热门试卷

烟草是一种种植历史悠久的作物，可以采用不同方式进行育种。

（1）现有甲、乙两种烟草（2n=24），二者远缘杂交不亲和。研究人员用甲、乙植株进行了体细胞杂交，将叶肉细胞去除细胞壁制成_____________，在促融剂______________的诱导下，融合成为杂种细胞并最终培养成杂种植株。在杂种植株中发现有一株体细胞染色体数目为47条的丙植株，将丙与甲植株进行杂交，F1中一些植株（丁）体细胞含有35条染色体，其中有22条染色体在减数分裂时能联会，其余不能联会，由此推测丙植株所缺失的染色体属于_____（填“甲”或“乙”）植株。如果所缺失的那条染色体属于另一植株，那么丁植株在减数分裂时应有_____条染色体能联会，其余____条染色体不能联会。

（2）甘蔗的蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性直接反映了甘蔗体内蔗糖合成的能力。研究人员将未突变和已突变的蔗糖磷酸合成酶基因分别转入烟草中，测定比较了所得SPS的活性，为作物的改良提供了一定的依据。

①甘蔗中控制SPS合成的基因简称SPS3L，研究人员利用特定的试剂和技术手段将SPS3L基因相关位点的碱基TCA突变成CGA，从而使SPS的第153位丝氨酸变为丙氨酸，而其他氨基酸均无改变，此种突变基因称为SPS3L-A型。由此推测在人工的处理下，SPS3L基因中的碱基可发生________（填“定向”或“不定向”）改变。另两种突变型（SPS3L-T型、SPS3L-G型）也用此方法获得。

②将目的基因与含有潮霉素抗性基因的Ti质粒构建基因表达载体，采用农杆菌转化法导入烟草细胞，利用______________技术进行培养。培养基中除含有必要营养物质、植物激素和琼脂外，还必须加入_________进行筛选。若要检测目的基因是否导入烟草细胞，可采用_______________技术或PCR技术进行检测。

③取上述已成功导入目的基因的新鲜烟草，分别测定叶片的可溶性糖含量，结果如图所示。

四种转基因烟草中，导入__________的是对照组，_________型的烟草叶片可溶性糖的含量与之相比没有发生明显变化，推测在153位的丝氨酸虽然被替代，但SPS的活性___________。由测定结果可以看出_____________型SPS活性最高，最适合用来改良作物。

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由                         连接。

（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为

（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有     种不同DNA片段。为了提高实验成功率，需要通过             技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝，该方法也是检测         多样性最简单的方法。

（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是             。在导入重组质粒后，为了筛选出含质粒的大肠杆菌，一般需要用添加            的培养基进行培养，用影印法接种到只含                的培养基中培养，可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。

（5）假设用BamH Ⅰ切割DNA获取目的基因，用Mbo Ⅰ切割质粒，然后形成重组质粒，若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来，能否用BamH Ⅰ？       。为什么？