热门试卷

解：（1）由以上分可知①是逆转录．

（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．由过程③构建A基因重组载体，其组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因以及复制原点等．

（3）过程④要检测A基因是否进入受体细胞，常用的方法是DNA分子杂交法；要检测A基因在受体细胞内是否翻译出蛋白质，需用抗原抗体杂交法．

（4）与血清抗体相比，单克隆抗体突出的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备．

（5）单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术．

（6）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，一次是用用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；另一次是用专一抗体检测方法筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．筛选时所用的培养基是特定的选择性培养基．

（7）举例说出基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要来源、提供目的基因、提供运载体、基因文库中的受体细胞．

（3）故答案为：

（1）逆转录

（2）DNA连接酶　终止子、标记基因

（3）DNA分子杂交　抗原抗体杂交

（4）特异性强、灵敏度高

（5）动物细胞融合　动物细胞培养

（6）能产生所需抗体的杂交瘤细胞　选择性

（7）工具酶的主要来源、提供目的基因、提供运载体、基因文库中的受体细胞（选填二项，其他合理答案也可）

解：（1）限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，产生黏性末端或平末端．

（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶．

（3）逆转录过程使以mRNA为模板，通过碱基互补配对原则合成DNA的过程，若要在体外获得大量反转录产物，常采用PCR技术．

（4）基因工程中除质粒外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体．

（5）诱导植物细胞融合的方法有物理法和化学法，而诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法，生物法即用灭活的病毒处理；动物细胞融合突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能．

（6）动物胚胎发育过程中，卵裂期时期细胞数量不断增加但胚胎总体积不变． 桑椹胚时期的细胞全是全能性细胞．胚胎分割时，一般采用发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚．对于克隆人中国政府的态度是禁止生殖性克隆．

故答案为：

（1）黏性末端    平末端

（2）E．coli     T4

（3）mRNA     DNA    PCR

（4）噬菌体    动植物病毒

（5）灭活的病毒    突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能

（6）卵裂期     桑椹胚    桑椹胚或囊胚    生殖性克隆

解：（1）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选．

（2）两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同．因此为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同．

（3）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，此外还有基因枪法和花粉管通道法等．

（4）检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

（5）基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等．

故答案为：

（1）标记基因   RNA聚合酶

（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同

（3）农杆菌转化法   

（4）抗原-抗体杂交    

（5）噬菌体

解：（1）①表示体外受精过程，在该过程之前，需对人工采集的精子进行获能处理；②是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是动物细胞时，常采用显微注射法；④表示动物细胞培养过程，该过程需要无菌、无毒的条件，因此为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素．

（2）从人体细胞中获取目的基因（基因B）时需要用到限制性核酸内切酶（限制酶）；基因表达载体的组成部分：启动子、目的基因、标记基因、终止子，其中启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位．

（3）图示⑤为核移植过程，该过程中的受体细胞甲为减数第二次分裂中期的去核卵母细胞．

（4）基因表达的产物是蛋白质，因此要在分子水平上检测成功导入的B基因在大鼠中是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交方法，如果高血压相关基因已在大鼠体内成功表达，可用其建立高血压转基因动物模型．

故答案为：

（1）获能     显微注射法       抗生素

（2）限制性核酸内切酶（限制酶）      启动子

（3）减数第二次分裂中期（MII中期）     核移植

（4）抗原-抗体杂交

解：（1）将携带外源基因的DNA导入植物细胞之前，首先要构建基因表达载体，该步骤需要限制酶和DNA连接酶．

（2）目的基因导入植物细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，可以通过检测转化的植物有没有显示出目的基因控制的性状来确定．将转基因细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术．

（3）利用基因工程技术进行育种的优点：①能打破生物种属的界限；②在分子水平上定向改变生物的遗传特性．

（4）转基因产品的安全性：

安全：①多环节、严谨的安全性评价，可以保证转基因食品的安全；②转基因农作物要表现其新性状，必须有一定条件；③种植抗虫转基因农作物，可减少农药用量．

不安全：①可能会出现新的过敏源；②导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出新的病原体；③重组的微生物降解化合物过程中会产生中间产物，造成二次污染．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶

（2）检测转化的植物有没有显示出目的基因控制的性状植物组织培养

（3）①能打破生物种属的界限②在分子水平上定向改变生物的遗传特性

（4）安全：①多环节、严谨的安全性评价，可以保证转基因食品的安全；②转基因农作物要表现其新性状，必须有一定条件；③种植抗虫转基因农作物，可减少农药用量．

不安全：①可能会出现新的过敏源；②导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出新的病原体；③重组的微生物降解化合物过程中会产生中间产物，造成二次污染．

解：（1）基因工程中构建基因表达载体时，首先要用同种限制酶切割含有目的基因的DNA片段和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子；基因表达载体的组成除目的基因、启动子外，还必须有终止子、标记基因等．

（2）胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团），因此过程①所培养的细胞应取自囊胚的内细胞团，其具有发育的全能性．过程②的目的是筛选含目的基因的细胞并扩大培养．

（3）过程③所使用的是胚胎移植技术，进行该操作前需要对代孕母鼠进行同期发情处理，以保证胚胎移植入相同的生理环境．

故答案为：

（1）限制酶和DNA连接酶     终止子    标记基因

（2）内细胞团    发育全能     筛选含目的基因的细胞并扩大培养

（3）胚胎移植    同期发情

解：（1）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物．

（2）转化指的是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程．

（3）DNA分子杂交技术用于检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因．

（4）动物细胞培养的过程中的初次培养称为原代培养．10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，故目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的细胞．

（5）核移植技术常用显微操作去核法去核，即将采集的卵母细胞在体外培养到减数第二次分裂中期，用微型吸管可一并吸出细胞核和第一极体．

（6）精子细胞变形成为精子的过程中，其细胞核变为精子头的主要部分，高尔基体发育为头部的顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘．

（7）卵子的发生过程是不连续的，减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，其结果产生一个次级卵母细胞和第一极体进入输卵管，准备与精子受精．减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的，其结果是产生一个成熟的卵子和第二极体．判断卵子是否受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体．

故答案为：

（1）目的基因     

（2）转化     

（3）基因组DNA    

（4）原代培养    二倍体核型      

（5）显微操作去核法     细胞核和第一极体

（6）顶体

（7）排卵前后    卵细胞膜和透明带

解：（1）图中①质粒和目的基因连接形成的重组质粒；构建基因表达载体时，首先要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子，以形成相同的黏性末端，其次还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．

（2）油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA，则末端序列变为“--AGCGCGACCAGACUCUAA--”．在拟南芥中，UGA是终止密码子不编码氨基酸，而在油菜中，UGA变为AGA可编码一个氨基酸，同时CUC还可编码一个氨基酸，直到UAA终止密码子不编码氨基酸，所以Tn比t多编码2个氨基酸．所有生物共用一套遗传密码子，因此油菜Tn基因能在油菜突变体中表达．

（3）由图可知重组质粒含有抗生素Kan抗性基因，所以导入重组质粒的受体细胞能在含有抗生素Kan的培养基上生长，若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长，则说明重组质粒未导入．若③的种皮颜色为深褐色，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同．

（4）PCR技术利用的是DNA复制的原理，DNA复制具有半保留复制的特点．根据题意可知，若共用了引物62个，说明每一种引物用了31个，则2n-1=31，则n=5，即目的基因扩增了5代．

故答案为：

（1）重组质粒   限制酶和DNA连接酶酶    切后具有相同的粘性末端

（2）2  所有生物都共用一套密码子

（3）重组质粒未导入（目的基因末成功表达）    深褐色

（4）5

解：（1）获取目的基因时需要限制酶，构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶．

（2）图中第Ⅱ步为基因表达载体的构建过程，如果只考虑两两结合，则会形成3种重组DNA分子，即目的基因与质粒连接、目的基因与目的基因连接、质粒与质粒连接．

（3）第Ⅲ步是将目的基因导入ES细胞，该操作后还需筛选含小鼠棕褐毛基因的胚胎干细胞，然后再将含有小鼠棕褐毛基因的胚胎干细胞注射到囊胚中．

（4）ES细胞在功能上具有发育的全能性，其细胞核中含有一整套的遗传物质，因此改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠．

（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行细胞分裂和细胞分化．

（6）胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖但不发生分化，因此在体外培养胚胎干细胞不能获得动物器官．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶  基因表达载体的构建

（2）载体-目的基因  目的基因-目的基因

（3）载体与棕褐毛基因形成

（4）细胞核中含有一整套的遗传物质

（5）细胞分裂和细胞分化

（6）不能   胚胎干细胞在体外培养条件下可以增殖但不发生分化