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简答题

PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:  

(1)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是:_________。

A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键  B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键

C.该过程不需要解旋酶的作用  D.该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)从图中可知,催化C过程的酶是________,它与正常细胞内的酶区别是_____;PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外,还需要满足的两个基本条件是__________。

(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“94℃—55℃—72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占_________。如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸___________个。

正确答案

(1)C

(2)Taq酶(热稳定DNA聚合酶);耐高温;引物和四种游离的脱氧核苷酸(原料)

(3)25%;(210-1)(a-m)

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填空题

根据下面的材料,回答问题:

  美国科学家穆里斯发明的PCR技术,是一种DNA分子“复印机”,它可以在数小时内将一个DNA分子复制出1千亿个,解决了检测样本扩增的难题。在人类基因组计划实施中,PCR技术使每个核苷酸的识别成本降至5~10美元。穆里斯因发明PCR技术荣获了诺贝尔奖。

(1)DNA分子在复制时需要大量的____作原料,在DNA聚合酶的催化下以解旋后的单链DNA为______,进行生物合成。

(2)在DNA分子解旋时必须加热,普通的酶容易_______,而耐93℃左右高温的TaqDNA聚合酶的发现,解决了酶重复使用的难题,使链式反应成为可能。每次循环可以分为________、_______、________三步。

(3)耐高温酶的发现和应用说明了地球生物_______的重要性,大自然的______库是人类的宝贵财富。

正确答案

(1)脱氧核苷酸      模板

(2)变性(失活)      变性      复性      延伸

(3)多样性      基因

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简答题

胚胎干细胞介导法是转基因动物培育的主要途径之一。通过将外源基因导入胚胎干细胞,然后将转基因的胚胎干细胞注射入受体动物胚胎后,可参与宿主的胚胎构成,形成嵌合体,直至达到种系嵌合。如图是实验过程示意图,请分析回答下列问题。

(1)为了提高实验成功率,通常需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。PCR反应与动物体内正常DNA复制相比,最主要的区别是____________(至少写出两点)。

(2)胚胎干细胞(ES细胞)体外培养时需要在____________(至少写出三点)等条件下进行。由于人们对细胞所需营养物质还没有搞清楚,因此在使用合成培养基培养细胞时需加入一定量的____________。

(3)图中①表示在将ES细胞置于具有___________作用的培养基上培养,以获得所需的胚胎干细胞。②表示将目的基因改造后的ES细胞导人_____________时期的胚胎。理想中的嵌合体小鼠C中,导入外源目的基因的ES细胞最好发育成____________(填器官名称),从而真正意义上获得含目的基因的F1个体。

(4)1984年我国第一例转生长激素(GH)基因的鱼诞生,但鱼类易于逃逸、扩散,会引起生态安全性问题,试分析原因:_____________。

正确答案

(1)PCR反应需要热稳定DNA聚合酶(Taq酶)、(DNA)引物和高温,不需要解旋酶

(2)无菌无毒、适宜的温度和pH、营养充足、气体环境(3点需答全)    动物血清(或血浆)

(3)筛选(选择)     囊胚(桑椹胚)     睾丸(精巢)或卵巢

(4)转基因鱼与野生鱼杂交,使野生鱼带有转基因,从而具有生长优势,使其捕食对象大量减少,并与其他物种竞争,引起生态危机

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简答题

孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料,也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害,因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图所示。分析并回答:

(1)从①到③的培养过程中培养液应加入______作为唯一碳源,此过程的目的是______和_________。

(2)使用__________法可以在④上获得单个菌落。

(3)若要对获得的菌株A进行分类鉴定,可先利用____________DNA扩增。

(4)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响,实验结果如下图。

由上述结果可以看出,与不加金属离子的对照组相比,多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有__________作用,唯有Pb2+的作用相反。若要排除Pb2+本身对孔雀石绿有降解作用,则应设置_______________的培养基样本作为对照。

正确答案

(1)孔雀石绿      筛选出菌株A      增加菌株A的浓度(扩大培养)

(2)稀释涂布平板(或平板划线)

(3)PCR

(4)抑制      含等量的Pb2+

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简答题

2004年12月,印度洋发生海啸,遇难者达20多万人,中国科学家参与了尸体的辨认工作,主要是从尸体细胞与家属提供的死者生前生活用品中分别提取DNA,然后进行比较确认,请回答:

(1)人体DNA的主要载体是__________。

(2)为了保证实验的准确性,需要先用PCR技术克隆出较多的DNA样品,操作时DNA分子受热解旋为单链,然后在____________酶催化下合成新链,如此循环扩增。

(3)上表所示为分别从尸体和死者生前的生活用品中提取的三条相同染色体上同一区段DNA单链的碱基序列,据此可判断,三组DNA中不是同一人的是____________。

(4)此方法还可用于判断不同物种之间亲缘关系的远近,科学家分别提取了甲、乙、丙三种生物的DNA分子做鉴定,结果如上图。请问其中亲缘关系最近的是_________,这种方法就是___________。该方法还可以用于______________(举两个例子)。

正确答案

(1)染色体

(2)热稳定DNA聚合

(3)C

(4)乙和丙    DNA分子杂交技术    检测目的基因是否导入受体细胞;从分子水平辅助确定生物的进化地位和亲缘关系(或快速灵敏检测饮用水中病毒的含量)等

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简答题

“DNA指纹技术”可用于亲子鉴定,亲子鉴定所检测的“遗传因子”都是符合孟德尔遗传规律的,并以此进行评判。

(1)理论上,在鉴定中只要出现排除指标并且充分排除基因突变的可能,就可以以此作出排除存在亲缘关系的结论。下列争议父亲A、B、C、D四人中,可完全排除孩子的生物学父亲的是_____。(说明:下划线字体表示来自父亲的遗传因子。无下划线字体表示来自母亲的遗传因子)

(2)下图为通过提取某小孩和其母亲以及待测定的三位男性的DNA,分别由________酶处理后,生成含有若干DNA片段,并已进行______扩增得到的混合物,然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱示意图,则该小孩的真正生物学父亲是________。

(3)试问:PCR技术与人体内DNA复制相比有何特殊之处?___________________。

(4)2002年6月,我国第一张18位点的“基因型身份证”在湖北武汉诞生。

①.现行居民身份证具有一定时效性(有效期)如10年、20年不等,“基因型身份证”是否如此?______,说明理由:____________________。

②.是否存在两个人的“基因型身份证”完全相同的情况?___________________。

正确答案

(1)C

(2)限制性核酸内切   PCR   B

(3)离体条件、高温酶

(4)①.否   同一个体的不同生长发育阶段和不同组织的DNA是相同的。所以,它具有高度的个体特异性和稳定性  ②.存在(同卵双生的双胞胎)

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简答题

DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性,随着NaCl溶液浓度的变化而变化。

(1)请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA溶解度最高的一种是______。

A.0.14mol/L  B.2mol/L  C.0.15mol/L  D.0.3mol/L

(2)DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以________________,可以推测溶于酒精中的物质可能有________________。

(3)利用DNA遇________呈蓝色的特性,将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有____________的试管中加入4mL的__________。混合均匀后,将试管置于________5min,待试管________,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明DNA耐________温。

(4)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为________、________、________三个步骤。DNA的羟基(-OH)末端称为________。PCR技术与细胞内DNA复制在解旋时原理不同:细胞内复制利用________使双链间氢键断裂,而PCR技术利用________原理,使双链氢键断裂,DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。

(5)一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后,标记的DNA分子占DNA分子总数的________。假定DNA片段含200对脱氧核苷酸,经3次扩增,从理论上计算需要________个游离脱氧核苷酸,若某样品DNA中共有3000个碱基对,其碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到1000个拷贝(与样品相同的DNA),至少需要向试管中加入________个腺嘌呤脱氧核苷酸。

(6)DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是______。

正确答案

(1)B

(2)除去杂质;某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质

(3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺试剂;沸水中水浴加热;冷却后;高

(4)变性;复性;延伸;3′端;解旋酶;热变性;5′端;3′端

(5)1/16;2800;999000

(6)C

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填空题

2001年,Schittek等科学家从人体汗液中分离得到一种称作Dermcidin(DCD)的人汗腺抗菌肽,这种物质具有抗细菌、真菌、病毒等的活性,有望成为替代普通抗生素的一类新型药物。研究人员已分离获得了控制DCD合成的基因。请据此回答问题。

(1)为了评估DCD的抗菌性,研究人员用大肠杆菌进行了抗菌实验。分别在未加入DCD的培养基和____的培养基中接种______。培养一段时间后,比较两种培养基中的_________,确定该物质的抗菌效果。实验所用培养基为细菌生长提供的主要营养有______。在此基础上,培养基还需满足细菌生长对________、特殊营养物质以及氧气的要求。

(2)应用PCR技术可以对DCD基因进行体外大量扩增。此过程需在一定的缓冲溶液中进行,反应体系中应提供模板、引物、________作为原料以及_______酶。同时,通过控制________条件使DNA复制在体外反复进行。理论上,若要将DCD基因转入其他生物,可将此基因与_______连接构建形成重组DNA之后导入受体细胞,在此构建过程中需用到的工具酶是_________。

正确答案

(1)加入DCD   (大肠杆菌)菌液   菌落数目   水、碳源、氮源、无机盐   pH

(2)4种游离的脱氧核苷酸   耐热的DNA聚合   温度   (运)栽体   限制酶和DNA连接酶

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在克隆技术出现之前,育种工作者已经开始采用胚胎分割移植方法尽快繁育更多的优质牛。请回答下列问题:

(1)胚胎分割移植要在受精卵培养到8个细胞的卵裂期时进行,其主要原因是此时还未出现______,此时的细胞属于____________干细胞的一类。

(2)胚胎分割可以看作_______繁殖或克隆的方法之一。

(3)通过胚胎分割移植培育出的这些小牛,其性别表现为__________。

A.雌、雄的可能性各占50% B.全为雌性或全为雄性 C.全为雌性 D.全为雄性

(4)通过体细胞克隆技术培育的小牛,其性别则取决于_________细胞的染色体组成。这样人们就可以根据需要,有目的地控制小牛的性别。

(5)PCR反应过程中除DNA模板、引物、原料和酶外,还需要一定的_______等条件。

正确答案

(1)细胞分化   全能(胚胎)

(2)无性

(3)B

(4)供体

(5)温度

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利用植物修复技术治理重金属污染的实质是将某种特定的植物种植在被重金属污染的土壤上,植物收获后进行妥善处理,就可将重金属移出土体。目前科学家正尝试应用生物工程技术培育符合植物修复技术要求的转基因植物。

(1)在应用植物修复技术治理被重金属污染的土壤时,需选择符合要求的植物,这遵循了生态工程的____原理。

(2)获得目的基因后可采用____技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起,是因为它们的分子结构都是_______结构。检测目的基因是否成功导入植物细胞,可采用的生物技术是________。

(3)将含有目的基因的植物细胞培养成植株需要应用_______技术,该技术的理论依据是__________。

正确答案

(1)协调与平衡

(2)PCR(多聚酶链式反应、聚合酶链式反应)      双螺旋      DNA分子杂交技术

(3)植物组织培养植物细胞的全能性

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简答题

如图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答: 

(1)在基因工程中,A→B为___________技术,利用的原理是_________,其中①为_________过程。

(2)加热至94℃的目的是使DNA中的________键断裂,这一过程在细胞内是通过__________作用来完成的。

(3)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板链延伸,最终合成两条DNA分子,此过程中的原料是_________,遵循的原则是__________。

(4)目的基因导入绵羊受体细胞常用___________技术。

(5)B→D为抗虫棉的培育过程,其中④过程常用的方法是_________,要确定的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体生物学水平上的鉴定过程:________________。

正确答案

(1)PCR;DNA复制;DNA解旋

(2)氢;解旋酶

(3)4种脱氧核苷酸;碱基互补配对原则

(4)显微注射

(5)农杆菌转化法;让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定性状

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2004年12月,印度洋发生海啸,遇难者达20多万人,中国科学家参与了尸体的辨认工作,主要是从尸体细胞与家属提供的死者生前生活用品中分别提取DNA,然后进行比较确认,请回答:

(1)人体DNA的主要载体是______________。

(2)为了保证实验的准确性,需要先用PCR技术克隆出较多的DNA样品,操作时DNA分子受热解旋为单链,然后在______________酶催化下合成新链,如此循环扩增。

(3)下表所示为分别从尸体和死者生前的生活用品中提取的三条相同染色体上同一区段DNA单链的碱基序列,据此可判断,三组DNA中不是同一人的是_________。

(4)此方法还可用于判断不同物种之间亲缘关系的远近,科学家分别提取了甲、乙、丙三种生物的DNA分子做鉴定,结果如下图

请问其中亲缘关系最近是_________,这种方法就是___________。该方法还可以用于_________(举两个例子)。

正确答案

(1)染色体

(2)热稳定DNA聚合

(3)C

(4)乙和丙    DNA分子杂交技术     检测目的基因是否导入受体细胞;从分子水平辅助确定生物的进化地位和亲缘关系(或快速灵敏检测饮用水中病毒的含量)等

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据近日《每日科学》网站报道,英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式,可按需要剔除病毒的关键毒性,并保持其复制能力,使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”。这将为癌症治疗的改进提供新的平台,也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:

(1)过程①代表的是_______,该过程需要_________酶催化,该过程的模板是_________。

(2)②过程可以通过_______技术大量扩增A基因,该技术的原理是___________。

(3)过程③构建A基因重组载体时,必须使用________和_________两种工具酶。

(4)过程④常用的方法是_______,A蛋白属于______性物质。过程⑥是________。

(5)过程⑦采用的生物技术是_______,该技术的原理是________,获得的X是_______。

(6)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行_______比较;或用图中的_____进行特异性结合检测。

正确答案

(1)逆转录   逆转录   RNA

(2)PCR   DNA复制

(3)限制酶   DNA连接酶

(4)显微注射法   抗原   B细胞的增殖和分化

(5)细胞融合   细胞膜具有一定的流动性   杂交瘤细胞

(6)A蛋白   核酸序列(或基因序列或RNA序列或核糖核苷酸序列)   抗A蛋白的单克隆抗体

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糖尿病是一种常见病,且发病率有逐年增加的趋势,以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物(如猪、牛)中获得,自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后,人们开始采用这种高新技术生产胰岛素,其操作基本过程如下图所示。

(1)图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”,即___________。

(2)图中的质粒存在于细菌细胞内,在基因工程中通常被用作____,从其分子结构可确定它是一种_____。

(3)根据碱基互补配对的规律,在______酶的作用下,把图中甲与乙拼接起来(即重组),若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA,则b段与c段分别是_______。

(4)细胞进行分裂后,其中被拼接起来的质粒也是由一个变成两个,两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为__________。目的基因通过活动(即表达)后,能使细菌产生治疗糖尿病的激素,这是因为基因具有控制________合成的功能,它的过程包括_________。

正确答案

(1)获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达

(2)运载体   环状DNA

(3)DNA连接    TTAAG、GAATT

(4)DNA扩增    蛋白质    转录和翻译

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(附加题)下图为培育转基因小鼠的部分过程示意图。请回答下列问题:

(1)若需在短时间内获得较多的外源基因,通常采用__________技术。

(2)图中的A细胞通常为________细胞,将外源基因导入该细胞常用的方法是________。

(3)小鼠出生后可用其尾巴进行DNA检测,通过_______方法,检测出携带外源基因的小鼠。外源基因是否合成相应的蛋白质,可从转基因小鼠中提取_____________,并用相应的抗体进行_________杂交,若有杂交带出现,则表明小鼠体内的外源基因_____________。

(4)在外源基因导入小鼠的A细胞时,外源基因可能随机地插入到该细胞的DNA中。这些细胞有的能发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析外源基因插入后导致有些A细胞死亡的最可能原因:_____________。

正确答案

(1)PCR

(2)受精卵     显微注射法

(3)DNA分子杂交     相应蛋白质     抗原—抗体     已表达

(4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

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