- 基因工程的原理及技术
- 共249题
62.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图21中的 限制酶进行酶切。
正确答案
XhoⅠ
解析
质粒上有 XhoⅠ识别位点,而且在启动子之后,所以选用 XhoⅠ限制酶进行酶切。
考查方向
基因工程
解题思路
运用基因工程的有关知识进行分析、推导。
易错点
重组质粒的鉴定
知识点
63.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。
正确答案
解析
B无标记基因,C、D则破坏了标记基因,均不适合,只有A适合。
考查方向
基因工程
解题思路
运用基因工程的有关知识进行分析、推导。
易错点
重组质粒的鉴定
知识点
64.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,错误的是_______(多选)。
正确答案
解析
限制性核酸内切酶能识别DNA特定序列、并在特定位点切割DNA,A错。限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的不相同,B错。使用质粒运载体是为了避免目的基因被宿主分解,C正确。质粒运载体不可能是从病毒的DNA改造的,D错。
考查方向
基因工程
解题思路
运用基因工程的有关知识进行分析、推导。
易错点
重组质粒的鉴定
知识点
65.GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图21所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:
经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图21所示)。为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为 个,反向连接的重组载体产生片段有 (多选)。
①100bp
②200bp
③600bp
④700bp
⑤6000bp
⑥6500bp
正确答案
2 ②⑥
解析
正向连接,产生长度分别与质粒和 GDNF 基因长度相同,反向连接则也有两种片段,分别是200bp、6500bp。
考查方向
基因工程
解题思路
运用基因工程的有关知识进行分析、推导。
易错点
重组质粒的鉴定
知识点
54. 回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
纤维素分子因为分子量大,不能直接进入酵母细胞,并且酵母菌无法分解环境中的纤维素。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞。其所用质粒及其酶切位点如图甲,外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙,根据要求回答以下问题:
为了防止酶切片段的自身环化,实现工程目标,应选用限制酶__________和__________同时切割质粒和外源DNA。
正确答案
HindⅢ和PstⅠ
解析
如果只用PstⅠ酶切割质粒和目的基因,由于质粒或目的基因都拥有两个相同的末端,容易发生自身环化,难以形成重组质粒。
考查方向
本题考查基因工程的工具、过程等生命科学基础知识和原理。运用生命科学基础知识设计实验、分析实验结果。考查从文字、图表中获取有效信息,应用生命科学专业术语表达思维过程。在近年上海高考试题出现频率较高。
易错点
1、混淆同种限制酶切割目的基因与不同种限制酶切割目的基因的区别。
知识点
下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程。
图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因;BamHI位点酶切是一种限制酶;A、B是含有特定抗生素的培养基。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了筛选出运载体导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌(受体细胞),首先将大肠杆菌培养在通用培养基上,再将其菌落原位转移到A、B培养基上培养(如图中④),得到如图结果:黑点表示菌落,A中空圈表示B的菌落在A中不能生长的位置。据此分析并回答:
(1)“pBR322”的化学本质是_______,在自然情况下可通过 ________过程进行扩增。
(2)左图中过程①表示的获得目的基因的方法是___,过程②中DNA连接酶的作用是___ 。过程③是 ________ 。
(3)根据用途,左图中A、B所用培养基属于 _______ 。所需大肠杆菌的菌落位于______上(选填“A”或“B”),理由是_______。
(4)基因工程的理论基础是中心法则,根据右图遗传信息表达可用公式(图解)表示为_______。
(5)若氨基酸的平均相对分子质量为128,则右图中以③片段为模板合成的①的相对分子质量为_______。
(6)下列是几种搭配的密码子,据此推断右图中合成的多肽,其前三个搭配的种类(按前后顺序排列)__ __。[甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU)]
正确答案
(1) DNA 自我复制
(2)从生物体细胞中分离 将目的基因与运载体结合形成重组DNA 将重组质粒导入受体细胞
(3)选择培养基 B 导入目的基因后四环素抗性基因被破坏,重组质粒中应该只含氨苄青霉素抗性基因,所以能在B存活但不能在A存活的说明含有重组质粒(合理即可)
(4)
(5) 458
(6)甲硫氨酸、丙氨酸、丝氨酸
解析
略
知识点
下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是 ( )
正确答案
解析
略
知识点
进行生物工程设计时,下表各组所选择的常用实验材料与实验目的配置错误的是 ( )
正确答案
解析
略
知识点
科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是________。该过程所依据的碱基互补配对原则是________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的?________________________。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:
①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。
②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落,而在培养基B上能生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的________,即目的基因插入了________中。
③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落,则使用限图2中的制酶a的切点是________。
正确答案
(1)逆转录酶; A→T、U→A、G→C、C→G
(2)垂体细胞
(3)①切点3或切点4或切点5; 抗四环素基因
②切点1 ;抗氨芐青霉素基因
③切点2
解析
略
知识点
56. 回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
纤维素分子因为分子量大,不能直接进入酵母细胞,并且酵母菌无法分解环境中的纤维素。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精,科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞。其所用质粒及其酶切位点如图甲,外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙,根据要求回答以下问题:
作用于右图a位置的酶有__________(多选)
正确答案
BCD
解析
a是DNA分子中磷酸二酯键所在位置,DNA解旋酶作用于氢键即b处,所以A有误;DNA连接酶将目的基因与质粒链接、DNA聚合酶在DNA复制时发挥作用,都形成磷酸二酯键;限制酶在切割质粒与目的基因时伴随着磷酸二酯键的断开,所以B、C、D正确。
易错点
1、混淆同种限制酶切割目的基因与不同种限制酶切割目的基因的区别。
知识点
扫码查看完整答案与解析