热门试卷

解：（1）图中EcoRⅠ、HpaⅠ是两种限制酶．

（2）图中EcoRⅠ、HpaⅠ是两种限制酶切割后产生的末端分别是粘性末端和平末端．

（3）一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．

故答案为：

（1）两种限制酶

（2）粘性末端  平末端

（3）能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂

解：（1）图中①和⑤均表示基因表达载体的构建过程，该过程中需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶连接目的基因和运载体以形成重组质粒．基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因．

（2）显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法，此方法的受体细胞多是受精卵；将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．

（3）以培育出的蜘蛛羊作为乳腺生物反应器时，最后从动物的乳汁中获取目的基因表达产物，即蛛丝蛋白．还可以形成膀胱生物反应器，从尿液中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程．

（4）AC、该过程不用解旋酶破坏氢键，A错误、C正确；

B、该过程没有用到限制酶破坏磷酸二酯键，B错误；

D、该过程在高温中进行，需要耐高温DNA聚合酶，与人体不完全相同，D错误．

故选：C．

（5）图中催化C过程的酶是耐高温DNA聚合酶，具有耐高温的特点．应用PCR技术可以对DCD基因进行体外大量扩增，反应体系中应提供模板、引物、4种游离的脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，同时通过控制温度实现DNA的解聚，使DNA复制在体外反复进行．

（6）如果循环3次，则可形成8个DNA分子，其中含有15N标记的DNA分子为2个，占子代DNA的．

根据DNA分子中的碱基互补配对原则可知，DNA分子中A+C=T+G=50%，如果DNA分子共有a个碱基对，其中胞嘧啶m个，则胸腺嘧啶T=（a-m）个，此DNA分子连续进行410次复制，增加了210-1=1023个DNA分子，因此需要提供游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸1023（a-m）个．

故答案为：

（1）限制酶、DNA连接酶 目的基因、启动子、终止子、标记基因

（2）受精卵   显微注射法  体细胞  农杆菌转化法

（3）乳汁  尿液

（4）C  

（5）耐高温DNA聚合酶  耐高温  引物、4种游离的脱氧核苷酸

（6）  1023（a-m）

解：（1）要利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA），在构建的基因表达载体中，应将tPA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合，使目的基因在乳腺组织中特异性表达．

（2）动物细胞培养过程中，需要在培养箱中加入一定量的二氧化碳，目的是维持培养液的pH．

（3）④过程采用了体细胞核移植技术．

（4）从A到B的⑤过程中采用了早期胚胎培养技术．从分子水平上看，若转基因牛的乳汁中含有tPA，则可确定转基因牛培育成功．

故答案为：

（1）乳腺蛋白

（2）维持培养液的pH值

（3）体细胞核移植技术

（4）早期胚胎培养     转基因牛的乳汁中含有tPA

解：（1）由图可知，①过程表示基因表达载体的构建，该过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶；当受体细胞为动物细胞时，导入目的基因的方法为显微注射法．

（2）在基因表达载体中，人生长激素基因的前端必须有启动子，是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出信使RNA，最终获得生长激素．除此之外构建好的表达载体中还必须有终止子、目的基因和标记基因．

（3）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2，CO2的主要作用是维持培养液的PH．为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．

（4）在抗虫棉培育过程中，④将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法．⑤过程用到的技术是植物组织培养，该技术的原理是利用植物细胞的全能性，首先经过脱分化形成愈伤组织，在经过再分化过程产生胚状体或丛芽，最终培育出完整的抗虫棉植株．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶    DNA连接酶    显微注射技术

（2）启动子   RNA聚合酶    终止子   目的基因    标记基因

（3）维持培养液的PH   抗生素

（4）农杆菌转换法  植物组织培养   全能性  愈伤组织  再分化