- 微生物的接种方法
- 共101题
土壤中生活着肉眼看不见的细菌、丝状真菌和呈放射状的放线菌,这些微生物的数量是极其繁多的。某同学要探究土壤微生物对淀粉是否有分解作用,设计了以下实验,请你帮助完成有关问题。
实验假设:__________________________。
实验用具及药品:烧杯、纱布、玻璃棒、试管、酒精灯、水、蒸馏水、碘液、斐林试剂、淀粉糊等。
实验步骤:
(1)将取自农田、林地或花盆等处的土壤放入里面垫有厚纱布的烧杯中,加水搅拌,然后将纱布连同土壤一起取出。将留在烧杯中的土壤浸出液静置一段时间备用。
(2)另取两只烧杯,编号为A、B,_______________。
(3)在室温(20℃左右)下放置7d,分别从A、B烧杯中各取两份溶液,每份均为20mL,并分别放入四支试管中,依次编号为A1、A2、B1、B2。
(4)在A1、B1试管中加入___________;在A2、B2试管中加入__________,并进行沸水浴。
(5)观察试管中溶液的颜色变化,记录实验结果。
实验现象:
①.如果支持所做的实验假设,则实验现象是_________________。
②.如果不支持所做的实验假设,则实验现象是___________________。
正确答案
实验假设:土壤微生物对淀粉有分解作用(或土壤微生物对淀粉无分解作用)
(2)放入等量淀粉糊,在A烧杯中加入适量土壤浸出液,在B烧杯中加入适量蒸馏水
(4)碘液 斐林试剂
(5)①.与B1、B2相比,A1无蓝色出现,A2出现砖红色沉淀(或A1、A2的颜色分别与B1、B2相同,A1出现蓝色,A2无砖红色沉淀)
②.A1、A2的颜色分别与B1、B2相同,A1出现蓝色,A2无砖红色沉淀(或与B1、B2相比,A1无蓝色出现,A2出现砖红色沉淀)(说明:其他正确答案也可,但实验现象分析必须与实验步骤相一致)
某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。
(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1g,置于经过__________法灭菌处理的液体培养基中,28℃振荡培养。
(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_____________处理。之后,将菌液涂布接种于以____________为唯一碳源的固体培养基上30℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈____________状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计___________作为空白对照。
(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是_____________,则说明此种菌能够___________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用法_____________接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。
正确答案
(1)高压蒸汽灭菌
(2)系列稀释(或“梯度稀释”) 淀粉 倒置 未接种的空白培养基(或接种等量无菌水的培养基)
(3)出现透明圈 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 (平板)划线
富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。富集条件可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面,使仅适合该条件的微生物数量大大增加。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物(对羟基苯甲酸)的微生物的实验过程。请分析后回答:
(1)所需的土壤样品应该从_________(填“农田”、“工厂”或“森林”)取得。
(2)该实验的原理是____________。
(3)①→③重复培养的目的是__________。该过程中使用的培养基的物____________。该培养基中的碳源是___________。根据用途划分,该培养基的类型为____________。
(4)⑤中主要是__________形成的菌落。
(5)⑥为__________组,⑦为_________组,设置对照的目的是__________。
(6)实验操作过程中的无菌操作有:__________(至少写两点)。
正确答案
(1)工厂
(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的培养基作选择培养基,经富集培养,选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物
(3)增大能分解对羟基苯甲酸的微生物的比例 液态的 对羟基苯甲酸 选择培养基
(4)能分解对羟基苯甲酸的微生物
(5)对照 实验 说明通过富集培养得到了目标微生物
(6)接种环在火焰上灼烧灭菌;在酒精灯火焰旁挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题:
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了______和_______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是_________。
(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是___________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于_________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种_________作为对照进行实验。
(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越__________。
(5)细菌培养常用的接种方法有___________和___________。
正确答案
(1)氮源(碳源不作要求);碳源;无机盐和水
(2)高压蒸汽灭菌
(3)恒温培养箱;无菌水
(4)大
(5)平板划线法;稀释平板涂布法
尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示,请分析回答问题:
(1)此培养基能否用于植物组织培养?_______,理由是__________。
(2)培养基中加入尿素的目的是_______,这种培养基属于_______培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_________和_________,实验需要振荡培养,原因是__________。
(4)转为固体培养时,常采用_________法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)下列材料或用具中:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。需要灭菌的是_________;需要消毒的是____________(填序号)。
(6)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有____________(填序号)
①由于土样不同 ②由于培养基被污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_________,细菌体内的___________将尿素分解为氨,pH增高,使指示剂变红色。
正确答案
(1)不能 缺少植物激素(或缺少植物需要的各种营养物质)
(2)筛选目的菌 选择
(3)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气
(4)稀释涂布平板(平板划线)
(5)①和② ③
(6)①②③
(7)酚红指示剂 脲酶
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