为:
(1)限制性核酸内切酶 DNA连接酶 显微注射技术
(2)启动子 RNA聚合酶 终止子 目的基因 标记基因
(3)维持培养液的PH 抗生素
(4)农杆菌转换法 植物组织培养 全能性 愈伤组织 再分化
解析
解:(1)由图可知,①过程表示基因表达载体的构建,该过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶;当受体细胞为动物细胞时,导入目的基因的方法为显微注射法.
(2)在基因表达载体中,人生长激素基因的前端必须有启动子,是RNA聚合酶识别和结合位点,驱动基因转录出信使RNA,最终获得生长激素.除此之外构建好的表达载体中还必须有终止子、目的基因和标记基因.
(3)动物细胞培养过程中,培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2,CO2的主要作用是维持培养液的PH.为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境,还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染.
(4)在抗虫棉培育过程中,④将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法.⑤过程用到的技术是植物组织培养,该技术的原理是利用植物细胞的全能性,首先经过脱分化形成愈伤组织,在经过再分化过程产生胚状体或丛芽,最终培育出完整的抗虫棉植株.
故答案为:
(1)限制性核酸内切酶 DNA连接酶 显微注射技术
(2)启动子 RNA聚合酶 终止子 目的基因 标记基因
(3)维持培养液的PH 抗生素
(4)农杆菌转换法 植物组织培养 全能性 愈伤组织 再分化
绿色荧光蛋白基因(GFP)被发现以来,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白质位置的理想标记.请根据图回答下列问题.
(1)已知GFP是从水母的体细胞中提取出的一种基因,提取它时通常利用的酶是______.
(2)若GFP的一端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-,另一端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-,则在构建含该GFP的重组质粒时,应选用的限制酶是______(请在图中选择).
(3)若将含GFP的重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞,则常用的方法是______.检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上,可采用______技术进行检测.
(4)欲进一步将已导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞培养成带有绿色荧光蛋白质的转基因猪,还需利用______技术,将导入了重组质粒的猪胎儿成纤维细胞的细胞核移植到去核的猪的卵母细胞中,从而形成重组细胞,再进一步培养成旱期胚胎,通过______技术转移到猪的子宫中,从而得到绿色荧光蛋白转基因克隆猪.
(5)为了加快繁殖速度,可对(4)中的早期胚胎进行______.也可将得到的绿色荧光蛋白转基因克隆猪(雌性),用______处理,使之超数排卵,提高其繁育能力.
正确答案
解:(1)切割目的基因时利用了酶的专一性,通常利用的酶是限制酶.
(2)根据题中信息及所学的相关内容,能与-TCGA-互补配对的是-AGCT,能与-TCGA-互补配对的是-ACGT-,则在构建含GFP的重组质粒A时,应选用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ.
(3)将目的基因导入动物细胞常用的方法为显微注射法.检测目的基因是否进入受体细胞的方法为DNA分子杂交.
(4)目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体,用动物体细胞克隆的动物,实际上是通过核移植来实现的.通过胚胎移植可将早期胚胎移入猪的子宫中.
(5)采用胚胎分割移植技术,可获得多个后代.也可以将已培育的转基因克隆母猪利用促性腺激素处理,使之超数排卵,从而提高其繁育能力.
故答案为:
(1)限制酶
(2)HindⅢ和PartⅠ
(3)显微注射技术 DNA分子杂交
(4)核移植 胚胎移植
(5)胚胎分割 促性腺激素
解析
解:(1)切割目的基因时利用了酶的专一性,通常利用的酶是限制酶.
(2)根据题中信息及所学的相关内容,能与-TCGA-互补配对的是-AGCT,能与-TCGA-互补配对的是-ACGT-,则在构建含GFP的重组质粒A时,应选用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ.
(3)将目的基因导入动物细胞常用的方法为显微注射法.检测目的基因是否进入受体细胞的方法为DNA分子杂交.
(4)目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体,用动物体细胞克隆的动物,实际上是通过核移植来实现的.通过胚胎移植可将早期胚胎移入猪的子宫中.
(5)采用胚胎分割移植技术,可获得多个后代.也可以将已培育的转基因克隆母猪利用促性腺激素处理,使之超数排卵,从而提高其繁育能力.
故答案为:
(1)限制酶
(2)HindⅢ和PartⅠ
(3)显微注射技术 DNA分子杂交
(4)核移植 胚胎移植
(5)胚胎分割 促性腺激素
小鼠弯曲尾(B)对正常尾(b)为显性,将一弯曲尾雄鼠与一正常尾雌鼠交配,F1为弯曲尾雌鼠:正常尾雄鼠=1:1.遗传学家将一个外源DNA片段导人到F1弯曲尾雌鼠的体细胞中,利用克隆技术获得一只转基因正常尾小鼠.该DNA片段插入小鼠染色体上的位置有多种可能,如图表示了其中2种.(说明:插入的DNA片段本身不控制具体的性状;小鼠体内存在该DNA片段时B不表达,但b基因的表达不受影响.)请回答有关问题:
(1)在获得转基因动物的过程中,最常用的运载工具是______,限制酶识别双链DNA分子的______,并切割DNA双链.
(2)控制小鼠尾形的基因位于______染色体上,子一代雌鼠的基因型是______.
正确答案
解:(1)在获得转基因动物的过程中,最常用的运载体是质粒,限制酶识别双链DNA分子的磷酸二酯键,并切割DNA双链.
(2)小鼠弯曲尾(B)对正常尾(b)显性,将一弯曲尾雄鼠与一正常尾雌鼠交配,F1中弯曲尾雌鼠:正常尾雄鼠=1:1,说明小鼠尾形表现与性别有关,目的基因位于X染色体上,根据亲子代情况,可以推出亲本基因型是XbXb 和XBY子一代雌鼠基因型为XBXb.
故答案为:
(1)质粒 磷酸二酯键
(2)X XBXb
解析
解:(1)在获得转基因动物的过程中,最常用的运载体是质粒,限制酶识别双链DNA分子的磷酸二酯键,并切割DNA双链.
(2)小鼠弯曲尾(B)对正常尾(b)显性,将一弯曲尾雄鼠与一正常尾雌鼠交配,F1中弯曲尾雌鼠:正常尾雄鼠=1:1,说明小鼠尾形表现与性别有关,目的基因位于X染色体上,根据亲子代情况,可以推出亲本基因型是XbXb 和XBY子一代雌鼠基因型为XBXb.
故答案为:
(1)质粒 磷酸二酯键
(2)X XBXb
毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.
(1)过程①是基因工程的核心,通过过程①构建的基因表达载体除了含有KIFⅡ基因外,还必须有启动子、终止子以及______等.
(2)过程②必需加入______酶,才能获得单个的成纤维细胞.
(3)在过程③中,为了获得更多的卵(母)细胞,需用______处理成年母绒山羊.
(4)在过程④进行之前,需对卵(母)细胞进行______处理.过程④称为______.
(5)过程⑤称为______,进行该过程的最佳时期是______,过程⑤能够成功进行的生理基础是______.
正确答案
解答:解:(1)基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等.
(2)动物细胞培养时,需用胰蛋白酶将动物组织块分散成单个细胞.
(3)要得到更多的卵(母)细胞需用促性腺激素对母畜进行超数排卵处理.
(4)图中④表示核移植过程,成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核.
(5)⑤表示胚胎移植过程,应该选择处于桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植;胚胎移植能够成功进行的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应.
故答案为:
(1)标记基因
(2)胰蛋白酶(胶原蛋白酶)
(3)促性腺激素
(4)去核 核移殖
(5)胚胎移植 桑椹胚期或囊胚期 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
解析
解答:解:(1)基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等.
(2)动物细胞培养时,需用胰蛋白酶将动物组织块分散成单个细胞.
(3)要得到更多的卵(母)细胞需用促性腺激素对母畜进行超数排卵处理.
(4)图中④表示核移植过程,成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核.
(5)⑤表示胚胎移植过程,应该选择处于桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植;胚胎移植能够成功进行的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应.
故答案为:
(1)标记基因
(2)胰蛋白酶(胶原蛋白酶)
(3)促性腺激素
(4)去核 核移殖
(5)胚胎移植 桑椹胚期或囊胚期 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应
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