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简答题

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答下列问题:

(1)制备单克隆抗体过程中要用到____________和____________技术。

(2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于_________,使小鼠产生能分泌相应_______的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的_________免疫。

(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①.利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的___________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②.最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_________________。

(4)此过程生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合,从而诊断早孕。

正确答案

(1)动物细胞培养   动物细胞融合

(2)抗原   抗体   体液

(3)①.氨基喋呤  ②.能无限增殖并分泌特异性抗体

(4)人绒毛膜促性腺激素(或“HCG”)

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请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题。

(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自__________体内的浆细胞,促进d过程的常用诱导剂是__________________。

(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成__________种类型的C细胞,因此需用选择培养基筛选出______________(填特点)的D细胞用于培养。上述过程用到的动物细胞工程技术手段有__________。

(3)目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。我们已经知道,决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是________。据此分析制备禽流感疫苗的主要思路:____________。

正确答案

(1)感染病毒的动物或人      聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒

(2)3      既能无限增殖又能产生特异性抗体      动物细胞融合、动物细胞培养

(3)病毒的RNA        将禽流感病毒灭活或减毒后注入鸟类体内,从这些动物血清中提取出相应的抗体(或利用基因工程技术生产禽流感病毒的衣壳蛋白,合理即可)

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1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题:

(1)病原体注入小鼠体内后,要经过______细胞的处理后形成抗原-MHC复合体,才能被免疫细胞识别。 

(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以______作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂交瘤细胞具有________的特点。 

(3)单克隆抗体的特点是__________________。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法____________________。  

正确答案

(1)吞噬(或巨噬)

(2)灭活的仙台病毒或聚乙二醇   既能产生特异抗体,又能无限增殖

(3)特异性强,纯度高(专一性强、灵敏度高)  体外培养法和动物体内培养法

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下图分别是单克隆抗体的制备过程和克隆羊的培育过程示意图,请据图回答下列问题:

(1)图甲和图乙所示的过程中,都必须用到的动物细胞工程技术手段是____________。

(2)图甲中②过程常在_____________诱导下完成。

(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞,主要是利用其__________________。

(4)若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?___________,原因是____________。

(5)在目前现有技术条件下,还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体,而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体,你认为原因最可能是_______。

A.卵细胞大,便于操作

B.卵细胞含有的营养物质多

C.卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达

D.重组细胞才具有全能性

正确答案

(1)动物细胞培养

(2)聚乙二醇(或灭活的病毒、离心、振动、电刺激也可)

(3)特异性

(4)不完全像      卵细胞细胞质中的遗传物质也能控制某些性状

(5)C

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某医院病理室为确诊某一患者的肿瘤是良性还是恶性,切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答有关问题:

(1)从新陈代谢的角度看,癌细胞能迅速生长增殖是由于____________。其细胞内合成蛋白质所需赖氨酸的主要来源有_____________。

(2)某科研单位研制了一种新药X,为了验证该药物对肿瘤有较好的疗效,他们设计了一个实验研究方案,请你帮助完成该方案的设计。

实验步骤:

第1步:将肿瘤细胞的悬浮液分成等细胞数的A、B两组;

第2步:如果A组中加入的是3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸,则在B组中应该加入________;

第3步:________;

第4步:将A、B两组的培养液去掉,分别检测两组细胞的放射性强度。

预期结果并作出解释:________。

(3)如果确定该肿瘤为恶性,其分子水平上的原因是,细胞内的_______被激活,细胞发生了转化。与良性细胞相比较,恶性细胞表面的____等物质减少,导致其容易在人体内分散和转移,这就是癌细胞的浸润性和扩散性。

(4)如果确定该肿瘤为良性,将其处理成为单个细胞后,经过______的过程,可得到大量的肿瘤细胞,为制备单克隆抗体提供细胞材料。

(5)目前,人体杂交瘤细胞的获得和培养研究已经取得了明显的进展,有关研究人员把具有抗原免疫的人脾细胞与骨髓瘤细胞成功地进行了融合,开创了用人体细胞制备单克隆抗体的新时代。试问:

①.在这样的细胞融合中,实验装置中可有哪些细胞的存在?_____。

②.在具有抗原免疫的人脾细胞与骨髓瘤细胞发生融合时,首先是细胞膜的融合,然后还有细胞核的融合。经过细胞融合获得的杂交瘤细胞,由于继承了两种细胞的遗传基因,因此可表现出的性状是_____。

③.研究人员之所以继续进行人体杂交瘤细胞的研究,是因为已经研制成功的鼠源性或兔源性单克隆抗体与常规抗体相比,虽然特异性强、灵敏度高,但用于人体的免疫治疗,还存在着一些需要解决的问题,这主要是指______。

正确答案

(1)同化作用大于异化作用       从食物中获得和自身组织蛋白质的分解

(2)第2步:等量的3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸和药物X

第3步;将A、B两组置于相同的培养条件下培养一段时间

预期结果并作出解释:如果出现的实验现象是A组的放射性强度大于B组,则说明药物X的疗效好

(3)原癌基因      糖蛋白

(4)动物细胞培养

(5)①.人脾细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞,人脾细胞与人脾细胞的融合细胞,骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞,未融合的人脾细胞和骨髓瘤细胞

②.既具有抗原免疫的人脾细胞分泌特异性抗体的特点,又具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖的能力 

③.鼠源性或兔源性单克隆抗体的免疫力不如人体内自身产生的同种抗体强

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有性生殖的生物产生后代需进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:

(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是_____________。

(2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是_________,这种育种方法的优点是___________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞,则d细胞特点是____________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有_________的特点。生产上一般不能通过直接培养浆细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是______________。

(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是_____________。

正确答案

(1)大于800lx光照

(2)植物细胞的全能性    克服了远源杂交不亲和的障碍

(3)既能无限繁殖,又能产生特定的抗体    特异性强、灵敏度高、化学性质单一   效应B细胞高度分化,不能增殖

(4)

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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图: 

(1)过程①代表的过程是_________。

(2)过程③构建A基因重组载体时,必须使用_________、_________两种工具酶。

(3)过程⑥发生的生理过程是___________。

(4)过程⑦的实验技术名称是_________,在将X进行扩大培养之前,至少需要经过两次筛选,方法分别是_________、_________ 。

(5)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的__________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行_________比较;或用图中的_________进行特异性结合检测。

正确答案

(1)逆转录

(2)限制性核酸内切酶、DNA 连接酶

(3)增殖、分化

(4)细胞融合技术;用选择培养基筛选;用专一抗体检测

(5)A蛋白;核酸序列(或基因序列或RNA序列或核糖核苷酸序列);抗A蛋白的单克隆抗体

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科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答:

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与________融合,形成__________细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于______________,可大量制备。

(2)与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还可用____________诱导融合。

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是___________________。

(4)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,这个过程中用到的工具酶有_______、_______,改造抗体属于______工程的范畴。

正确答案

(1)骨髓瘤细胞;杂交瘤;特异性强、灵敏度高

(2)灭活的病毒

(3)浆细胞不能无限增殖

(4)限制酶;DNA连接酶;蛋白质

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下图表示用生物工程制备抗体的过程。请回答下列问题。

(1)图中所示制备抗体过程的技术基础是_________________。

(2)图中细胞1是小鼠体内注入抗原后而获得的__________细胞,这种细胞具有产生单一的特异性抗体的特点,但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2是__________细胞,这种细胞在体外培养时能快速大量增殖,但不会产生抗体。

(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,用___________诱导,使两种细胞发生融合,形成图中的细胞3,这种细胞称为___________。

(4)过程①的主要目的是筛选出___________________的杂交瘤细胞。通过过程②或③的培养方法能产生大量______________抗体,与一般的抗血清抗体相比,该抗体的特点是____________。

正确答案

(1)动物细胞培养、杂交瘤技术(或动物细胞杂交、动物细胞融合)

(2)B淋巴      骨髓瘤

(3)聚乙二醇(或仙台病毒、灭活病毒、电击等)      杂交瘤细胞

(4)既能迅速大量敏殖,又能产生专一抗体      单克隆      特异性强(或专一性强)

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科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答:

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取________,在诱导剂的作用下与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞,此细胞的特点是________、__________。与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________诱导融合。

(2)细胞融合是随机的过程,所以需要用__________培养基筛选,目的是选择出杂交瘤细胞。对筛选出的细胞还需进行__________培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量,能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

(3)若在体外大规模培养该细胞,首先应保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中,为了防止细菌的污染,所用培养液应该添加一定量的______,此外还要________,防止细胞代谢产物对细胞有影响。在培养液中提供5%CO2目的是___________。

(4)这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点是__________,可大量制备。临床试验上借助单克隆抗体的_________作用,将药物带到癌细胞所在位置。

(5)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,改造抗体属于________工程的范畴。

正确答案

(1)B淋巴细胞;在体外大量增殖;分泌特异性抗体;灭活病毒

(2)选择培养基;克隆化培养

(3)维持培养液的pH值;抗生素;定期更换培养液

(4)特异性强、灵敏度高;导向作用

(5)蛋白质

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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:

(1)过程②代表的是基因工程操作步骤中的____________。基因工程的核心步骤是______(填序号)。

(2)过程⑦采用的实验技术是__________,获得的X是_________。

(3)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_______所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以从疑似患者体内分离出病毒,与已知病毒进行______比较;或用图中的______进行特异性结合检测。

正确答案

(1)目的基因的获取    ③

(2)动物细胞融合    杂交瘤细胞

(3)A蛋白    核酸序列(或RNA序列或核糖核苷酸序列)     抗A蛋白的单克隆抗体

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下图是某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答:

(1)该方案并不能达到预期效果,请你给予补充纠正____________________。

(2)图中②为___________过程,目的是使得到的细胞具有____________特性。

(3)图中③表示用特定的选择性培养基进行细胞培养,目的是______________________。

(4)图中④的细胞培养,能获得________________细胞,便于大规模培养。

正确答案

(1)小鼠没有注射抗原,不能从小鼠体内获得产生特异性抗体的单一的B淋巴细胞(或对分离出的杂交瘤细胞进行抗体检测,筛选出能产生所需的单一抗体的杂交细胞)

(2)细胞融合 既能产生特异性抗体又能无限增殖

(3)筛选出融合的杂种细胞

(4)足够数量的

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应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:

(1)在培育转人生长激素基因牛的过程中,①过程需要的工具酶是_______。

(2)③过程培养到一定阶段,可以采用________技术,培育出多头完全相同的转基因牛犊。

(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是_______细胞,Ⅲ代表的细胞具有_________的特点。

(4)在抗虫棉培育过程中,进行④过程最常用的方法是___________。

正确答案

(1)限制性核酸内切酶(限制性内切酶、限制酶)、DNA连接酶

(2)胚胎分割、移植(胚胎分割和胚胎移植)

(3)浆(或效应B、经免疫的B淋巴细胞、B淋巴细胞)        既能无限增殖又能产生特定抗体

(4)农杆菌转化法

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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图。请回答:

(1)过程①代表的是___________。

(2)上述基因工程中的核心步骤_________,构建A基因表达载体时,必须使用_________和________两种工具酶。

(3)若将含有A基因的受体细胞在体外培养时,必须满足无菌无毒、营养、________、气体环境等条件,才能使细胞大量增殖;若受体细胞是受精卵,则需将其在体外培养到__________时期,将其移入到母体子宫,培育成转基因动物。转基因动物可以作为____________,生产A蛋白。

(4)过程③采用的实验技术是___________,过程③可以用电激,聚乙二醇、___________等做诱导因素,获得的X是_____________。

正确答案

(1)逆转录(或反转录)

(2)基因表达载体的构建     限制性核酸内切酶(或限制酶或限制性内切酶)     DNA连接酶(两空可以互换)

(3)温度和pH      囊胚或桑椹胚    生物反应器(或乳房生物反应器或乳腺生物反应器)

(4)细胞融合(或动物细胞融合)    灭活的病毒    杂交瘤细胞

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下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答:

(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至________期的内细胞团或胎儿的________中分离得到的一类细胞。

(2)图中分化程度最低的干细胞是________。在体外培养条件下,培养液中加入_______因子,可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。

(3)在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。

(4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的。骨髓移植的实质是将图中的____细胞移植到患者体内。

(5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞、皮肤细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的__________,其原因是_______________。

(6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制,使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______期。

(7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段,用___________细胞与骨髓瘤细胞融合,经多次筛选最终得到能分泌____________的杂交瘤细胞。

正确答案

(1)囊胚   原始性腺细胞

(2)胚胎干细胞   分化诱导

(3)选择性表达

(4)造血干

(5)红细胞   细胞中无细胞核

(6)间

(7)B淋巴   特异性抗体

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