热门试卷

β-葡萄糖苷酶是微生物细胞分泌的一种纤维素酶，可催化纤维二糖水解为葡萄糖。已知在β-葡萄糖苷酶的催化下七叶苷分解产生的七叶素可与柠檬酸高铁铵反应形成黑色化合物，该反应在培养基中产生的黑色圈可用来鉴定菌种。研究人员欲从土样中分离筛选出产β-葡萄糖苷酶的菌株，并对该酶的特性进行相关的实验研究。

请分析并回答：

（1）富集与筛选：将适量土样放入液体培养基中，37℃摇床震荡培养。为获得单菌落，可将上述菌液经        后接种到固体培养基上。要想鉴定筛选的菌株，需在培养基中额外添加        。实验结果如下表：

注：“+”的多少代表颜色的深浅

由表中结果分析，菌种        为最适菌种，理由是        。

（2）酶学特性研究：

①酶液的粗提取：将筛选出的菌种进行培养，培养液中的酵母膏和蛋白胨可为菌种提

供        。培养一段时间后，要从培养液中分离得到β-葡萄糖苷酶，可采用

的方法对培养液进行处理，得到的        即为粗提取的酶液。

②测定酶的酸碱稳定性：β-葡萄糖苷酶催化的化学反应速率可以通过测定         来表示。不同pH缓冲液中加入粗酶液后，在最适温度下保温1小时后测得实验结果如下：

分析可知，pH范围在        时，酶的pH稳定性达80%以上，比较酸性和碱性环境对该酶的影响可知，此酶对        环境耐受性较差。

31.（8 分）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。

为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是____（填序号）。

①酒精灯  ②培养皿  ③显微镜  ④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是____。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是 ____。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见上图）。 图中降解圈大小与纤维素酶的____有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是____（填图中序号）。

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4，在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株    更适合用于人工瘤胃发酵，理是____。

31.现有一种细菌 M ， 能够合成某种酶， 并能分泌到细胞外。 为了研究其培养时间与

细胞数、 细胞外酶浓度和总酶浓度的变化关系， 请根据以下提供的实验材料写出实验思路，

并预测实验结果。

实验材料： 若干个培养瓶、 培养液、 细菌 M

（要求与说明： 实验仅设一组； 实验仪器、 试剂、 用具及操作不做要求； 实验条件适宜）

请回答：

（ 1 ） 实验思路：

①

（ 2 ） 预测实验结果（设计一个坐标系， 并绘制预测的细胞数、 细胞外酶浓度和总酶浓度的

变化曲线）；

（ 3 ） 测定总酶浓度时， 应对细胞做 _________ 处理。