- 土壤中微生物的分离与计数
- 共916题
下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方，如图所示为相关分离过程，回答下列问题（注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到）：
（1）从功能上看，甲培养基属于______．从物理性质上看，甲培养基属于______．其中提供氮源的物质是______．
（2）如果将乙培养基配制成固体培养基，则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤维素？______．如果培养基中加入______可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越______（大、小），表示该菌分解纤维素的能力越强．
（3）为了计数微生物的数量，图丙采用______法进行接种培养计数，除此之外，还可以采用______法进行计数．其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果______（大、小）．
（4）一位同学利用如图的方法步骤在4个平板培养基上分别接种0.1mL土壤稀释液④，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则1mL原土壤样液①中微生物数量约为______．
正确答案
解：（1）题干指出甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基，其中尿素是作为唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以甲功能上看属于选择培养基，从物理性质上看甲培养基属于．由于含氮物质只有尿素，所以提供氮源的物质是尿素．
（2）在乙配制的固体培养基上生长的菌落不一定都能分解纤维素，有可能利用水解酪素等能提供碳源，也有可能纤维素被分解后产生的糖类等也可为其它微生物生长提供碳源等．如果培养基中加入刚果红可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越大，表示该菌分解纤维素的能力越强．
（3）纯化微生物可以用稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布法能用于微生物的计数．除此之外，还可以采用血球计数板计数法进行计数，但用稀释涂布平板法进行计数所得结果要比血球计数板计数进行计数所得的结果要小．
（4）1毫升原土壤样液中上述微生物数量=（180+155+176+129）÷4÷20%÷20%÷20%×10=2×105个．
故答案为：
（1）选择培养基 固体培养基 尿素
（2）否 刚果红 大
（3）稀释涂布平板 血球计数板计数 小
（4）2.0×105个
解析
解：（1）题干指出甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基，其中尿素是作为唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以甲功能上看属于选择培养基，从物理性质上看甲培养基属于．由于含氮物质只有尿素，所以提供氮源的物质是尿素．
（2）在乙配制的固体培养基上生长的菌落不一定都能分解纤维素，有可能利用水解酪素等能提供碳源，也有可能纤维素被分解后产生的糖类等也可为其它微生物生长提供碳源等．如果培养基中加入刚果红可以筛选出具有分解纤维素能力的菌株，同时透明圈越大，表示该菌分解纤维素的能力越强．
（3）纯化微生物可以用稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布法能用于微生物的计数．除此之外，还可以采用血球计数板计数法进行计数，但用稀释涂布平板法进行计数所得结果要比血球计数板计数进行计数所得的结果要小．
（4）1毫升原土壤样液中上述微生物数量=（180+155+176+129）÷4÷20%÷20%÷20%×10=2×105个．
故答案为：
（1）选择培养基 固体培养基 尿素
（2）否 刚果红 大
（3）稀释涂布平板 血球计数板计数 小
（4）2.0×105个
根据各类微生物形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌和硝化细菌分离开来．下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写有关内容．（注：圆褐固氮菌能自生固氮）
（1）用无氮培养基可筛选出______．
（2）用不含有机碳源的选择培养基可筛选出______．
（3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入______．
（4）用加了较高浓度NaCl的选择培养基可筛选出金黄色葡萄球菌，或者根据菌落的颜色呈现______色，将其挑取单独培养．
（5）利用伊红和美蓝培养基培养混合菌，菌落呈______色并带有______的是______，挑取该菌单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定．
（6）在无氧条件下培养混合菌，______可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制______的生长，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长的菌落，即可分离出______．
正确答案
解：（1）无氮培养基可筛选出能固氮的微生物，即圆褐固氮菌．
（2）不含有机碳源的选择培养基可筛选出自养型微生物，即硝化细菌．
（3）酵母菌是真菌，筛选时常在培养基中加入抗生素，防止其他细菌的生长．
（4）金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，可据此筛选．
（5）利用伊红和美蓝培养基可用来培养和鉴定大肠杆菌，菌落呈黑色并带有金属光泽．
（6）无氧条件下乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度乳酸可以抑制酵母菌的生长，随后筛选出乳酸菌．
故答案为：
（1）圆褐固氮菌
（2）硝化细菌
（3）青霉素（或抗生素）
（4）金黄
（5）黑 金属光泽 大肠杆菌
（6）乳酸菌和酵母菌 酵母菌 乳酸菌
解析
解：（1）无氮培养基可筛选出能固氮的微生物，即圆褐固氮菌．
（2）不含有机碳源的选择培养基可筛选出自养型微生物，即硝化细菌．
（3）酵母菌是真菌，筛选时常在培养基中加入抗生素，防止其他细菌的生长．
（4）金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，可据此筛选．
（5）利用伊红和美蓝培养基可用来培养和鉴定大肠杆菌，菌落呈黑色并带有金属光泽．
（6）无氧条件下乳酸菌和酵母菌可以生长，加入一定浓度乳酸可以抑制酵母菌的生长，随后筛选出乳酸菌．
故答案为：
（1）圆褐固氮菌
（2）硝化细菌
（3）青霉素（或抗生素）
（4）金黄
（5）黑 金属光泽 大肠杆菌
（6）乳酸菌和酵母菌 酵母菌 乳酸菌
下列关于生长因子的叙述不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，正确；
B、生长因子主要包括氨基酸、维生素、碱基，B正确；
C、有些微生物自身能够合成生长因子，C错误；
D、因为不能合成生长因子或合成量有限，所以需要添加，D正确．
故选：C．
下列关于分解尿素的细菌，说法正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、分离分解尿素的细菌时用尿素作为唯一氮源，A正确；
B、能分解尿素的原因是能合成并分泌脲酶，B错误；
C、该细菌产生脲酶是受基因控制的，可以对环境中含有的大量的尿素进行分解，C错误；
D、分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，D错误．
故选：A．
下列关于实验操作的叙述中，错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、在试管中加入发酵液2mL，再滴入物质的量浓度为3mol•L-1的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴可以检测酒精的生成，A正确；
B、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨，使pH升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌，B错误；
C、无菌技术包括消毒和灭菌，消毒的强度比较弱，只能杀死部分微生物（不包括芽孢和孢子），灭菌的强度比较大，可以杀死一切微生物（包括芽孢和孢子），C正确；
D、在进行果酒制作的过程中，温度控制在18-25℃同时控制氧气的进入，而在进行果醋制作过程中，温度控制在30-35℃同时一直保持通气，D正确．
故选：B．
下列培养基成分中能用于分离分解尿素的细菌的是（ ）
正确答案
解析
解：根据题意分析可知，分解尿素的细菌需要KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O等无机盐，还要水、碳源和氮源，葡萄糖可以为其提供碳源，但是其氮源只能是尿素．
故选：C．
分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（ ）
注：“+”表示加入，“-”表示不加．
正确答案
解析
解：土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物．培养基中只加尿素，不加其它氮源如硝酸盐，分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物要用固体培养基，所以加琼脂糖；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物，需要加葡萄糖作为碳源．
故选：C．
下列对生物固氮的叙述，正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、在氧气不足的情况下，土壤中的一些细菌如反硝化细菌可以将硝酸盐最终转化成氮气．故A错误．B、大豆所需要的氮素有的高达80%以上可由根瘤菌来提供．大豆植株所需的氮也可来自根的吸收．故B错误．C、圆褐固氮菌的新陈代谢类型是异养需氧型．无成形的核．圆褐固氮菌具有较强的固氮 能力，根本原因在质粒DNA上有固氮基因．并且能够分泌生长素，促进植株的生长和果实的发育，因此，将圆褐固氮菌制成菌剂，施用到土壤中，可以提高农作物的产量．故C正确．
D、氮循环是氮元素在无机环境和生物群落之间的往返过程．故D错误．
下列有关生物工程与技术的叙述不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、PCR是体外快速复制DNA的技术，可用于目的基因的获取，A正确；
B、选择单核期的花药培养的成功率要高，B正确；
C、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌，C错误；
D、“三北防护林”建设中，生态适应性问题体现了生物与环境的协调与平衡原理；树种多样性问题体现了物种多样性原理，D正确．
故选：C．
下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、植物组织培养常用的是MS固体培养基，A正确；
B、每一种细菌在固体培养基上形成固定的菌落特征，这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义，B正确；
C、当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，C正确；
D、在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌，D错误．
故选：D．
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