- 植物体细胞杂交技术
- 共768题
白色链霉菌是一种放线菌，产生的链霉素可抑制细菌细胞内的转录过程，其细胞壁的主要成分是肽聚糖．高产营养缺陷型白色链霉菌（A种）不能在缺乏赖氨酸的培养基中正常生长，但能耐受高渗透压的环境；低产白色链霉菌（B种）可以在缺乏赖氨酸的培养因中正常生长繁殖，但不能耐受高渗透压的环境．有人将A、B两种白色链霉菌进行细胞杂交，获得了链霉素产量比野生菌株大5～6倍的新型菌种．请回答下列问题：
（1）利用白色链霉菌进行细胞融合时，首先应使用______去除菌体的细胞壁．将获取的______保存在等渗溶液中待用．
（2）实验室中，可以采用______ （至少写出两种）等多种方法诱导甲，乙两种白色链霉菌的原生质体融合．
（3）若原生质体均为两两融合，可将融合杂交后的细胞置于______，培养基中培养，就可筛选出符合人们要求的细胞，该细胞为______ （用字母表示）．
（4）在选育出合适的菌种之后，要将其接种到发酵罐内发酵．在发酵过程中，应及时检测菌数与产物浓度，同时要不断通入无菌空气．该过程中需要不断搅拌的原因，除了可提高溶O2外，还具有______等作用．
正确答案
解析
解：（1）白色链霉菌有细胞壁，进行细胞融合时，应先用酶解法去壁，获得原生质体，再诱导原生质体融合．
（2）诱导细胞融合的方法包括化学法（聚乙二醇）和物理法（电激、离心、振动）．
（3）高产营养缺陷型白色链霉菌（A种）不能在缺乏赖氨酸的培养基中正常生长，但能耐受高渗透压的环境；低产白色链霉菌（B种）可以在缺乏赖氨酸的培养因中正常生长繁殖，但不能耐受高渗透压的环境．所以用缺乏赖氨酸的高渗溶液能筛选出A种和B种的融合细胞，即A-B细胞．
（4）发酵过程中不断搅拌可提高溶氧量外，还能使菌种与营养物质（培养液）充分接触．
故答案：（1）溶菌酶（或酶解法） 原生质体 （2）聚乙二醇、电激（或离心、振动）
（3）缺乏赖氨酸的高渗 A-B （4）使菌种与营养物质（培养液）充分接触
在植物体细胞杂交实验中，如果要获得性状优良的作物新品种，不用必须考虑（ ）
正确答案
解析
解：A、植物体细胞杂交能够打破生殖隔离的限制，克服远缘杂交不亲和的障碍，故不需要考虑亲本的生殖隔离问题，A正确；
B、培育优良品种，需要选择具有某些优良性状的亲本，只有这样亲本的性状才有可能在后代身上表达出来，B错误；
C、植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，故需要考虑原生质体的融合技术，C错误；
D、形成融合细胞后，需利用植物组织培养技术将融合细胞培育成新植株，此过程涉及脱分化和再分化，D错误．
故选：A．
如图为细胞融合技术的一些过程．请据图回答下列问题：
（1）从A和B细胞到C细胞的过程中，必须用______处理．
（2）若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了______．这种酶可能是______酶，由此生成的A和B细胞称为______．人工诱导化学方法常用______作为诱导剂．
（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为______细胞，在特定的选择性培养基上进行______，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有D细胞才能生长．D细胞的特点是：既______，又______．
（4）在动物细胞培养过程中，先后两次用胰蛋白酶，配制成细胞悬浮液，其作用分别是______；______．
（5）动物细胞工程常用的技术手段有多种，其中克隆动物就是用______方法得到的．
（6）若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光．到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，原因是______．
正确答案
解析
解：（1）动物细胞融合通过聚乙二醇作为诱导剂进行诱导融合，形成杂种细胞，体现了细胞膜的结构特点具有一定的流动性．
（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，可以用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁得到原生质体，再通过化学方法如聚乙二醇诱导原生质体融合，融合完成的标志是杂合的原生质体形成了新的细胞壁．
（3）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的两两融合细胞C有3种：AA型、BB型、AB型，用来培养的D细胞应该是AB型的杂交瘤细胞，从中选择出它的方法是用选择性培养基进行筛选，去除效应B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞，只保留效应B细胞和骨髓瘤细胞二者融合细胞，D细胞的特点是：既 能无限繁殖，又 能产生特异性抗体．
（4）在动物细胞培养过程中，先后两次用胰蛋白酶，配制成细胞悬浮液，其作用分别是使组织分散成单个细胞；使细胞从瓶壁上脱离下来．
（5）克隆动物采用用核移植方法获得．
（6）若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光．到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，原因是细胞膜具有一定的流动性．
故答案为：
（1）聚乙二醇
（2）细胞壁 纤维素 原生质体 聚乙二醇
（3）杂交瘤 筛选 能无限繁殖 能产生特异性抗体
（4）使组织分散成单个细胞 使细胞从瓶壁上脱离下来
（5）核移植
（6）细胞膜具有一定的流动性
（1）若运用传统有性杂交（即用番茄、马铃薯杂交）能否得到杂种植株？为什么？______．
（2）在上述过程中，①过程常用的方法是______．已知番茄细胞中含4X条染色体，马铃薯细胞中含有2Y条染色体，则杂种植株叶肉中染色体数为______，得到的“番茄-马铃薯”属于______倍体植株．与过程③密切相关的具膜结构的细胞器为______，过程④相当于______，⑤过程涉及的分裂方式为______．
（3）这项技术的意义是______．
（4）随“神六”太空旅行的种苗中，最受关注的是柴油树试管苗．柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产．若利用此技术，将柴油树细胞培养进行到______过程即可（填字母编号）．
（5）若培育抗虫棉，将抗虫基因通过适当的途径导入棉花受精卵，然后进行组织培养，该过程相当于______（填编号）．
（6）人工种子又称合成种子或种子类似物，它是20世纪生物技术在农业上的应用之一．由发育到______过程（填字母编号）的结构包裹上______可制备人工种子．
正确答案
解析
解：（1）不同种的植物存在生殖隔离，不能通过杂交育种获得杂种植株．
（2）①过程表示去除细胞壁，根据细胞壁的成分和酶的专一性，一般用纤维素酶和果胶酶去壁．已知番茄细胞中含4X条染色体，马铃薯细胞中含有2Y条染色体，则杂种植株叶肉中染色体数为4X+2Y，得到的“番茄-马铃薯”属于异源六倍体．③表示再生细胞壁，与植物细胞壁形成有关的细胞器是高尔基体．过程，④表示脱分化，⑤表示再分化，再分化过程中细胞进行有丝分裂．
（3）植物体细胞杂交最大的优点是克服远源杂交不亲和的障碍．
（4）已知柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，则利用此技术，将柴油树细胞培养进行到愈伤组织e即可．
（5）利用基因工程若培育抗虫棉，将抗虫基因通过适当的途径导入棉花受精卵，然后进行组织培养，进行图中的④脱分化和⑤再分化．
（6）人工种子是由发育到f的胚状体包裹上人工种皮制备而成的．
故答案为：
（1）不能，不同种的植物存在生殖隔离
（2）酶解法（或用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁） 4X+2Y 六 高尔基体 脱分化 有丝分裂
（3）克服远源杂交不亲和的障碍
（4）e
（5）④⑤
（6）f 人工种皮
A、B两种染色体数目相同的二倍体植物，A种植物抗甲病但不抗乙病，B种植物抗乙病但不抗甲病．某研究小组通过植物体细胞杂交等植物细胞工程相关技术，培育能同时抗甲、乙两种病的杂种植株．请回答下列相关问题：
（1）植物体细胞杂交的第一个环节是用______酶处理A、B两种植物细胞，获得有活力的______；
若该过程中使用的酶浓度过低，则可能会导致细胞______，破坏______．在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是______．
（2）植物体细胞杂交的第二个关键环节是______，该过程中常用化学试剂______（写汉字）作为诱导剂进行人工诱导，在动物细胞工程中还可以用______进行诱导．
（3）通过杂交获得的A、B两种植物的杂种细胞，必须通过______技术才能培育成完整的再生植株．
正确答案
解析
解：（1）植物体细胞杂交的第一个环节是用纤维素酶和果胶酶处理A、B两种植物细胞，获得有活力的原生质体；
若该过程中使用的酶浓度过低，则酶解时间长，可能会导致细胞吸水胀破，破坏原生质体．在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的是胰蛋白酶或胶原蛋白酶．
（2）植物体细胞杂交的第二个关键环节是原生质体间的促融，该过程中常用化学试剂聚乙二醇作为诱导剂进行人工诱导，在动物细胞工程中还可以用灭活的病毒进行诱导．
（3）通过杂交获得的A、B两种植物的杂种细胞，必须通过植物组织培养技术才能培育成完整的再生植株．
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶 原生质体 吸水胀破 原生质体 胰蛋白酶
（2）原生质体间的促融 聚乙二醇 灭活的病毒
（3）植物组织培养
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