热门试卷

甲型血友病患者血液中因缺乏凝血因子Ⅷ常发生出血不止的现象，危及患者生命，而救治的主要措施就是给他输入凝血因子Ⅷ．运用基因工程及胚胎工程知识回答与凝血因子Ⅷ的生产相关的问题．

（1）基因工程中培养能产生人凝血因子Ⅷ的转基因羊时，科学家将人凝血因子Ⅷ的基因与羊乳腺蛋白基因的______等调控组件重组在一起，通过______方法，导入羊的受精卵中．

（2）在制作受精卵时，活体采卵前要先用______对母羊进行处理，促进其多排卵．在受精前，要对精子进行获能处理，常用的方法有培养法和______．

（3）完成体外受精后，受精卵还要进行体外培养，培养液的主要成分除无机盐和有机盐外，还需添加______等营养成分，以及______等物质．

（4）为提高转基因羊的繁育效率，常采用______的方法获得多个相同的胚胎．

（5）培育成功的转基因羊在性成熟后，就可形成一个以乳腺为基础的人凝血因子Ⅷ发生器，请写出乳腺细胞中人凝血因子Ⅷ基因表达的全过程：______最后从羊奶中分离出人凝血因子Ⅷ，再进一步加工生产，满足临床需要．

科研人员以酵母菌为受体细胞，通过转基因技术研究水稻某种病毒的蛋白P与水稻蛋白的相互作用．

（1）实验所用的缺陷型酵母菌不能合成组氨酸、色氨酸和亮氨酸，培养时在培养基中需添加上述氨基酸，为酵母菌细胞内______上合成______提供原料．

（2）将蛋白P基因与质粒K（具有色氨酸合成基因及BD蛋白合成基因）连接，构建重组质粒K．将重组质粒K导入缺陷型酵母菌，用不含______的培养基筛选转化的酵母菌获得菌落，从这些菌落中可筛选得到基因成功______BD-P蛋白的酵母菌A．

（3）为研究蛋白P能够和哪些水稻蛋白发生相互作用，科研人员提取水稻细胞的mRNA，在______酶作用下获得cDNA，再与质粒T（具有亮氨酸合成基因及AD蛋白合成基因）连接形成重组质粒T，构建水稻cDNA文库．

（4）在酵母菌细胞内，组氨酸合成基因的转录受到调控，如下图所示．若被测的水稻蛋白能与病毒蛋白P发生相互作用，BD、AD两个蛋白充分接近时，______才能催化组氨酸合成基因转录．

（5）将酵母菌A分别接种到不含组氨酸和不含亮氨酸的培养基中，以确定转入重组质粒K后酵母菌A______．取水稻cDNA文库的多个重组质粒T分别转化到酵母菌A中，将转化产物接种在不含______的培养基中培养，获得了分散的多个单菌落．经检测这些酵母菌中含有4种水稻蛋白，表明这4种水稻蛋白能够______．

（6）研究发现，这4种水稻蛋白都是水稻不同代谢过程中的关键酶，推测该病毒引起水稻出现各种病症的原因之一可能是______．

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题．

资料1：巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5′AOX1和3′AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子]．

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达．

（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______、______限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化．

（2）酶切获取HBsAg基因后，需用______将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取______．

（3）步骤3中应选用限制酶______来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞．

（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用______方法进行检测．

（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达．

（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行______并分泌到细胞外，便于提取．

Ⅰ．回答下列问题：

（1）对于基因工程来说，其核心是______；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是______．

（2）植物体细胞杂交过程有两个关键，一个是在把植物细胞杂交之前，必须______

；另外一个是______．

（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是______；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、______等．

（4）胚胎干细胞在功能上具有发育的______性，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生______．

如图一是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．

（1）①过程是______场所在______．②过程是______ 需要得酶是______．

（2）⑤代表______ 技术，④过程需要的酶是______，该酶的特点是______．

（3）⑧过程中用______ （药剂）处理D使之更容易吸收C．

（4）如图二是运载体和胰岛素基因的某个片段，已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-．GeneⅠ和GeneⅡ为标记基因，根据图示，判断下列操作正确的是______．

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割   B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割             D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

（5）人的基因能和异种生物的基因拼接在一起，是因为______．人胰岛素基因能在大肠杆菌种表达是因为人和大肠杆菌共用______．

（6）检测大肠杆菌是否转录人胰岛素基因用______ 技术．大肠杆菌是否合成胰岛素，检测方法是______．

随着生物科技的不断发展，人们可以获得很多非常需要的生物新品种或新产品．请据图回答下列问题：

（1）在培育转生长激素基因牛过程中，②过程常用的方法是______，早期的基因工程都用原核细胞作为受体细胞的原因是______．（至少2点）

（2）转生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有______，其作用是能够被______识别并结合从而启动转录．

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体可能是______细胞，Ⅲ代表的细胞具有______的特点．

（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______．⑤过程培养基中需要加入一定的营养和______．

长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展．目前，随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟，为培育抗病香蕉品种开辟了新途径．转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点．请回答：

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶______，对______进行切割．

（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有______，作为标记基因．

（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：______ （填字母序号）．

A启动子   B终止子  C 复制原点   D标记基因

（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为______．

（5）欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术______（填字母序号）．

A．核酸分子杂交        B．基因序列分析    C．抗原-抗体杂交   D．PCR

（6）利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株．香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有______ 等植物激素，它们会在______（填图中标号）阶段发挥作用，同时______（填图中标号）阶段还需要给予一定光照．

（7）从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中，需经过______．（填数字）

①无丝分裂    ②有丝分裂   ③减数分裂   ④原代培养   ⑤传代培养

⑥植物体细胞杂交   ⑦细胞融合     ⑧脱分化      ⑨再分化

回答下列关于基因工程和胚胎工程方面的问题．

（1）科学家在1992年克隆出了GFP基因，随后马丁•沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功．之后，会发光的鼠、猪、兔、蝌蚪、鱼也相继问世．图2是转基因绿色荧光鼠的培育过程：

①图2中的目的基因是______，基因表达载体构建除了需要目的基因外，还需要______、______和______．过程②常用的方法是______．

②基因表达载体是否导入受体细胞可以通过检测______进行确认．目的基因是否表达可以通过进行______确认．

③图中④过程用到______技术．

（2）图1是科学家培育试管转基因牛的过程示意图，据图回答下列问题．

①过程①通常用______处理，可达到超数排卵的目的．

②图中1是______，2是______．

③过程③进行时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行______处理．③过程若要同时产生多个相同的转基因牛通常用到的技术是______．

④为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定，写出两种鉴别早期胚胎性别的方法______、______．

现代生物技术和应用．

干扰素是治疗癌症的重要物质，人血液中只能提取微量的干扰素，因而价格昂贵．利用生物工程可获得价格低廉、药性一样的干扰素．

（1）直接从人的淋巴细胞提取能指导干扰素合成的______，并使之与质粒的DNA结合．

（2）如图一是形成重组质粒的操作过程．其中工具A、C名称分别是______、______．

（3）图二表示切割基因分子的过程，图中可知，该酶能识别的碱基序列和切点是______

A．CTTAAG，切点在C和T之间                 B．CTTAAG，切点在G和A之间

C．GAATTC，切点在G和A之间                D．GAATTC，切点在C和T之间．