热门试卷

请回答基因工程方面的有关问题：

（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。  图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：_______；  ②第2组：_______。

（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能，这是因为_______。

（4）用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR 技术可以检测该基因转录水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。

请回答：

（1）图中重组细胞的细胞核来自         细胞，早期胚胎移入受体子宫后继续发育，经桑椹胚、囊胚和        胚最终发育为克隆猪。

（2）在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数，进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数，从而反映出Bcl-2 基因的转录水平。

①图中X 表示                过程。

②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成         用于PCR 扩增，PCR 扩增过程第一轮循环的模板是               。

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

一，.利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用         基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入            和           不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为                        。

二，.温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会              ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在              （单选）。

a，50℃

b，60℃

c，70℃

d，80℃

三，.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中             （多选）。

A.仅针对bglB基因进行诱变    

B.bglB基因产生了定向突变

C.bglB基因可快速累积突变     

D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用________法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用________法或________法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的________催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、________和________三步。