热门试卷

解：（1）动物细胞培养需要无菌、无毒的条件：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．

（2）PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，利用该技术可以大量扩增目的基因．获取目的基因后，将目的基因与逆转录病毒结合形成目的基因表达载体，然后将其导入人体的体细胞，诱导形成iPS细胞．

（3）人体红细胞是由造血干细胞分化而来的，所以要治疗镰刀型细胞贫血症，需要诱导iPS细胞定向分化成造血干细胞，移植入患者体内，使患者能够产生正常的红细胞．异体移植可能会发生免疫排斥反应，而该技术是自体移植，不会发生免疫排斥反应．

故答案：（1）抗生素  

（2）PCR      目的基因表达载体

（3）造血干细胞      避免免疫排斥

解：

（1）在体外，人工以RNA为模板合成DNA的过程成为反转录．构建重组质粒时需要DNA连接酶连接目的基因和运载体的末端．

（2）常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．

（3）将目的基因导人微生物细胞时，用Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合（在缓冲液中）→一定温度下，感受态细胞吸收DNA分子，完成转化．

（4）目的基因的检测与鉴定，常用基因探针--用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段．Ⅰ、分子水平上的检测  

  ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术

  ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术

  ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术

Ⅱ、个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

故答案为：

（1）反转录         DNA连接酶

（2）λ噬菌体的衍生物    动植物病毒

（3）钙离子

（4）标记基因   H5N1病毒蛋白的基因     抗原-抗体杂交技术

解：（1）PCR技术能在短时间内大量扩增目的基因（野生型蓝藻的chlL基因）．由图可知，目的基因插入质粒pUC118后，lacZ基因被破坏，因此导入重组质粒1的细菌在含有半乳糖的平板上，形成白色菌落．

（2）野生型蓝藻不含红霉素抗性基因，而突变型蓝藻含有红霉素抗性基因，所以将野生型蓝藻和突变型蓝藻分别放在含有红霉素的液体培养基中培养时，野生型蓝藻会死亡；而在不含红霉素的液体培养基中分别培养时，出现野生型蓝藻与突变型蓝藻生长情况相同的现象，这才能说明突变型蓝藻chlL基因的部分片段缺失不影响其正常的生长繁殖．

（3）由表格可知，野生型蓝藻在光下培养和在黑暗中培养时，叶绿素的含量相差不大，而突变型蓝藻蓝藻在光下培养和在黑暗中培养时，叶绿素的含量相差很大，说明蓝藻的chlL基因调控的是叶绿素不依赖光的合成途径．

故答案：（1）PCR（或：聚合酶链式反应）    白

（2）死亡（不生长）        野生型蓝藻与突变型蓝藻生长情况相同

（3）蓝藻的chlL基因调控的是叶绿素不依赖光的合成途径（或：蓝藻的chlL基因缺失会阻挡叶绿素不依赖光的合成途径）

解：（1）③取核与未受精的卵细胞去核后形成④应用了核移植技术，图中荷斯坦奶牛组织分散成单个细胞可采用动物细胞培养技术，未受精的卵细胞需要培养到减数第二次分裂中才可以去核．

（2）图中显示将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，则血清白蛋白是基因工程的产物，即②为目的基因．基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．此过程需要限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体等工具．将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术．

（3）用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织分散成单个细胞，由于卵细胞大易操作、分化程度低，体细胞的细胞核在卵细胞质中才能表现出全能性，所以常用卵细胞做受体细胞．

（4）进行胚胎移植时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．

（5）因为个体⑦的核遗传物质来自荷斯坦奶牛，⑥只是为胚胎发育提供营养和场所，⑦并没有获得⑥的遗传信息，因此⑦的遗传性状和荷斯坦奶牛相似．目的基因，数目太少，可以通过PCR扩增技术，可以在短时间内大量扩增目的基因．利用牛的乳汁生产血清白蛋白，要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求⑦应该是雌性，即性染色体组成为XX．

（6）用转基因动物生产药物，具有可以节约资源，降低成本等优点．转基因动物进入泌乳期后，可通过分泌乳汁来生产人类所需药物，称为乳腺（房）生物反应器．

故答案为：

（1）核移植技术、动物细胞培养

（2）目的基因    限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体    显微注射法

（3）胰蛋白酶        卵细胞大易操作、分化程度低，体细胞的细胞核在卵细胞质中才能表现出全能性

（4）B     桑椹胚或囊胚

（5）荷斯坦奶牛   因为个体⑦的核遗传物质来自荷斯坦奶牛，⑥只是为胚胎发育提供营养和场所，⑦并没有获得⑥的遗传信息   PCR技术      XX

（6）节约资源，降低成本等   乳腺（房）生物反应器

解：（1）用同一种 限制酶处理油菜Tn基因和质粒能够使两者具有相同的粘性本端，过程A形成重组DNA需要的重要酶是 DNA连接酶．

（2）图1中①应为重组质粒，含有标记基因抗生素Kan抗性基因，若②不能在含抗生素Kan的培养基上生长，则原因是重组质粒未导入．

（3）拟南芥T基因控制其种皮深褐色，如转基因生物的种皮颜色为深褐色，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同．

（4）UGA、UAA为终止密码子，Tn基因的mRNA末端序列为“-AGCGCGACCAGACUCUAA”，它是t基因的mRNA的UGA变成了AGA，所以t基因的mRNA的末端序列应为“-AGCGCGACCUGA”．所以Tn基因比t基因编码的蛋白质中就多AGA和CUC对应的2个氨基酸．

（5）所有生物都共用一套密码子表，则Tn基因能够在油菜和拟南芥中表达出相同蛋白质．

（6）用含重组DNA的农杆菌感染拟南芥的受精卵，则所有细胞都含有Tn基因．

故答案为：

（1）限制酶（答限制性核酸内切酶也得分）    DNA连接酶

（2）抗生素Kan

（3）深褐色

（4）多了2个

（5）所有生物都共用一套密码子表

（6）受精卵（答卵细胞也得分）

解：（1）①过程是基因表达载体的构建，此过程需要限制酶和DNA连接酶，②过程是将目的基因导入受体细胞中，常选取受精卵作为受体细胞．③过程将重组细胞需要早期胚胎培养（或动物细胞培养）到桑葚胚期或囊胚期，再通过胚胎移植到受体母牛子宫内发育．

（2）在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须有RNA聚合酶识别和结合的部位，才有利于目的基因表达．经检验，转基因牛的乳汁中含有人的生长激素，这说明目的基因在转基因牛体内已经表达产生目的基因产物了．

（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，由于Ⅲ可以产生单克隆抗体，因此Ⅲ是既能产生特定抗体，又能无限增殖

的杂交瘤细胞．据图中信息可知，将prG导入到Ⅱ中经过筛选后可得到杂交瘤细胞，可推知II最可能是已免疫的B淋巴（或浆细胞）细胞．

（4）受体细胞是植物细胞，常用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞中．要确定抗虫基因是否导入受体细胞，通过DNA分子杂交技术进行检测，⑤过程是将细胞发育成完整的个体，所依据的原理是植物细胞的全能性．

故答案为：

（1）限制酶、DNA连接酶    受精卵     早期胚胎培养（或动物细胞培养）、胚胎移植

（2）RNA聚合酶    表达

（3）已免疫的B淋巴（或浆细胞）     既能产生特定抗体，又能无限增殖

（4）农杆菌转化法      DNA分子杂交    植物细胞的全能性

解：（1）利用目的基因扩增新的基因片段，PCR方法是用技术，基本原理DNA的复制．方法是利用目的基因为模板、四种脱氧核苷酸为原料、ATP提供能量、酶是耐高温的DNA聚合酶．故最佳方案的D．

（2）基因的表达表达过程：DNA mRNA 蛋白质，故答案为Bt基因 mRNA 原毒素（晶体蛋白）．

（3）动物基因工程的受体是受精卵，因为受精卵具有全能性．检测细胞是否成功的标志，就是看有没有产生目的基的产物蛋白质，中棉花细胞中检测出Bt基因合成杀虫晶体蛋白是培育成功的标志．

故答案为：

（1）D

（2）Bt基因 mRNA 原毒素（晶体蛋白）

（3）受精卵　动物乳汁中含此种抗体

解：（1）若要构建重组质粒，一般要用同一种限制酶进行切割，形成相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接．因此在目的基因和质粒上必须存在同一种限制酶的切割位点，需要对目的基因进行测序，以确定选用何种酶．限制酶的作用的部位是磷酸二酯键．

（2）若用EcoRI酶对目的基因和质粒进行酶切，再用DNA连接酶处理，则由两个DNA片段连接形成的产物有3种：重组质粒、目的基因与目的基因连接物、载体和载体连接物．由于EcoRI酶的识别位点刚好在四环素抗性基因上，因此重组质粒中，该抗性基因已经被破坏，而目的基因与目的基因连接物上没有该基因，只有载体和载体连接物上把两个切割后的四环素抗性基因进行拼接形成两个完整的四环素抗性基因．

（3）为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用EcoRI和BamHI两种酶同时切割目的基因和质粒．由于这两种酶能切割形成不同的黏性末端，使得目的基因与目的基因、载体和载体之间无法连接，而目的基因和质粒却能够连接．

（4）核糖体由蛋白质和rRNA构成，可以利用酶的专一性用蛋白酶将蛋白质水解，从而提纯rRNA，A正确；无水乙醇可以溶解所有光合色素，没有利用生物分子间的特异性结合，B错误；分子杂交手段是利用了碱基互补配对的原则，C正确；抑制成熟基因的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA之间发生了碱基互补配对，也利用了分子间特异性结合，D正确．

（5）从变异的角度看，基因工程的原理是基因重组；而植物细胞杂交的原理是染色体变异．

故答案为：

（1）限制性DNA内切酶      磷酸二酯键

（2）3     载体和载体连接物

（3）EcoRI、BamHI

（4）ACD

（5）基因重组   染色体变异

解：（1）与传统育种方法相比，基因工程育种能克服远缘杂交不亲和的障碍．因为不同生物遗传信息的传递方式相同，且自然界中所有生物共用一套遗传密码子，所以细菌的毒蛋白基因（Bt）能够在棉花植株体内成功表达．

（2）将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法，即从细菌中获取毒蛋白基因（Bt）后，用DNA连接酶将毒蛋白基因和Ti质粒连接成重组质粒，先导入土壤农杆菌中，然后用它去侵染离体的棉花叶片组织，最后再采用植物组织培养技术将含有目的基因的受体细胞培育成抗虫棉．

（3）让这些抗虫棉与普通棉进行杂交，统计子代植株中抗虫棉与普通棉之间的比例．

①若两个Bt基因整合于染色体上的位置如甲图所示，则后代中全为抗虫棉；

②若两个Bt基因整合于染色体上的位置如乙图所示，则后代中抗虫棉与普通棉之比为1：1；

③若两个Bt基因整合于染色体上的位置如丙图所示，后代中抗虫棉与普通棉之比为3：1．

（4）假设这两个Bt基因整合于染色体上的位置如丙图所示，用A+表示染色体上有Bt基因，A-表示没有Bt基因（A+与A-不是显隐性关系），则抗虫棉的基因型为A+A-A+A-，普通棉的基因型A-A-A-A-，抗虫棉与普通棉杂交的遗传图解如图：

故答案为：

（1）克服了远缘亲本难以杂交的不足   遗传信息的传递方式相同

（2）土壤农杆菌     植物组织培养（或脱分化和再分化）

（3）①全为抗虫棉    ②抗虫棉与普通棉之比为1：1    ③抗虫棉与普通棉之比为3：1

（4）遗传图解：