- 生物技术在其他方面的应用
- 共169题
37.微生物及基因工程:
据统计,维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡。因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体——胡萝卜素的大米,胡萝卜素在人体内会转化成维生素A,可以缓解人体维生素A缺乏。这种大米因胡萝卜素含量极高因而呈现金黄色,被称为“黄金大米”。
黄金大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作,将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中,具体原理如下图所示。
(1)图14原理中X表示______________________;Y过程表示________________________。
(2)图14中Z过程需要用到的植物激素是________。
A.生长激素 B.细胞分裂素
C.赤霉素 D.脱落酸
E.乙烯 F.吲哚乙酸
根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成,下图是Ti质粒的具体组成。(T-DNA区大小约17kb)
(3)若将图15质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切(各个片段大小不一致),并用凝胶电泳分离酶切后的片段,则电泳结果应为上图16(箭头为电泳方向)中的____________。
将胡萝卜素基因整合进入Ti质粒时,使用限制酶II进行酶切后进行连接,当整合后的Ti质粒进入农杆菌后,需要对农杆菌进行培养,下表为培养农杆菌用的YEB培养基。
(4)据表分析农杆菌的同化作用类型为____________型。
(5)该培养基从物理形态上分应属于____________培养基。培养基配制完成后需要进行高压蒸汽灭菌,其条件是____________________________________。
(6)由表中可知,该培养基含有下列营养成分中的____________。
A.碳源 B.氮源
C.无机盐 D.生长因子
(7)为了筛选符合条件的农杆菌,可以在培养基中加入卡那霉素进行筛选。则可以在此培养基中生存的农杆菌类型为________________________________________________。
(8)根癌农杆菌介导法转基因原理如图17所示。当植物受伤时会产生一种信号分子,该信号会作用于农杆菌细胞表面的____________。试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程:___________________________________________________________________。
正确答案
(1)重组质粒 ;重组质粒导入农杆菌
(2)BF
(3)A
(4)异养
(5)固体 ;1.05kg/cm2,121℃,15~30min
(6)ABCD
(7)导入未重组的Ti质粒农杆菌及导入重组质粒的农杆菌。
(8)受体 ;1激活vir区表达蛋白装配成通道复合体。2激活vir区表达蛋白以诱导T-DNA区形成T复合体通过通道复合体进入植物细胞后整合进入植物基因组DNA。
解析
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知识点
下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是
正确答案
解析
洗涤剂能够瓦解细胞膜,但不能增加DNA的溶解度,A错;将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴中变蓝,不需要冷却,B错;常温下菜花匀浆中有些酶类可破坏DNA,而影响DNA的提取,C正确;用玻棒缓慢搅拌滤液并不影响DNA的含量,而在粗提取时,缓慢撑拌有利于DNA附着,D错。
知识点
某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验,操作错误的是
正确答案
解析
加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作,A错误;利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开,起到纯化的作用,B正确;加入酒精溶液,静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,防止断裂,C正确;用二苯胺鉴定DNA需要水浴加热,D正确。
知识点
下列有关NaCl在生物技术实践中的应用,正确的是( )
正确答案
解析
略
知识点
3.关于DNA的实验,叙述正确的是( )
正确答案
解析
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知识点
下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,错误的是( )
正确答案
解析
酵母和菜花都含DNA物质,都可用来提取DNA,A项正确。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,所以DNA在2 mol/L的NaCl溶液或者蒸馏水中都能溶解,B项正确。鸡血细胞加水搅拌,细胞吸水涨破释放出DNA,DNA存在于溶液中,C项错误。DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应,冷却后变蓝,D项正确。
知识点
某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份l0 g。剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置于一20℃条件下保存24 h。
DNA粗提取:
第一步:将上述材料分别放人研钵中,各加入l5 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤.
取滤液备用。
第二步:先向6只小烧杯中分别注人10mL滤液,再加人20 mL体积分数为95%的冷酒精
溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。
分析上述实验过程,回答下列问题:
(1)该探究性实验课题名称是 。
(2)第二步中”缓缓地”搅拌,这是为了减少 。
(3)根据实验结果,得出结论并分析。
①结论1:与20℃相比,相同实验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多。
结论2: 。
②针对结论I.请提出合理的解释: 。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性.在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是: 。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
正确答案
解析
本题考查了DNA粗提取技术的原理、操作过程及同学分析、判断能力,从题目实验看出,该实验的课题是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。在试用第二步中,为了防止DNA断裂,要缓缓的搅拌,从表中结果看出,由于低温抑制了相关酶的活性,DNA降解慢,使得相同材料在低温保存下,DNA提取量大,在相同条件先,蒜黄蓝色最深,说明相同条件下从蒜黄中提取的DNA量最大,由于氯仿密度比水大,可使蛋白质变性后沉淀,而与水、DNA不相溶,这样可将第三步获得的溶液与等量的氯仿混合,静置一段时间,吸取上清液即可得到较纯净的DNA。
知识点
在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是
正确答案
解析
四个选项,密切联系实验材料的选择,如D,可用菜花作材料,但由于是植物材料,DNA的释放环节需加上研磨的操作。涉及除杂,如A、B,当NaCl溶液浓度被调至0.14 mol/L时,DNA在其中的溶解度最小,会大量析出,此时应滤取——而不是滤去析出物(一字之差噢);B项,利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中会溶解或析出的特点,可以除去蛋白质等杂质,而选用木瓜蛋白酶,则可借助酶作用的特异性,水解蛋白质,进而达到除杂的效果。还关联上DNA的鉴定,C项描述中缺少加热,自然不会立即呈现颜色变化。
知识点
25.图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定冶实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是( )
A.图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同
B.图1 中完成过滤之后保留滤液
C.图2 中完成过滤之后弃去滤液
D.在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
正确答案
BCD
解析
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知识点
23.下列关于实验现象与结果的分析,错误的是( )
A.组织切片上滴加苏丹Ⅲ染液,显微观察有橘黄色颗粒说明有脂肪
B.组织样液中滴加斐林试剂,不产生砖红色沉淀说明没有还原糖
C.洋葱表皮细胞滴加蔗糖溶液后,发生质壁分离说明细胞有活性
D.PCR 产物中加入二苯胺试剂,加热变蓝说明有目的 DNA 产生
正确答案
BD
解析
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知识点
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