- 土壤中微生物的分离与计数
- 共916题
用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为104的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是（ ）
正确答案
解析
解：用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数．
故选：D．
下列有关“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，A错误；
B、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，B正确；
C、将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，C正确；
D、确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数，D错误．
故选：AD．
曾经暴露于空气5分钟的培养皿在保温箱内培养一段时间后，出现了8个大菌落和3个小菌落．从空气中落入培养皿的细菌个数的最小值可能是（ ）
正确答案
解析
解：培养微生物时，由于为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多；由题意可知，出现了8个大菌落和3个小菌落，故至少为11个细菌．
故选：C．
2011年，荷兰皇家航空公司宣布，从9月份起，启用以生物柴油（即俗称的“地沟油”）为燃料的客机执飞阿姆斯特丹至巴黎的航班，以减少碳排放．科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，可以将地沟油提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油．
（1）用培养基培养微生物时，培养基中应有______、______、______ 和______等营养，同时还必须满足微生物生长对______、______、______ 的要求．在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用______培养基，可以在培养基中添加______作为唯一碳源．
（2）培养基灭菌采用的最适方法是______法．
（3）图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是______，过程二的接种方法是______，此方法计数的微生物M的数目______（＞、=、＜）实际活菌数，接种后应注意培皿基要______放置．
正确答案
解：（1）微生物的培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子等．同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、pH、氧气的要求．已知脂肪酶能够催化脂肪水解为脂肪酸和甘油，筛选产脂肪酶的微生物时，宜用植物油作为培养基中的唯一碳源，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基．
（2）培养基一般有高压蒸汽灭菌法灭菌．
（3）接种微生物常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法，获得图过程一的接种方法是平板划线法，过程二的接种方法是稀释涂布平板法．用稀释涂布平板法计数比实际值偏小．接种后应注意将培皿基倒置放置．
故答案为：
（1）水、无机盐、碳源、氮源 特殊营养物质 pH 氧气 选择 植物油
（2）高压蒸汽灭菌
（3）平板划线法 稀释涂布平板法＜倒置
解析
解：（1）微生物的培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子等．同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、pH、氧气的要求．已知脂肪酶能够催化脂肪水解为脂肪酸和甘油，筛选产脂肪酶的微生物时，宜用植物油作为培养基中的唯一碳源，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基．
（2）培养基一般有高压蒸汽灭菌法灭菌．
（3）接种微生物常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法，获得图过程一的接种方法是平板划线法，过程二的接种方法是稀释涂布平板法．用稀释涂布平板法计数比实际值偏小．接种后应注意将培皿基倒置放置．
故答案为：
（1）水、无机盐、碳源、氮源 特殊营养物质 pH 氧气 选择 植物油
（2）高压蒸汽灭菌
（3）平板划线法 稀释涂布平板法＜倒置
组氨酸缺陷型沙门氏菌是由野生菌种突变形成的，自身不能合成组氨酸．将其接种在缺乏组氨酸的平板培养基上进行培养，有极少量菌落形成．2-氨基芴是一种致突变剂，将沾有2-氨基芴的滤纸片放到上述平板培养基中，再接种组氨酸缺陷型沙门氏菌进行培养，会有较多菌落出现．以下叙述不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：
A、在微生物培养过程中，培养基、实验材料、实验用具都要进行灭菌处理．故A正确．
B、计算活菌的数目常用稀释涂布法，而不是用划线法．故B 错误．
C、2-氨基芴可使沙门氏菌中野生型增多，缺陷性型减少，如果再由野生型突变为缺陷型，则与该突变剂无关；故C 正确．
D、根据菌落的变化情况，可推测环境中的化学致突变剂．故D正确．
故选B．
正确答案
解析
解：A、据图中曲线可知，营养物质的浓度会影响菌体的产量，A错误；
B、据图可知，营养物质的浓度在0.1 mg/mL～1.0 mg/m1时，曲线斜率不同．说明对数期的生长速率不同，B错误；
C、图示只是说明了营养物质的浓度对生长速率和菌体产量的影响，不能判断是否会影响菌体的代谢途径，C正确；
D、营养物质的浓度可影响对数期的生长，则会影响菌体高速生长的时间，D错误．
故选：C．
为了比较不同清洁剂的抗菌效果，某学生用2种清洁剂在2种不同的家具上进行实验．取样后将样品转入培养基中培养．一段时间后，对细菌的菌落进行计数 （如下表）．下列说法正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、由题意可知，本实验的目的是比较不同清洁剂的抗菌效果，使用清洁剂前后的差值就是清洁剂的杀菌效果；A正确．
B、分析实验数据可知，不论是柜台还是水槽，使用a清洁剂前后的差值都大于使用b清洁剂前后的差值，这说明清洁剂a的清洁效果明显好于b；B正确．
C、对细菌计数常用的接种方法是稀释涂布平板法，不是平板划线法；C错误．
D、因为测试前要检测细水槽和柜台的菌数目，所以不应用清水擦洗水槽和柜台；D错误．
故应选AB．
（1）收获次级代谢产物的最佳时期是______，在第18～20h内，菌体繁殖了______代，此时期作为鉴定菌种的选材时期，是因为______．
（2）某同学用湿重法测大肠杆菌生长曲线，将一定量的大肠杆菌培养液用一张质量为a的定性滤纸过滤，收集菌体后称重（b），计算出菌体的湿重（b-a）．请您对该同学的方法给以恰当的评价．
______
（3）请设计实验，初步研究大肠杆菌生长的最适温度范围．
A、材料用具：菌种、牛肉膏蛋白胨培养液、试管、无菌滴管、振荡培养箱（温度可控）、显微镜、天平、载玻片、盖玻片、定性滤纸等．
B、方法步骤：①取8支试管，每管装入灭过菌的pH=7.0的牛肉膏蛋白胨培养液各5mL．
______
C、分析结果：______．
正确答案
解：（1）收获初级代谢产物的最佳时期是AB段（或调整期），收获次级代谢产物的最佳时期是EF段（或稳定期．根据曲线图可知，在第18～20h内，菌体繁殖了（Y2-Y1）÷lg2（或（Y2-Y1）÷ln2）代，此时期作为鉴定菌种的选材时期，是因为代谢旺盛，个体形态和生理特性比较稳定．
（2）某同学用湿重法测大肠杆菌生长曲线，将一定量的大肠杆菌培养液用一张质量为a的定性滤纸过滤，收集菌体后称重（b），计算出菌体的湿重（b-a）．该实验忽略了滤纸上吸附的培养液基质．应再取质地、大小与实验组中定性滤纸相同的另一张定性 滤纸称重，用滤液湿润，沥干后称重，将其差值从（b-a）中扣除．另外，最好重复上述操作2次，取平均值作为最终结果．
（3）B、方法步骤：①取8支试管，每管装入灭过菌的pH=7.0的牛肉膏蛋白胨培养液各5mL；②将8支试管分别标明20℃、28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2管；③向每管接入培养18～20h的大肠杆菌菌液0.1ml，混匀；④将上述各管分别按不同温度进行振荡培养24h，观察并记录结果．
C、分析结果：根据菌液的混浊度判断大肠杆菌生长繁殖的最适温度．
故答案为：
（1）EF段（或稳定期） （Y2-Y1）÷lg2（或（Y2-Y1）÷ln2）代谢旺盛，个体形态和生理特性比较稳定
（2）该实验忽略了滤纸上吸附的培养液基质．应再取质地、大小与实验组中定性滤纸相同的另一张定性 滤纸称重，用滤液湿润，沥干后称重，将其差值从（b-a）中扣除．另外，最好重复上述操作2次，取平均值作为最终结果．
（3）B、方法步骤：②将8支试管分别标明20℃、28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2管；③向每管接入培养18～20h的大肠杆菌菌液0.1ml，混匀；④将上述各管分别按不同温度进行振荡培养24h，观察并记录结果．
C、分析结果：根据菌液的混浊度判断大肠杆菌生长繁殖的最适温度（用其他方法如：测定菌体数目、测菌体重量法或比较菌落大小（固体培养基）均可）
解析
解：（1）收获初级代谢产物的最佳时期是AB段（或调整期），收获次级代谢产物的最佳时期是EF段（或稳定期．根据曲线图可知，在第18～20h内，菌体繁殖了（Y2-Y1）÷lg2（或（Y2-Y1）÷ln2）代，此时期作为鉴定菌种的选材时期，是因为代谢旺盛，个体形态和生理特性比较稳定．
（2）某同学用湿重法测大肠杆菌生长曲线，将一定量的大肠杆菌培养液用一张质量为a的定性滤纸过滤，收集菌体后称重（b），计算出菌体的湿重（b-a）．该实验忽略了滤纸上吸附的培养液基质．应再取质地、大小与实验组中定性滤纸相同的另一张定性 滤纸称重，用滤液湿润，沥干后称重，将其差值从（b-a）中扣除．另外，最好重复上述操作2次，取平均值作为最终结果．
（3）B、方法步骤：①取8支试管，每管装入灭过菌的pH=7.0的牛肉膏蛋白胨培养液各5mL；②将8支试管分别标明20℃、28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2管；③向每管接入培养18～20h的大肠杆菌菌液0.1ml，混匀；④将上述各管分别按不同温度进行振荡培养24h，观察并记录结果．
C、分析结果：根据菌液的混浊度判断大肠杆菌生长繁殖的最适温度．
故答案为：
（1）EF段（或稳定期） （Y2-Y1）÷lg2（或（Y2-Y1）÷ln2）代谢旺盛，个体形态和生理特性比较稳定
（2）该实验忽略了滤纸上吸附的培养液基质．应再取质地、大小与实验组中定性滤纸相同的另一张定性 滤纸称重，用滤液湿润，沥干后称重，将其差值从（b-a）中扣除．另外，最好重复上述操作2次，取平均值作为最终结果．
（3）B、方法步骤：②将8支试管分别标明20℃、28℃、37℃、45℃四种温度，每种温度2管；③向每管接入培养18～20h的大肠杆菌菌液0.1ml，混匀；④将上述各管分别按不同温度进行振荡培养24h，观察并记录结果．
C、分析结果：根据菌液的混浊度判断大肠杆菌生长繁殖的最适温度（用其他方法如：测定菌体数目、测菌体重量法或比较菌落大小（固体培养基）均可）
自然界中的微生物往往是混杂生长的．人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯．，然后进行数量的测定．下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题．步骤如下：
（1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液．
（2）为了得到更加准确的结果，你选用______（稀释混合平板法、稀释涂布平板法）接种样品．
（3）适宜温度下培养．
结果分析：
①测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养其中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______
A、一个子板，统计的菌落数是23
B、两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24
C、三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26
D、四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25
②一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）______．
③用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量______，因为______
④某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？______．
正确答案
解：（2）稀释混合平板法是将土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却45℃左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品基中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养，故稀释混合平板法结果更准确．
（3）①D中设有多个重复组，且实验结果相差不大，故D结果最可信．
②由于菌落数的平均值为23.4，稀释倍数是105，所取稀释液的体积为0.2mL，故每毫升样品中的菌落数是23.4÷0.2×105=1.17×107．
③因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多．
④因未设置空白对照，不能确定培养基是否被污染，故不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程．
故答案为：
（2）稀释混合平板法
（3）结果分析：
①D ②1.17×107
③多 当两个或多个细胞连在--起时，平板上观察的是-个菌落
④不能 因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程
解析
解：（2）稀释混合平板法是将土壤悬液对号放入平皿，然后再倒入溶化后冷却45℃左右的培养基，边倒入边摇匀，使样品基中的微生物与培养基混合均匀，待冷凝成平板后，分别培养后，再挑取单个菌落，直接获得纯培养，故稀释混合平板法结果更准确．
（3）①D中设有多个重复组，且实验结果相差不大，故D结果最可信．
②由于菌落数的平均值为23.4，稀释倍数是105，所取稀释液的体积为0.2mL，故每毫升样品中的菌落数是23.4÷0.2×105=1.17×107．
③因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多．
④因未设置空白对照，不能确定培养基是否被污染，故不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程．
故答案为：
（2）稀释混合平板法
（3）结果分析：
①D ②1.17×107
③多 当两个或多个细胞连在--起时，平板上观察的是-个菌落
④不能 因为不能排除杂菌来自培养基或来自培养过程
将少量细菌接种到适宜的培养基中，在适宜的条件下进行培养（不做其他处理）．以下哪个曲线图最有可能是该细菌种群数量从最初到最终的变化？（ ）
A
B
C
D
正确答案
解析
解：据分析可知，细菌的生长曲线可分为4个时期：调整期、对数期、稳定期、衰亡期．
故选：D．
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