热门试卷

请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：

（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母体中发育和产出等过程。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其＿＿＿＿＿。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和＿＿＿＿＿。

（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是＿＿＿＿＿＿＿、基因表达载体的构建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺细胞）。

取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。

（1）基因1－8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因＿＿＿。

（2）图所示细胞中功能最为近似的是细胞＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

a  ，  1与6

b  ，2与5

c   ，2与3

d ， 4与5

（3）判断图中细胞功能近似程度的依据是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是＿＿＿＿＿＿＿。

（5）右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（6）新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行＿＿＿＿＿＿，才能确定受体细胞已含有目的基因。

（7）在已确定含有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因后缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是＿＿＿＿＿＿＿＿＿（多选）。

a、抗青霉素基因不能转录

b、基因1和7没有表达

c、基因1和7不能连接

d、质粒上的酶切位置发生改变

人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。

（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从已处死的雌鼠________中获取。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

图1 表示含有目的基因D 的DNA 片段长度（bp 即碱基对）和部分碱基序列，图2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4 种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 __________连接。

（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1 中DNA 片段，产生的末端是 __________末端，其产物长度为 ____________________________。

（3）若图1 中虚线方框内的碱基对被T-A 碱基对替换，那么基因D 就突变为基因d。从杂合子中分离出图1 及其对应的DNA 片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA 片段。

（4）若将图2 中质粒和目的基因D 通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 __________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌, 一般需要用添加 __________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D 不能正确表达，其最可能的原因是 ________________________。

回答下列有关基因工程的问题。

（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是________。

下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。

（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有________。（可多选）

A. X-1 

B. X-2

C. X-3

D. X-4

（3）若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有______、______。

（4）如果X-1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X-2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为________对碱基。

（5）若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X-4的细胞数与含X-1的细胞数之比为1：3，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？ ________。原因是________。

肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：

（1）进行过程①时，需用       酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为       。

（2）进行过程e委时，需用       酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

（3）研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取            进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中            (RASmRNA／RAS蛋白质)含最减少引起的。