- 细胞工程
- 共5750题
开学初，小源到建设银行营业网点兑换了此前在网上预约的中国高铁纪念币。这枚纪念币由中国人民银行发行，面额10元，每人限兑20枚，且需要提前预约。小源打算与班上同学分享自己的喜悦。他可以向大家这样介绍
①纪念币面额和实际购买力都是由中国人民银行规定的
②纪念币可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能
③纪念币发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间
④纪念币不能与同面额人民币等值流通，必须在规定时间地点使用
正确答案
解析
①错误，国家无权规定纪念币的实际购买力；④错误，纪念币与同面额人民币等值流通，在任何时间地点都可使用；由中国人民银行发行的纪念币属于法定货币，可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能，因其发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间，故②③正确。
知识点
下列方案中不能制备出抗H1N1流感病毒单克隆抗体的是（ ）
正确答案
解析
解：A、H1N1流感病毒的遗传物质是RNA，该病毒抗原的基因无法导入骨髓瘤细胞中，因为RNA片段不能和DNA连接，故A正确；
B、将抗H1N1流感病毒抗体的基因导入骨髓瘤细胞，形成的重组细胞能无限繁殖，又能产生特异性抗体，故B错误；
C、将产生抗H1N1流感病毒抗体的效应B细胞和骨髓瘤细胞融合，筛选出杂交瘤细胞，能大量繁殖，也能产生特异性抗原，故C错误；
D、将骨髓瘤细胞中的癌基因导入能产生抗H1N1流感病毒抗体的效应B细胞中，使得效应B细胞既能产生抗体，又能无限繁殖，故D错误．
故选：A．
回答有关生物技术的问题．
I：抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究．下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．
（1）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次．免疫学称细胞A为______．
（2）①至②过程中获取的抗体称为______，其中①是______．
Ⅱ：如图中，结构甲的建构可用下图1和2表示．图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为下表所示．
（3）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为______bp．
（4）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有______种不同长度的DNA片段．
（5）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______．在导入重组质粒后，为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，一般需要添加______的固体培养基进行培养．
（6）目的基因表达过程中，RNA聚合酶能否特异性识别DNA中特定的核苷酸序列______（填能或不能）
正确答案
解析
解：Ⅰ、（1）向健康人体注射特定抗原，提取出A浆细胞（效应B淋巴细胞），在人体参与体液免疫．
（2）过程①至②抗体的获取称为单克隆抗体，其中①是细胞融合过程，Y细胞称为杂交瘤细胞．
Ⅱ、（3）SmaⅠ识别的序列为GGGCCC，切割会产生平末端；图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置，从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度为537、790、661．
（4）在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段．
（5）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamHI来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌．因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，可能导致基因D不能正确表达．
（6）目的基因表达过程中，RNA聚合酶能特异性识别DNA中特定的核苷酸序列中的启动子，转录形成信使ENA．
故答案为：
Ⅰ（1）浆细胞（效应B淋巴细胞）
（2）单克隆抗体 细胞融合
Ⅱ（3）537、790、661（写全给分）
（4）4
（5）BamHⅠ抗生素B
（6）能
正确答案
解析
解：A、②是基因表达载体的构建过程，需要限制酶和DNA连接酶，A错误；
B、③为动物细胞融合过程，可获得杂交瘤细胞，B正确；
C、A蛋白是病毒的主要抗原，基因工程得到A蛋白可制备疫苗，C正确；
D、对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较，通过核酸分子杂交进行确定，D正确．
故选：A．
人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答问题．
（1）制备单克隆抗体过程中要用到______和______技术．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于______，使小鼠产生分泌相应______的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的______免疫．
（3）在细胞内DNA的合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径．另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径．
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的______成分具有筛选杂交瘤细胞的作用，培养时温度应为______℃．
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是______．
（4）此过程生产的单克隆抗体可以与______特异性结合，从而诊断早孕．
正确答案
解析
解：（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞，动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生免疫产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫．
（3）①利用DNA合成途径不同的特点：氨基嘌呤可以阻断合成DNA；次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下可合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径．可知在配制的HAT培养基中添加的氨基酸成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．培养时温度应为36.5±0.5℃．
②杂交瘤细胞具有能无限增殖并分泌特异性抗体的特点．
（4）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白．单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕．
故答案为：
（1）动物细胞培养 动物细胞融合
（2）抗原 抗体 体液
（3）①氨基酸 36.5±0.5 ②能无限增殖并分泌特异性抗体
（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）
从免疫后的小鼠体内的哪一种内脏器官中易获得足量的效应B细胞以用于单克隆抗体制备（ ）
正确答案
解析
解：从免疫后的小鼠体内的脾脏中易获得足量的效应B细胞以用于单克隆抗体制备．
故选：B．
回答有关生物技术的问题
Ⅰ．抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究．下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图3．
（1）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次．免疫学称细胞A为______，该细胞在人体主要介导______免疫．
（2）过程①至②抗体的获取称为______，其中①是______过程，Y细胞称为______．
Ⅱ．图中，结构甲的建构可用下图1和2表示．图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为下表所示．
（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为______．
（2）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有______种不同长度的DNA片段．
（3）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______．在导入重组质粒后，为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的固体培养基进行培养．
正确答案
解析
解：Ⅰ、（1）向健康人体注射特定抗原，提取出A浆细胞（效应B淋巴细胞），在人体参与体液免疫．
（2）过程①至②抗体的获取称为单克隆抗体，其中①是细胞融合过程，Y细胞称为杂交瘤细胞．
Ⅱ、（1）SmaⅠ识别的序列为GGGCCC，切割会产生平末端；图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置，从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分布为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度为537、790、661．
（2）在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段．
（3）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌．因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因D不能正确表达．
故答案为：
Ⅰ、（1）、浆细胞（效应B淋巴细胞） 体液
（2）、单克隆抗体 细胞融合 杂交瘤细胞
Ⅱ、（1）、537、790、661（写全给分）
（2）、4
（3）、BamHⅠ
下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，A正确；
B、去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理，前者需要纤维素酶和果胶酶处理，后者需要胰蛋白酶处理，B正确；
C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可获得杂交瘤细胞，用于制备单克隆抗体，C正确；
D、两种二倍体植物体细胞杂交子代细胞中含有四个染色体组，D错误．
故选：D．
人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到______和______技术．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG 相当于______，使小鼠产生分泌相应______的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的______免疫．
（3）在B 淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤所阻断．而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径．
①利用DNA 合成途径不同的特点配制的HAT 培养基含有多种成分，其中添加的______成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是______．
（4）此过程生产的单克隆抗体可以与______特异性结合，从而诊断早孕．
（5）哺乳动物在怀孕初期由于______，为胚胎的收集提供了可能．收集到胚胎后还要对胚胎进行______，如果不直接向受体移植，还要放入______中保存．
正确答案
解析
解：（1）制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞，动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生免疫产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫．
（3）①利用DNA合成途径不同的特点：氨基嘌呤可以阻断合成DNA；次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下可合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径．可知在配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②杂交瘤细胞具有能无限增殖并分泌特异性抗体的特点．
（4）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白．单克隆抗体可以与它特异性结合，从而诊断早孕．
（5）哺乳动物在怀孕初期由于早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能．收集到胚胎后还要对胚胎进行质量检查，如果不直接向受体移植，还要放入-196℃液氮中保存．
故答案为：
（1）动物细胞培养 动物细胞融合
（2）抗原 抗体 体液
（3）①氨基嘌呤 ②能无限增殖并分泌特异性抗体
（4）人绒毛膜促性腺激素（或“HCG”）
（5）早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态 质量检查-196℃液氮
从免疫后的小鼠体内的哪一种内脏器官中易获得足量的效应B细胞以用于单克隆抗体制备（ ）
正确答案
解析
解：从免疫后的小鼠体内的脾脏中易获得足量的效应B细胞以用于单克隆抗体制备．
故选：B．
开学初，小源到建设银行营业网点兑换了此前在网上预约的中国高铁纪念币。这枚纪念币由中国人民银行发行，面额10元，每人限兑20枚，且需要提前预约。小源打算与班上同学分享自己的喜悦。他可以向大家这样介绍
①纪念币面额和实际购买力都是由中国人民银行规定的
②纪念币可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能
③纪念币发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间
④纪念币不能与同面额人民币等值流通，必须在规定时间地点使用
正确答案
解析
①错误，国家无权规定纪念币的实际购买力；④错误，纪念币与同面额人民币等值流通，在任何时间地点都可使用；由中国人民银行发行的纪念币属于法定货币，可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能，因其发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间，故②③正确。
知识点
下列技术或方法与原理相符的是（ ）
正确答案
解析
解：A、人参细胞培养和杂交瘤细胞的培养的原理是细胞增殖，A错误；
B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，制备单克隆抗体的原理是细胞增殖，B错误；
C、纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁的原理是酶的专一性，C错误；
D、原生质体融合和动物细胞融合的原理细胞膜的流动性，D正确．
故选：D．
淋巴因子中的干扰素是治疗病毒的特效药．通常只能从人体内获得，且获得的数量非常少．为了在体外获得大量的干扰素，有人把某种淋巴细胞在体外培养，繁殖几代后，细胞分裂就会停止．下列哪种实验设计，既能使某种淋巴细胞在体外不断增殖，又能够获得大量干扰素（ ）
正确答案
解析
解：在制备单克隆抗体的过程中，是结合了效应B细胞能够产生抗体和骨髓瘤细胞能够无限增殖的优点，获得了杂交瘤细胞；
而淋巴因子是由效应T细胞产生的，而效应T细胞也不能增殖，因此利用单克隆抗体制备的原理和技术可以将鼠的效应T细胞与鼠的骨髓瘤细胞进行细胞融合，从而获得大量的干扰素．
故选：D．
下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、制备单克隆抗体过程中需要动物细胞融合和动物细胞培养技术，A错误；
B、杂交瘤细胞是把骨髓瘤细胞和浆细胞融合成的，不是浆细胞癌变的结果，B错误；
C、经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞还要经过第二次筛选才能用于单克隆抗体的生产，C错误；
D、单克隆抗体最广泛的用途是用作诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速等优点，D正确．
故选：D．
科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物的细胞进行分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答以下问题．
（1）利用杂交瘤技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱融剂是______，诱融后需进行两次筛选，第一次筛选的目的是______，第二次筛选的目的是______．
（2）有人提出，将无限增殖调控基因（prG）直接导入B细胞亦能获得单克隆抗体，其思路如图甲所示．
①制备重组质粒．
②将重组质粒导入细胞“Ⅱ”，Ⅱ所指的细胞是______，然后进行“检测”，其目的是______．Ⅲ所指的细胞具有的特点是______．
（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来制备单克隆抗体，其思路如图乙所示．
①构建重组细胞时，只选用了细胞甲的细胞质是因为______．
②选取______的细胞核进行移植．
③重组细胞进行体外细胞培养时应为细胞增殖提供______等营养物质，通过细胞培养获得的细胞群称为______．
正确答案
解析
解：（1）利用杂交瘤技术制备单克隆抗体，诱融剂是PEG促进动物细胞融合，诱融后需进行两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出既能无限增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞．
（2）分析图甲，将无限增殖调控基因（prG）直接导入B细胞，能获得单克隆抗体．
①制备的重组质粒中含有的目的基因无限增殖调控基因．
②将重组质粒导入细胞Ⅱ，即效应B细胞，接着采用抗原-抗体杂交的方法检测目的基因在受体细胞中能否表达．重组细胞Ⅲ是能无限增殖，又能产生特定抗体的效应B细胞．
（3）分析图乙，用细胞核移植技术构建重组细胞来制备单克隆抗体．
①构建重组细胞时，用无限增殖细胞的细胞质，因为细胞质中有无限增殖调控基因（prG）．
②选取效应B细胞的细胞核进行移植．
③重组细胞进行体外细胞培养，提供水、无机盐、碳源、氮源、动物血清等营养物质，杂种细胞能无限繁殖，获得的细胞群称为细胞系．
故答案为：
（1）PEG（聚乙二醇、灭活的病毒） 筛选出杂交瘤细胞 筛选出既能无限增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞
（2）效应B细胞 检测目的基因在受体细胞中能否表达（检测受体细胞是否显示出目的基因所控制的性状） 即能无限增殖又能产生特定抗体的效应B细胞
（3）①细胞甲的细胞质中有无限增殖调控基因（prG）
②效应B细胞 水、无机盐、碳源、氮源、动物血清
③细胞系
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