热门试卷

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图．据图回答下列问题：

（1）若已获取PG的mRNA，可通过______获取PG基因．

（2）构建基因表达载体时，用限制酶切割DNA后可能产生黏性末端，也可能产生______，后者需用______（E•coli DNA连接酶、T4DNA连接酶）将双链DNA片段“缝合”起来．“缝合”的过程，就是恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的______的过程．

（3）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选．

（4）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用______技术；其中，愈伤组织经______形成完整植株．

（5）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生______现象来鉴别细胞壁是否再生．

如图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：

（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，那么在①过程中，应用限制酶______切割质粒，用限制酶______切割抗虫基因．①过程在______（体内/体外）进行．

（2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有______的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入．

（3）重组质粒导入大肠杆菌的目的是______．

（4）为使③此过程顺利进行，一般需将土壤农杆菌用______　处理，作用是_______．

（5）⑤过程所用技术称为______，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有______．

（6）此目的基因在根细胞内成功表达的标志是______．

黄曲霉毒素AFB1存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并累积，引起癌变；某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性．

（1）AFB1属于______类致癌因子．

（2）黄曲霉毒素诱发肝癌发生的原理是基因突变．研究发现，黄曲霉毒素会导致p53基因（阻止细胞不正常增值的基因）失去正常功能，所以p53基因属于______基因；肝癌细胞容易分散和转移的原因是细胞表面的______等物质减少．

（3）如图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图，检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用______方法．

（4）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果．实验设计及测定结果见下表，据表回答：

①本实验自变量为______．

②本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是______．

③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg，则每千克饲料应添加______克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约了成本．

（5）某医院为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养．培养之前，肿瘤组织必须先用______（酶）等处理成单个细胞．

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长．质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞．请据图作答：

（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶______分别对______，______  进行切割，切割后产生的DNA片段分别为______种．

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有______作为标记基因．

（3）研究人员通常采用______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内．通常采用______技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质．

（4）利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株．图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的______，______过程．