- 植物体细胞杂交技术
- 共768题
科研人员为探究诱导酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体的适宜条件，进行了如下实验．
①提取蚕豆叶绿体：过滤蚕豆新鲜叶片研磨液，对滤液进行【A】后获得叶绿体，加入2mL 0.35mol•L-1氯化钠溶液，制成悬浮液．
②制备酵母原生质体：在适宜条件下用2%的蜗牛酶处理酵母菌，获得酵母原生质体．
③诱导酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体：将酵母原生质体与蚕豆叶绿体混和后，在不同温度和pH下用【B】（化学试剂）处理60min后洗涤．用显微镜观察，结果如下表：
请回答：
（1）补全实验步骤：A______；B______．
（2）步骤①中加入0.35mol•L-1氯化钠的作用是______．
（3）步骤②中蜗牛酶的作用是除去酵母细胞的______．
（4）实验结果表明酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体较适宜条件是______．在适宜温度下，酵母原生质体容易摄入叶绿体与细胞膜的______增强有关．
正确答案
解析
解：（1）新鲜叶片研磨液，对滤液进行离心后获得叶绿体；将酵母原生质体与蚕豆叶绿体混和后，聚乙二醇（PEG）处理，原生质体与叶绿体融合．
（2）步骤①蚕豆叶绿体加入0.35mol•L-1氯化钠，作用是维持叶绿体的正常形态．
（3）步骤②蜗牛酶处理酵母菌，获得酵母原生质体，则蜗牛酶的作用是除去酵母细胞的细胞壁．
（4）表格分析，酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体较适宜条件是温度为37℃，pH为7.6；酵母原生质体容易摄入叶绿体体现膜的流动性．
故答案为：
（1）（差速）离心 聚乙二醇（PEG）
（2）维持叶绿体的正常形态（防止叶绿体吸水涨破）
（3）细胞壁
（4）温度为37℃，pH为7.6 流动性
由基因型为Aa植株的花粉和基因型为Bb植株的花粉，除去细胞壁后，进行原生质体融合，可以得到多少种基因型不同的细胞（仅考虑两个细胞的融合）（ ）
正确答案
解析
解：Aa植株产生的花粉基因型为：A和a，Bb植株产生的花粉基因型为：B和b，两两融合，可以得到10种，即AA、aa、Aa、BB、bb、Bb、AB、aB、Ab、ab．
故选：C．
制备转基因克隆动物多是以易于核移植的胚胎成纤维细胞（EF）作为核供体．转入人生长激素基因的鼠胚胎成纤维细胞（tEF）不能分泌人生长激素，推测其不具备相应的细胞质条件而影响了基因表达，从而影响了对转基因细胞的筛选．为快速筛选出这类细胞，研究者设计了如图所示的大致流程，据此回答问题：
（1）杂合细胞可以分泌人生长激素，说明该细胞具备分泌生长激素的______条件．
（2）这一分泌现象说明指导人生长激素合成的基因来自于______细胞，分泌生长激素的条件由______细胞提供．
（3）培养和诱导融合等操作均需在严格的______环境条件下操作，且配制的合成培养基通常需要加入______等一些天然成分．
（4）生长激素的化学本质是______，所以可以采用______方法检测杂种细胞的分泌量．
正确答案
解析
解：（1）转入人生长激素基因的鼠胚胎成纤维细胞（tEF）不能分泌人生长激素，推测其不具备相应的细胞质条件而影响了基因表达，而杂合细胞可以分泌人生长激素，说明该细胞具备分泌生长激素的细胞质条件．
（2）转入人生长激素基因的鼠胚胎成纤维细胞（tEF）不能分泌人生长激素，而杂合细胞可以分泌人生长激素，这说明指导人生长激素合成的基因来自于转基因的胚胎成纤维细胞，分泌生长激素的条件由乳腺癌细胞提供．
（3）培养和诱导融合等操作均需在严格的无菌、无毒环境条件下操作，且配制的合成培养基通常需要加入血清（血浆）等一些天然成分．
（4）生长激素的化学本质是蛋白质，所以可以采用抗原抗体杂交方法检测杂种细胞的分泌量．
故答案：（1）细胞质
（2）转基因的胚胎成纤维细胞或Tef（只答EF不得分） 乳腺癌
（3）无菌、无毒 血清（血浆）
（4）蛋白质 抗原抗体杂交
如图可表示细胞融合技术的一些过程，请据图回答：
（1）若A、B细胞为动物细胞，从A和B细胞到C细胞的过程中，常用______作为诱导剂来诱导融合．A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有______特性．
（2）若A、B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了______．这种酶可能是______酶．A、B到C细胞的过程中，常用的物理方法是______；融合完成的标志是______；形成的D细胞还要应用______技术把D培养成植株．
正确答案
解析
解：（1）动物细胞融合通过聚乙二醇作为诱导剂进行诱导融合，形成杂种细胞，体现了细胞膜的结构特点具有一定的流动性．
（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，可以用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁得到原生质体，再通过物理方法如离心、振动和电刺激诱导原生质体融合，融合完成的标志是杂合的原生质体形成了新的细胞壁；将杂种细胞培养成杂种植株还需采用植物组织培养技术．
故答案为：
（1）PEG （一定的）流动性
（2）细胞壁 纤维素酶和果胶酶 离心、震动、电刺激 形成了新的细胞壁 植物组织培养
动物细胞融合和植物原生质体融合比较，特殊性表现在（ ）
正确答案
解析
解：A、动物细胞融合和植物原生质体融合的原因都是细胞膜具有流动性，A错误；
B、动物细胞融合和植物原生质体融合的优点都是克服远缘杂交不亲和，B错误；
C、动物细胞融合的方法有：物理法、化学法和生物法，植物原生质体融合的方法有物理法和化学法，因此生物法是动物细胞融合的特有的方法，一般使用灭活的病毒，C正确；
D、动物细胞融合和植物原生质体融合的过程都是先膜融合，再细胞质融合，最后细胞核融合，D错误．
故选：C．
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