热门试卷

下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程图，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

(1)图中cDNA文库__________基因组文库(填“大于”、“等于”或“小于”)。

(2)①过程提取的DNA需要___________的切割，B过程是__________。

(3)为在短时间内获得大量目的基因，可用__________扩增的方法，其原理是__________。

(4)目的基因获取之后，需要进行___________，其组成必须有__________以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。

(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是__________，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是____________，可以用__________技术进行检测。

(6)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要通过基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的_________，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________。

(7)除植物基因工程硕果累累之外，人们在动物基因工程、基因工程药物和基因治疗等方面也取得了显著成果，请列举出至少两方面的应用：_____________。

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个核苷酸的DNA 单链，两条链通过18 个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如图。

在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

(1)Klenow酶是一种________ 酶，合成的双链DNA 有________ 个碱基对。

(2) 获得的双链DNA 经EcoR Ⅰ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和HⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________。

②．将该目的基因导入大肠杆菌常用的方法是______________________。

③．设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_________________________。

④．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______________。

⑤．在进行DNA测序时采用的方法是______________。经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是__________________。

(3)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是_______________。

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：

(1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是________，用_______将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，此表达载体除目的基因外，必须含有______、_______和标记基因。

(2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是_______________，该项方法要用____________作探针进行检测；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用_____方法检测。

(3)采用PCR技术可对目的基因进行体外扩增。该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种dNTP、模板DNA、引物和____________。其中引物有_________种，实质是_______，假如引物都用3H标记，从理论上计算循环4次，所得DNA分子中含有3H标记的占____。

(4)已知BarnHⅠ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BarnHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后_______序列明显增多。

(5)基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，__________却能生产自然界不存在的新的蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是__________。

(选做题)请回答有关图示问题：

(1)图甲中①一③所示的生物工程为_______。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对__________的修饰或合成，对现有的_______进行改造，或制造出新的一种蛋白质，以满足人类的生产生活的需求。

(2)图甲中序号④所示过程叫做___________，该过程遵循的碱基互补原则中不同于翻译过程的碱基对是___________。(请将模板碱基写在前)

(3)如下图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]_____；图中[3]_________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选、保留含性染色体____的精子。

(5)为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做_______处理，为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对供、受体动物做______处理。若甲图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前须进行体外培养到 _________期方能受精。

(6)用_______技术处理发育到______期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将__________均等分割。

降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研究一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

(1)Klenow酶是一种__________酶，合成的双链DNA有___________个碱基对。

(2)获得的双链DNA经EcoR(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamH(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

①．大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它____________。

②．设计EcoR和BamHⅠ双酶切的目的是____________。

③．要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有___________。

(3)经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是_____。

(4)上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是___________。