- 土壤中微生物的分离与计数
- 共916题
在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为（ ）
①溶化 ②调pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤分装 ⑥称量．
正确答案
解析
解：在培养基的配制过程中，根据微生物的生长需要，称量不同的营养物质，然后溶化、调整PH、培养基的分装、加棉塞、包扎等，所以正确的顺序是⑥①②⑤③④．
故选：B．
I．炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、早竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊．
（1）细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落．
（2）细菌鉴定：实验流程如题图1所示
①对配制的液体培养基等需采取______方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为______（填“无机碳”或“有机碳”）．
②挑选可疑菌落制片后，用______观察，可看到呈竹节状排列的杆菌．
③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是______，对照组试管中应加入______，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组______（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．
④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体．与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有______．
II．为探究食物相同的三种水生动物的种群增长规律及种间关系，某小组进行了下列3组实验（各组实验中，每种动物初始数量相等，饲养条件相同）：
组1：甲种与乙种分别于两个容器中饲养，甲种数量变化如题图A所示．
组2：甲种与乙种于同一容器中饲养，乙种数量变化如曲线F所示．
组3：乙种与丙种于同一容器中饲养，形成上、下层分离分布，一段时间后每种动物的数量均较组1少．
（1）组1中，甲种动物的种群数量主要由______和______决定；若容器内饲养液体积为20mL，则第40天时乙种的种群密度为______．
（2）在某些生态系统中，存在与本实验类似的种间关系．
①在同一段河流中食物相同的两种鱼，分别分布在河流中央底部和临近河岸底部，其种间关系与图中曲线______代表的类似，其分布体现生物群落的______结构．
②在玻璃温室中放养食物相同的两种传粉昆虫后，一种数量增加，另一种减少，其种间关系与图中曲线______代表类似．
正确答案
高压蒸汽
有机碳
显微镜
细菌大量繁殖
等量生理盐水
低
噬细胞、效应B细胞
出生率
死亡率
30只/ml
D和E
水平
B和F
解析
解：Ⅰ、（2）①对配制的液体培养基等需采取高压蒸汽（98KPa蒸汽）方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为有机碳，因炭疽杆菌代谢的同化方式为异养型．
②挑选可疑菌落制片后，用显微镜观察，可看到呈竹节状排列的杆菌．因细菌比较微小，必须放大后才能看见．
③接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是细菌大量繁殖；对照组试管中应加入等量的生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．要运用实验的等量原则和单一变量原则以及对照原则，噬菌体的宿主具有专一性，患者被炭疽杆菌感染，则实验组加入的噬菌体就会侵染炭疽杆菌，炭疽杆菌就会裂解，细菌数量减少浑浊度低．
④与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有吞噬细胞、效应B细胞．因此时抗体的产生是易感人群第一次接触抗原，所以与记忆细胞无关．
Ⅱ、（1）组1实验中，甲种动物的种群数量主要由出生率和死亡率决定的；若甲种群数量变化曲线为A，则乙种群数量变化曲线很可能是C．在第40天时，乙种的种群数量为600只，而容器内饲养液体积为20mL，所以此时乙种的种群密度为30只/mL（600只/20 mL）．
（2）①在同一段河流中食物相同的两种鱼，分别分布在河流中央底部和临近河岸底部，其种间关系与实验中的组3中的乙种和丙种生物相似，由于是两种生物的种间关系，应是两条曲线D和E．其分布体现生物群落的水平结构．
②在玻璃温室中放养食物相同的两种传粉昆虫后，一种数量增加，另一种减少，其种间关系与实验中的组2中的甲种和乙种生物相似，由于是种间关系，是两种生物，应是两条曲线B和F．
故答案为：
Ⅰ（2）①高压蒸汽 有机碳 ②显微镜 ③细菌大量繁殖 等量生理盐水 低 ④吞噬细胞、效应B细胞
Ⅱ（1）出生率 死亡率（两者位置可互换） 30只/ml
（2）①D和E 水平 ②B和F
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．
（1）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于______培养基，仅以淀粉作为______源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入______作为凝固剂．
（2）进行①过程的目的是______；②过程所使用的接种方法是______法．
（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是______；一般对配制的培养基采用______法灭菌．
（4）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放______分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈______（大或小）的菌落，接种到Ⅱ号培养基．
正确答案
解：（1）分析图示信息可知，Ⅰ号培养基属于选择培养基，其目的是筛选出高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，所以仅以淀粉作为唯一的碳源．从物理状态分析，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配置时常加入琼脂作为凝固剂．
（2）图中①过程是稀释嗜热菌培养液的过程，接种嗜热菌即②过程常用稀释涂布平板法．
（3）培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节pH，后灭菌，一般培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法．
（4）部分嗜热菌在Ⅰ培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生的淀粉酶越多，应挑选透明圈大的菌落接种在Ⅱ号培养基上继续培养．
故答案为：
（1）选择 （唯一）碳 琼脂
（2）稀释 稀释涂布平板
（3）先调节PH，后灭菌 高压蒸汽灭菌
（4）淀粉酶 大
解析
解：（1）分析图示信息可知，Ⅰ号培养基属于选择培养基，其目的是筛选出高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，所以仅以淀粉作为唯一的碳源．从物理状态分析，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配置时常加入琼脂作为凝固剂．
（2）图中①过程是稀释嗜热菌培养液的过程，接种嗜热菌即②过程常用稀释涂布平板法．
（3）培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节pH，后灭菌，一般培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法．
（4）部分嗜热菌在Ⅰ培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生的淀粉酶越多，应挑选透明圈大的菌落接种在Ⅱ号培养基上继续培养．
故答案为：
（1）选择 （唯一）碳 琼脂
（2）稀释 稀释涂布平板
（3）先调节PH，后灭菌 高压蒸汽灭菌
（4）淀粉酶 大
下列无菌操作不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，A正确；
B、将尿素溶液通过细菌过滤器可以达到除菌的目的，B正确；
C、用紫外灯照射进行超净工作台的灭菌，C正确；
D、培养基在使用前需灭菌处理，但是微生物不能灭菌处理，D错误．
故选：D．
下面是微生物平板划线示意图．划线的顺序为1、2、3、4、5下列叙述正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，但培养基只是在接种前进行灭菌即可，A错误；
B、划线时皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面，B错误；
C、接种环不应划破培养基表面，否则不能分离得到单菌落，C正确；
D、划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，D错误．
故选：C．
涂布平板操作需要用到（ ）
正确答案
解析
解：涂布平板时，需要移液管将菌液进行一系列梯度的稀释；需要用酒精灯对涂布器进行灼烧灭菌；进行涂布时，需要用涂布器将菌液涂布均匀，该操作要在酒精灯的火焰旁进行．
故选：C．
（1）酵母菌发酵产生酒精和______，因此要适时进行______处理，防止发酵装置内部压力过高．
（2）为优化呼吸缺陷型酵母菌的筛出条件，研究人员设计了三因素三水平的紫外线诱变实验，结果如表．表中空白位置的参数设置从左到右依次应为______．据表中数据分析，最佳诱变参数为______．
（3）将诱变获得的酵母菌放入适宜的培养基中培养，培养基中加入TTC（无色物质，可与还原剂反应生成红色物质），野生型菌落为红色，呼吸缺陷型菌落几乎为白色，这是由于呼吸缺陷型酵母菌无法产生大量的______，不能将TTC还原为红色物质．由此推断，导致呼吸缺陷的基因突变最可能影响______的第______阶段．呼吸缺陷型酵母菌生长繁殖所需的ATP来自于______．
（4）为研究某呼吸缺陷型酵母菌的酒精发酵能力，科研人员在一定葡萄糖浓度条件下，测试两种菌株的酒精发酵，结果如图所示．据图可知，在8-32小时内，野生型比呼吸缺陷型酵母菌发酵液酒精浓度______，由此判断该呼吸缺陷型酵母菌______（填“适宜”或“不适宜”）作为酒精发酵菌种．
正确答案
解：（1）酵母菌发酵产生酒精和二氧化碳，由于发酵罐密闭，故应注意适时排气．
（2）实验设计遵循的是单一变量原则，由表可知，照射时间和照射剂量以及照射距离的值是固定的3个，即照射时间（1.5、2.0、2.5），照射剂量（12、15、17），照射距离（18、20、22），故456组照射时间一定，照射距离和剂量应为固定的三个值，第六组的照射距离为18，同理147组照射剂量一定，对的照射距离为22，789组照射时间一定，对应的照射距离为18，从表中可以分析得出第5组诱变效果最好，即在照射时间2min、照射剂量15W、照射距离22cm的条件下．
（3）由于TTC可与还原剂反应生成红色物质，野生型菌落为红色，呼吸缺陷型菌落几乎为白色，由于呼吸缺陷型酵母菌无法产生大量的[H]导致的，不能将TTC还原为红色物质，因此可以推断出导致呼吸缺陷的基因突变最可能影响有氧呼吸第2阶段，由于呼吸缺陷型酵母菌无法产生大量的[H]，所以只能进行有氧呼吸第1阶段或无氧呼吸产生少量ATP．
（4）由图可知，在8-32小时内，野生型比呼吸缺陷型酵母菌发酵液酒精浓度，所以呼吸缺陷型酵母菌不适宜作为酒精发酵菌种．
故答案为：（1）CO2 排气
（2）18、22、18 照射时间2min、照射剂量15W、照射距离22cm
（3）[H]有氧呼吸 二 无氧呼吸或有氧呼吸第一阶段
（4）高 不适宜
解析
解：（1）酵母菌发酵产生酒精和二氧化碳，由于发酵罐密闭，故应注意适时排气．
（2）实验设计遵循的是单一变量原则，由表可知，照射时间和照射剂量以及照射距离的值是固定的3个，即照射时间（1.5、2.0、2.5），照射剂量（12、15、17），照射距离（18、20、22），故456组照射时间一定，照射距离和剂量应为固定的三个值，第六组的照射距离为18，同理147组照射剂量一定，对的照射距离为22，789组照射时间一定，对应的照射距离为18，从表中可以分析得出第5组诱变效果最好，即在照射时间2min、照射剂量15W、照射距离22cm的条件下．
（3）由于TTC可与还原剂反应生成红色物质，野生型菌落为红色，呼吸缺陷型菌落几乎为白色，由于呼吸缺陷型酵母菌无法产生大量的[H]导致的，不能将TTC还原为红色物质，因此可以推断出导致呼吸缺陷的基因突变最可能影响有氧呼吸第2阶段，由于呼吸缺陷型酵母菌无法产生大量的[H]，所以只能进行有氧呼吸第1阶段或无氧呼吸产生少量ATP．
（4）由图可知，在8-32小时内，野生型比呼吸缺陷型酵母菌发酵液酒精浓度，所以呼吸缺陷型酵母菌不适宜作为酒精发酵菌种．
故答案为：（1）CO2 排气
（2）18、22、18 照射时间2min、照射剂量15W、照射距离22cm
（3）[H]有氧呼吸 二 无氧呼吸或有氧呼吸第一阶段
（4）高 不适宜
下列是有关微生物的培养问题，分析回答．
（1）分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O．若用于培养纤维素分解菌，应加入______物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入______染料．
（2）获得的菌种如果需要长期保存，可以采用______的方法．
正确答案
解：（1）若要培养纤维素分解菌，需要加入以纤维素为唯一碳源的固体培养基培养，检测纤维素分解菌的存在与否，还应加刚果红，观察透明圈是否产生．
（2）菌种短期保存需接种在试管中斜面培养基上，然后放入4℃的冰箱；若长期保存需用甘油管藏的方法，在零下20℃保存．
故答案为：（1）纤维素粉 刚果红
（2）甘油管藏
解析
解：（1）若要培养纤维素分解菌，需要加入以纤维素为唯一碳源的固体培养基培养，检测纤维素分解菌的存在与否，还应加刚果红，观察透明圈是否产生．
（2）菌种短期保存需接种在试管中斜面培养基上，然后放入4℃的冰箱；若长期保存需用甘油管藏的方法，在零下20℃保存．
故答案为：（1）纤维素粉 刚果红
（2）甘油管藏
微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自______的土壤．
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用______培养基，常用的接种方法是______．
（3）接种后，应密封培养的原因是______，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取______就可获得高效菌株．
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220，则样品中微生物的数量为______个/mL，该统计结果______（低于、高于）实际值．
（5）在果醋制作时，运用醋酸菌在______供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式：______．
（6）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制______；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在______%左右．
（7）制作泡菜的原理是______．
正确答案
解：（1）在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集．
（2）从功能上，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）该类微生物是厌氧微生物，接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株．
（4）计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即（200+180+220）÷0.2=100个/mL．该结果会低于实际值，因为看到的是菌落数目．
（5）在果醋制作时，运用醋酸菌在氧气供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，其化学反应式为：C2H5OH+O2
（6）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右．
（7）制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸．
故答案为：
（1）长期被石油污染
（2）选择 平板划线法、稀释涂布平板法
（3）该类微生物是厌氧型 降油圈大的菌落
（4）1000 低于
（5）氧气 C2H5OH+O2
（6）盐的用量 12
（7）乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸
解析
解：（1）在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以土壤取样时，应从含石油多的土壤中采集．
（2）从功能上，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）该类微生物是厌氧微生物，接种后应密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株．
（4）计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即（200+180+220）÷0.2=100个/mL．该结果会低于实际值，因为看到的是菌落数目．
（5）在果醋制作时，运用醋酸菌在氧气供应和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，其化学反应式为：C2H5OH+O2
（6）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．用盐腌制时，应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右．
（7）制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸．
故答案为：
（1）长期被石油污染
（2）选择 平板划线法、稀释涂布平板法
（3）该类微生物是厌氧型 降油圈大的菌落
（4）1000 低于
（5）氧气 C2H5OH+O2
（6）盐的用量 12
（7）乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸
回答下列有关微生物的问题：
（1）19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击．在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成该现象的生物是______．在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的______．发酵过程中，随着酒精度的提高，______也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色．
（2）灭菌是用______杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子．对培养皿灭菌常用的方法是______．在进行平板划线时，划线操作结束后，______（需要或不需要）灼烧接种环．
（3）纯化大肠杆菌时常用的接种方法有：______、______．由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的______，就是菌落．
正确答案
解：（1）葡萄酒变酸形成葡萄醋，主要原因是醋酸菌污染．在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的酵母菌．发酵过程中，随着酒精度的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色．
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程．需要保持干燥的玻璃器皿可以用干热灭菌．在进行平板划线时，划线操作结束后，需要灼烧接种环，以防污染．
（3）纯化大肠杆菌时常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法．由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落．
故答案为：
（1）醋酸菌 酵母菌 红葡萄皮的色素
（2）强烈的理化因素 干热灭菌 需要
（3）平板划线法 稀释涂布平板法 子细胞群体
解析
解：（1）葡萄酒变酸形成葡萄醋，主要原因是醋酸菌污染．在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的酵母菌．发酵过程中，随着酒精度的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色．
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程．需要保持干燥的玻璃器皿可以用干热灭菌．在进行平板划线时，划线操作结束后，需要灼烧接种环，以防污染．
（3）纯化大肠杆菌时常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法．由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落．
故答案为：
（1）醋酸菌 酵母菌 红葡萄皮的色素
（2）强烈的理化因素 干热灭菌 需要
（3）平板划线法 稀释涂布平板法 子细胞群体
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