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题型:填空题
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填空题 · 2 分

62.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图21中的           限制酶进行酶切。

正确答案

XhoⅠ

解析

质粒上有 XhoⅠ识别位点,而且在启动子之后,所以选用 XhoⅠ限制酶进行酶切。

考查方向

基因工程

解题思路

运用基因工程的有关知识进行分析、推导。

易错点

重组质粒的鉴定

知识点

基因工程的原理及技术
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题型: 单选题
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单选题 · 2 分

63.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是            

A

B

C

D

正确答案

A

解析

B无标记基因,C、D则破坏了标记基因,均不适合,只有A适合。

考查方向

基因工程

解题思路

运用基因工程的有关知识进行分析、推导。

易错点

重组质粒的鉴定

知识点

基因工程的原理及技术
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题型: 多选题
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多选题 · 2 分

64.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,错误的是_______(多选)。



A限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列

B限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同

C使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解

D质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的

正确答案

A,B,D

解析

限制性核酸内切酶能识别DNA特定序列、并在特定位点切割DNA,A错。限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的不相同,B错。使用质粒运载体是为了避免目的基因被宿主分解,C正确。质粒运载体不可能是从病毒的DNA改造的,D错。

考查方向

基因工程

解题思路

运用基因工程的有关知识进行分析、推导。

易错点

重组质粒的鉴定

知识点

基因工程的原理及技术
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题型:填空题
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填空题 · 2 分

65.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图21所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为    个,反向连接的重组载体产生片段有       (多选)。

①100bp

②200bp

③600bp

④700bp

⑤6000bp

⑥6500bp

正确答案

2 ②⑥

解析

正向连接,产生长度分别与质粒和 GDNF 基因长度相同,反向连接则也有两种片段,分别是200bp、6500bp。

考查方向

基因工程

解题思路

运用基因工程的有关知识进行分析、推导。

易错点

重组质粒的鉴定

知识点

基因工程的原理及技术
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题型:简答题
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简答题 · 2 分

54. 回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。

纤维素分子因为分子量大,不能直接进入酵母细胞,并且酵母菌无法分解环境中的纤维素。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞。其所用质粒及其酶切位点如图甲,外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙,根据要求回答以下问题:

为了防止酶切片段的自身环化,实现工程目标,应选用限制酶__________和__________同时切割质粒和外源DNA。

正确答案

HindⅢ和PstⅠ

解析

如果只用PstⅠ酶切割质粒和目的基因,由于质粒或目的基因都拥有两个相同的末端,容易发生自身环化,难以形成重组质粒。

考查方向

本题考查基因工程的工具、过程等生命科学基础知识和原理。运用生命科学基础知识设计实验、分析实验结果。考查从文字、图表中获取有效信息,应用生命科学专业术语表达思维过程。在近年上海高考试题出现频率较高。

易错点

1、混淆同种限制酶切割目的基因与不同种限制酶切割目的基因的区别。

知识点

基因工程的原理及技术
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题型:简答题
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简答题 · 11 分

下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程。

图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因;BamHI位点酶切是一种限制酶;A、B是含有特定抗生素的培养基。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了筛选出运载体导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌(受体细胞),首先将大肠杆菌培养在通用培养基上,再将其菌落原位转移到A、B培养基上培养(如图中④),得到如图结果:黑点表示菌落,A中空圈表示B的菌落在A中不能生长的位置。据此分析并回答:

(1)“pBR322”的化学本质是_______,在自然情况下可通过 ________过程进行扩增。

(2)左图中过程①表示的获得目的基因的方法是___,过程②中DNA连接酶的作用是___ 。过程③是 ________    。

(3)根据用途,左图中A、B所用培养基属于 _______ 。所需大肠杆菌的菌落位于______上(选填“A”或“B”),理由是_______。

(4)基因工程的理论基础是中心法则,根据右图遗传信息表达可用公式(图解)表示为_______。

(5)若氨基酸的平均相对分子质量为128,则右图中以③片段为模板合成的①的相对分子质量为_______。

(6)下列是几种搭配的密码子,据此推断右图中合成的多肽,其前三个搭配的种类(按前后顺序排列)__   __。[甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU)]

正确答案

(1) DNA  自我复制

(2)从生物体细胞中分离  将目的基因与运载体结合形成重组DNA     将重组质粒导入受体细胞

(3)选择培养基       B    导入目的基因后四环素抗性基因被破坏,重组质粒中应该只含氨苄青霉素抗性基因,所以能在B存活但不能在A存活的说明含有重组质粒(合理即可)

(4)

(5) 458

(6)甲硫氨酸、丙氨酸、丝氨酸

解析


知识点

基因工程的原理及技术
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题型: 单选题
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单选题 · 2 分

下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是                                   (    )

A①②

B①③

C①④

D②③

正确答案

B

解析

知识点

基因工程的原理及技术
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题型: 单选题
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单选题 · 2 分

进行生物工程设计时,下表各组所选择的常用实验材料与实验目的配置错误的是      (    )

AA

BB

CC

DD

正确答案

C

解析

知识点

基因工程的原理及技术胚胎干细胞的移植
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题型:填空题
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填空题 · 15 分

科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。

(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是________。该过程所依据的碱基互补配对原则是________________(用字母和箭头表示)。

(2)图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的?________________________。

(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:

①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。

②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落,而在培养基B上能生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。

③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落,则使用限图2中的制酶a的切点是________。

正确答案

(1)逆转录酶; A→T、U→A、G→C、C→G

(2)垂体细胞

(3)①切点3或切点4或切点5; 抗四环素基因

  ②切点1 ;抗氨芐青霉素基因

 ③切点2

解析


知识点

DNA分子的复制遗传信息的转录和翻译基因工程的原理及技术基因工程的应用
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题型:简答题
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简答题 · 2 分

56. 回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。

纤维素分子因为分子量大,不能直接进入酵母细胞,并且酵母菌无法分解环境中的纤维素。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞。其所用质粒及其酶切位点如图甲,外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙,根据要求回答以下问题:

作用于右图a位置的酶有__________(多选)

正确答案

BCD

解析

a是DNA分子中磷酸二酯键所在位置,DNA解旋酶作用于氢键即b处,所以A有误;DNA连接酶将目的基因与质粒链接、DNA聚合酶在DNA复制时发挥作用,都形成磷酸二酯键;限制酶在切割质粒与目的基因时伴随着磷酸二酯键的断开,所以B、C、D正确。

易错点

1、混淆同种限制酶切割目的基因与不同种限制酶切割目的基因的区别。

知识点

基因工程的原理及技术
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