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1 简答题 · 8 分

请回答基因工程方面的有关问题:

(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。  图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。

①第1组:_______;  ②第2组:_______。

(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能,这是因为_______。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对),请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

1 简答题 · 10 分

克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR 技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。

请回答:

(1)图中重组细胞的细胞核来自         细胞,早期胚胎移入受体子宫后继续发育,经桑椹胚、囊胚和        胚最终发育为克隆猪。

(2)在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数,进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数,从而反映出Bcl-2 基因的转录水平。

①图中X 表示                过程。

②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成         用于PCR 扩增,PCR 扩增过程第一轮循环的模板是               。

1 填空题 · 15 分

花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。

用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题:

(1)过程①所需的酶是                                          。

(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的               存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是            。原生质体经过              再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和                   植株的根尖,通过            、            、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR 扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有                  。

(6)对杂种植株进行                 接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

1 单选题 · 6 分

关于高中生物学实验的基本原理,叙述不正确的是

A噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统

B提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异

C成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透(过)性

DPCR呈指数扩增DNA片段是为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板

1 简答题 · 12 分

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:

一,.利用大肠杆菌表达BglB酶

(1)PCR扩增bglB基因时,选用         基因组DNA作模板。

(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入            和           不同限制酶的识别序列。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为                        。

二,.温度对BglB酶活性的影响

(4)据图1、2可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会              ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在              (单选)。

a,50℃

b,60℃

c,70℃

d,80℃

三,.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中             (多选)。

A.仅针对bglB基因进行诱变    

B.bglB基因产生了定向突变

C.bglB基因可快速累积突变     

D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

1 多选题 · 6 分

新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是

APCR技术——扩增蛋白质

B杂交瘤技术——制备单克隆抗体

C光学显微镜——观察叶绿体的基粒

D花粉离体培养——培育单倍体植物

1 单选题 · 4 分

3.关于DNA的实验,叙述正确的是(    )

A用兔的成熟红细胞可提取DNA.

BPCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步

CDNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物

D用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色

1 简答题 · 12 分

玉米是重要的粮食作物,经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:

(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时,该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用________法或稀释涂布平板法计数。

(2)玉米胚芽油不易挥发,宜选用________法或________法从玉米胚芽中提取。

(3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用,从而降低生产成本。

(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时,需用耐高温的________催化。PCR一般要经历三十次以上的循环,每次循环包括变性、________和________三步。

1 填空题 · 16 分

地中海贫血症属于常染色体遗传病。一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿,分析发现,患儿血红蛋白β链第39位氨基酸的编码序列发生了突变(C→T)。用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l,突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s;但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切,如图11(a)。目前患儿母亲再次怀孕,并接受了产权基因诊断。家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图见图11(b)。(终止密码子为UAA、UAG、UGA。)

(1)在获得单链模板的方式上,PCR扩增与体内DNA复制不同,前者通过__________解开双链,后者通过________解开双链。

(2)据图分析,胎儿的基因型是_______(基因用A、a表示)。患儿患病可能的原因是_________的原始生殖细胞通过_______________过程产生配子时,发生了基因突变;从基因表达水平分析,其患病是由于_____________。

(3)研究者在另一种贫血症的一位患者β链基因中检测到一个新的突变位点,该突变导致β链第102位的天冬酰胺替换为苏氨酸。如果____________,但____________,则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有力证据。

1 简答题 · 3 分

23.下列关于实验现象与结果的分析,错误的是(   )

A.组织切片上滴加苏丹Ⅲ染液,显微观察有橘黄色颗粒说明有脂肪

B.组织样液中滴加斐林试剂,不产生砖红色沉淀说明没有还原糖

C.洋葱表皮细胞滴加蔗糖溶液后,发生质壁分离说明细胞有活性

D.PCR 产物中加入二苯胺试剂,加热变蓝说明有目的 DNA 产生

下一知识点 : 用DNA片段进行PCR扩增
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