- 基因工程的基本操作程序
- 共6244题
（1）过程①采用的方法是______，进行过程②之前需用特定的______处理目的基因和质粒．
（2）过程③需首先对大肠杆菌用______处理，使其处于感受态，然后进行转化．转化的具体操作方法是______．
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是______，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入______．
（4）过程⑤一般是将生长激素基因导入奶牛的______．为保证目的基因只在乳腺中表达，在构建重组质粒时，需将人的生长激素基因与______等调控组件重组在一起．
正确答案
解：（1）过程①是利用mRNA合成DNA，采用的方法是反转录，进行过程②之前需用特定的限制酶处理目的基因和质粒，产生相同的末端．
（2）过程③需首先对大肠杆菌用Ca2+处理，使其处于感受态，然后进行转化．转化的具体操作方法是将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子．
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是胰蛋白酶，使动物细胞相互分散开来，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入动物血清．
（4）过程⑤一般是将生长激素基因导入奶牛的受精卵．为保证目的基因只在乳腺中表达，在构建重组质粒时，需将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．
故答案为：
（1）反转录 限制酶
（2）Ca2+ 将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子
（3）胰蛋白酶（胶原蛋白酶） 动物血清
（4）受精卵 乳腺蛋白基因的启动子
解析
解：（1）过程①是利用mRNA合成DNA，采用的方法是反转录，进行过程②之前需用特定的限制酶处理目的基因和质粒，产生相同的末端．
（2）过程③需首先对大肠杆菌用Ca2+处理，使其处于感受态，然后进行转化．转化的具体操作方法是将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子．
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是胰蛋白酶，使动物细胞相互分散开来，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入动物血清．
（4）过程⑤一般是将生长激素基因导入奶牛的受精卵．为保证目的基因只在乳腺中表达，在构建重组质粒时，需将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．
故答案为：
（1）反转录 限制酶
（2）Ca2+ 将重组质粒溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子
（3）胰蛋白酶（胶原蛋白酶） 动物血清
（4）受精卵 乳腺蛋白基因的启动子
科学工作者通过蒸因工程创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域．请回答：
（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从______（基因组/c DNA）文库中获取，并与______等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成表达载体；再通过______方法，将表达载体导入羊的______，获得重组细胞．
（2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过处理的受体母羊子宫内．因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加______．若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”可将早期胚胎进行______处理．
（3）若所得到的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该采用______技术来检测．
正确答案
解：（1）目的基因可以从基因文库中获取，基因组文库中基因含有启动子和内含子，而cDNA文库中不含有．要使羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，所以目的基因需要从cDNA文库中获取，并且要连上羊的乳腺蛋白基因的启动子，和载体构建成基因表达载体，通过显微注射的方法导入羊的受精卵中．
（2）早期胚胎培养时，培养液中需要添加动物血清、血浆等天然成分．要获得两头转基因“蜘蛛羊”，可以采用胚胎分割技术．早期胚胎移植时，需要对受体做同期发情处理，这样为供体的胚胎移入受体相同的生理环境．
（3）目的基因的检测与表达中，如果表达载体已经进入受体细胞，但没有检测蛛丝蛋白，则需要采用DNA分子杂交的方法，先检测蛛丝蛋白基因是否整合到羊的染色体，如果整合上了，就要继续采用分子杂交的方法，检测蛛丝蛋白基因是否转录出蛛丝蛋白的mRNA．
故答案为：
（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵
（2）同期发情 动物血清（动物血浆） 胚胎分割（胚胎分割移植）
（3）分子杂交
解析
解：（1）目的基因可以从基因文库中获取，基因组文库中基因含有启动子和内含子，而cDNA文库中不含有．要使羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，所以目的基因需要从cDNA文库中获取，并且要连上羊的乳腺蛋白基因的启动子，和载体构建成基因表达载体，通过显微注射的方法导入羊的受精卵中．
（2）早期胚胎培养时，培养液中需要添加动物血清、血浆等天然成分．要获得两头转基因“蜘蛛羊”，可以采用胚胎分割技术．早期胚胎移植时，需要对受体做同期发情处理，这样为供体的胚胎移入受体相同的生理环境．
（3）目的基因的检测与表达中，如果表达载体已经进入受体细胞，但没有检测蛛丝蛋白，则需要采用DNA分子杂交的方法，先检测蛛丝蛋白基因是否整合到羊的染色体，如果整合上了，就要继续采用分子杂交的方法，检测蛛丝蛋白基因是否转录出蛛丝蛋白的mRNA．
故答案为：
（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵
（2）同期发情 动物血清（动物血浆） 胚胎分割（胚胎分割移植）
（3）分子杂交
[生物一现代生物科技专题]必答题
血管内皮生长因子（VE．GF）能促进眼部视网膜随管的病理性生长．临床上可用VEGF抗体的Fab片段（即抗体的活性片段）作为药物治疗视网膜病变．以下是利用大肠杆菌来大量和合成该抗体片段的技术路线图，请回答下关问题：
（1）科学家已经测出VEGF的抗体Fab片段的氨基酸序列，因此可以通过______方法来获取目的基因．获取目的基因后，还需要在其两端加上限制酶HindIII和XhoI识别序列和启动子T7等序列，T7的位置应该在______（填l/2/3/4）．
（2）大肠杼菌经Ca2+处理，成为______细胞，能吸收外源DNA，与重组质粒混合一段时间后培养，培养基需添加______以筛选目的菌株．将筛选出的大肠杆菌进行扩大培养，可以用______作为抗原与提取出的蛋白杂交来鉴定是否合成抗体Fab片段蛋白．
正确答案
解：（1）科学家已经测出VEGF的抗体Fab片段的氨基酸序列，因此可以通过人工合成法来获取目的基因，即根据Fab片段的氨基酸序列推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成．获取目的基因后，还需要在其两端加上限制酶HindIII和XhoI识别序列和启动子T7等序列，启动子应位于目的基因上游，且不能被限制酶切割去除，因此T7的位置应该在图中的2处．
（2）大肠杼菌经Ca2+处理，成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞；由图可知，构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而卡那霉素抗性基因没有被破坏，因此在培养基需添加卡那霉素以筛选目的菌株．将筛选出的大肠杆菌进行扩大培养，可以用血管内皮生长因子（VEGF）作为抗原与提取出的蛋白杂交来鉴定是否合成抗体Fab片段蛋白．
故答案为：
（1）人工合成法 2
（2）感受态 卡那霉素 血管内皮生长因子（VEGF）
解析
解：（1）科学家已经测出VEGF的抗体Fab片段的氨基酸序列，因此可以通过人工合成法来获取目的基因，即根据Fab片段的氨基酸序列推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成．获取目的基因后，还需要在其两端加上限制酶HindIII和XhoI识别序列和启动子T7等序列，启动子应位于目的基因上游，且不能被限制酶切割去除，因此T7的位置应该在图中的2处．
（2）大肠杼菌经Ca2+处理，成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞；由图可知，构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而卡那霉素抗性基因没有被破坏，因此在培养基需添加卡那霉素以筛选目的菌株．将筛选出的大肠杆菌进行扩大培养，可以用血管内皮生长因子（VEGF）作为抗原与提取出的蛋白杂交来鉴定是否合成抗体Fab片段蛋白．
故答案为：
（1）人工合成法 2
（2）感受态 卡那霉素 血管内皮生长因子（VEGF）
如图所示是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解，请据图回答下列问题．
（1）图中②所示的结构是______．
（2）图中③、④所示的生物工程技术分别是______．
（3）过程③通常用去核卵细胞做受体细胞的原因除了它体积大、易操作外，还因为______．
（4）过程④的完成需要用到的基因操作工具除了限制性核酸内切酶外，还需要______．
（5）对重组细胞b进行定向诱导分化是否成功的标志是______．
正确答案
解：（1）由以上分析可知：囊胚中含有内细胞团和滋养层细胞，其中内细胞团具有发育的全能性，作为基因工程的受体细胞，因此图中②是内细胞团．
（2）由以上分析可知：图中③将体细胞的核移植到去核的卵细胞中，表示核移植技术；④将健康胰岛β细胞基因导入受体细胞中，表示基因工程技术．
（3）细胞核移植过程汇总，通常用去核的卵细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它营养物质丰富且能为早期胚胎发育提供养料；含有促进细胞核全能性表达的物质．
（4）基因工程的工具包括限制酶、DNA连接酶和运载体．
（5）由图可知，重组细胞b被定向诱导分化形成胰岛B细胞，而胰岛B细胞能合成胰岛素，因此对重组细胞b进行定向诱导分化是否成功的标志是否能正常合成胰岛素．
故答案为：
（1）内细胞团
（2）核移植技术 转基因技术
（3）营养物质丰富且能为早期胚胎发育提供养料；含有促进细胞核全能性表达的物质．
（4）DNA连接酶和载体（运载体）
（5）是否能正常合成胰岛素
解析
解：（1）由以上分析可知：囊胚中含有内细胞团和滋养层细胞，其中内细胞团具有发育的全能性，作为基因工程的受体细胞，因此图中②是内细胞团．
（2）由以上分析可知：图中③将体细胞的核移植到去核的卵细胞中，表示核移植技术；④将健康胰岛β细胞基因导入受体细胞中，表示基因工程技术．
（3）细胞核移植过程汇总，通常用去核的卵细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它营养物质丰富且能为早期胚胎发育提供养料；含有促进细胞核全能性表达的物质．
（4）基因工程的工具包括限制酶、DNA连接酶和运载体．
（5）由图可知，重组细胞b被定向诱导分化形成胰岛B细胞，而胰岛B细胞能合成胰岛素，因此对重组细胞b进行定向诱导分化是否成功的标志是否能正常合成胰岛素．
故答案为：
（1）内细胞团
（2）核移植技术 转基因技术
（3）营养物质丰富且能为早期胚胎发育提供养料；含有促进细胞核全能性表达的物质．
（4）DNA连接酶和载体（运载体）
（5）是否能正常合成胰岛素
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列． 现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为
（1）如图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______连接．
（2）若用限制酶Sma玉完全切割图1中DNA片段，产生的末端是______末端，其产物长度为______．
（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有______种不同长度的DNA片段．
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是______． 在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加______的培养基进行培养． 经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是______．
正确答案
解：（1）一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接．
（2）限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG，其切割产生的是平末端．图1中DNA片段含有两个SmaⅠ酶切位点，被SmaⅠ酶完全切割后出现三个长度的片段，分别是537bp、790bp、661bp．
（3）杂合子的基因型为Dd，其中D基因片段有两个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现三个片段长度分别是537bp、790bp、661bp，发生基因突变后的d基因片段只有一个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现两个片段长度分别是1327bp、661bp，所以从杂合子中分离的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成会四种不同的DNA片段．
（4）限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D上，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体．用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因，但不会破坏抗生素B抗性基因，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养．由于同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接，这样会导致部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达．
故答案为：
（1）脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
（2）平 537bp、790bp、661bp
（3）4
（4）BamHⅠ抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接
解析
解：（1）一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接．
（2）限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG，其切割产生的是平末端．图1中DNA片段含有两个SmaⅠ酶切位点，被SmaⅠ酶完全切割后出现三个长度的片段，分别是537bp、790bp、661bp．
（3）杂合子的基因型为Dd，其中D基因片段有两个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现三个片段长度分别是537bp、790bp、661bp，发生基因突变后的d基因片段只有一个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现两个片段长度分别是1327bp、661bp，所以从杂合子中分离的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成会四种不同的DNA片段．
（4）限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D上，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体．用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因，但不会破坏抗生素B抗性基因，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养．由于同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接，这样会导致部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达．
故答案为：
（1）脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
（2）平 537bp、790bp、661bp
（3）4
（4）BamHⅠ抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接
如图所示为农作物新品种的育种方式：
（1）图示育种方式涉及到的生物工程技术有：______．
（2）②③过程分别为：______．
（3）⑤过程中常用的载体是______；⑤过程表示的基因操作步骤是______．
（4）在构建的基因表达载体时，______位于目的基因的首端，是______酶识别和结合的部位．要确定抗虫基因导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，请写出在个体水平上的鉴定过程______．
（5）上述育种与传统杂交育种相比，突出优点是______．
正确答案
解：（1）图中⑤过程涉及到基因工程，①过程为植物体细胞杂交，两者都需要植物组织培养技术的支持．
（2）图中②为脱分化的过程，可获得愈伤组织，然后经过③再分化而得到胚状体．
（3）基因工程中常用的载体为质粒；⑤过程是将目的基因导入到某种植物受体细胞中．
（4）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，作用是驱动基因转录（出mRNA）．要确定抗虫基因导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，可以让害虫侵食棉花的叶子，观察害虫是否死亡．
（5）与传统的杂交育种相比，基因工程育种和植物体细胞杂交育种的优点：打破生殖隔离、实现遗传物质的定向改变、克服了远缘杂交不亲和的障碍，周期短．
故答案为：
（1）基因工程、植物组织培养、植物体细胞杂交
（2）脱分化、再分化
（3）质粒 将目的基因导入受体细胞
（4）启动子RNA聚合酶让害虫侵食棉花的叶子，观察害虫是否死亡
（5）打破生殖隔离、克服了远缘杂交不亲和的障碍，周期短、实现遗传物质的定向改变
解析
解：（1）图中⑤过程涉及到基因工程，①过程为植物体细胞杂交，两者都需要植物组织培养技术的支持．
（2）图中②为脱分化的过程，可获得愈伤组织，然后经过③再分化而得到胚状体．
（3）基因工程中常用的载体为质粒；⑤过程是将目的基因导入到某种植物受体细胞中．
（4）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，作用是驱动基因转录（出mRNA）．要确定抗虫基因导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，可以让害虫侵食棉花的叶子，观察害虫是否死亡．
（5）与传统的杂交育种相比，基因工程育种和植物体细胞杂交育种的优点：打破生殖隔离、实现遗传物质的定向改变、克服了远缘杂交不亲和的障碍，周期短．
故答案为：
（1）基因工程、植物组织培养、植物体细胞杂交
（2）脱分化、再分化
（3）质粒 将目的基因导入受体细胞
（4）启动子RNA聚合酶让害虫侵食棉花的叶子，观察害虫是否死亡
（5）打破生殖隔离、克服了远缘杂交不亲和的障碍，周期短、实现遗传物质的定向改变
金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，降低观赏价值．科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种．请据图回答：
（1）②是______，③是______，形成③所需要的工具酶有______．
（2）经检测，被③侵染的茶花叶片细胞具备了抗病性，这说明②已经______．欲快速培育大量该抗病新品种，应该采用的技术是______，依据的理论基础是______．
（3）通过转基因方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子中是否一定含有抗病基因？______．
正确答案
解：（1）分析图示，②是目的基因，③是重组质粒，形成③所需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶．
（2）经检测，被③重组质粒侵染的茶花叶片细胞具备了抗病性，这说明②目的基因已经表达．欲快速培育大量该抗病新品种，应该采用的技术是植物组织培养，依据的理论基础是植物细胞的全能性．
（3）配子中只含体细胞中一半的染色体，故通过转基因方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案为：
（1）目的基因 重组质粒 限制酶和DNA连接酶
（2）表达 植物组织培养 植物细胞的全能性
（3）不一定
解析
解：（1）分析图示，②是目的基因，③是重组质粒，形成③所需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶．
（2）经检测，被③重组质粒侵染的茶花叶片细胞具备了抗病性，这说明②目的基因已经表达．欲快速培育大量该抗病新品种，应该采用的技术是植物组织培养，依据的理论基础是植物细胞的全能性．
（3）配子中只含体细胞中一半的染色体，故通过转基因方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案为：
（1）目的基因 重组质粒 限制酶和DNA连接酶
（2）表达 植物组织培养 植物细胞的全能性
（3）不一定
回答下列有关遗传信息传递和表达的问题．
（1）如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），那么所形成的重组质粒pZHZ2______．
A．既能被E也能被F切开 B．能被E但不能被F切开
C．既不能被E也不能被F切开 D．能被F但不能被E切开
（2）若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒pZHZ2导入至山羊的______细胞中．若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是______．
（3）上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是______．一般而言，一个核糖体可同时容纳______分子的tRNA．
（4）下列四幅图中能正确反映目的基因转录产物内部结构的是______．
TSS：转录起始位点，TTS：转录终止位点，STC：起始密码子，SPC：终止密码子
正确答案
解：（1）用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确．
（2）将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵作为受体细胞，当受精卵发育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表达产物．重组质粒插入在一条染色体DNA上，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊．
（3）根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA．一般而言，一个核糖体可同时容纳2到3分子的tRNA．
（4）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧．
故答案为：
（1）A
（2）受精卵 转基因山羊间相互交配
（3）UGA 2或3
（4）B
解析
解：（1）用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000对碱基）上相应的E-F区域 （0.2kb），用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故A正确．
（2）将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵作为受体细胞，当受精卵发育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表达产物．重组质粒插入在一条染色体DNA上，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊．
（3）根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA．一般而言，一个核糖体可同时容纳2到3分子的tRNA．
（4）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧．
故答案为：
（1）A
（2）受精卵 转基因山羊间相互交配
（3）UGA 2或3
（4）B
请回答下列关于转基因抗虫棉的相关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具酶是______，它能够识别双链DNA分子的某种______，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的______键断开．
（2）培育过程中构建的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和______．
（3）若检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，方法是______；若检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质，方法是______．
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗，需经过______和______两个过程．
正确答案
解：（1）获取目的基因需要用限制酶，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）该培育过程中构成的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和启动子．
（3）用DNA分子杂交技术检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质．
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗利用了植物组织培养技术，需经过脱分化和再分化两个过程．
故答案为：
（1）限制酶 特定核苷酸序列 磷酸二酯
（2）启动子
（3）DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交
（4）脱分化 再分化
解析
解：（1）获取目的基因需要用限制酶，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开．
（2）该培育过程中构成的重组DNA分子包括复制原点、目的基因、标记基因、终止子和启动子．
（3）用DNA分子杂交技术检测目的基因是否插入到受体细胞的DNA上，用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质．
（4）将已导入目的基因的棉花细胞培育成幼苗利用了植物组织培养技术，需经过脱分化和再分化两个过程．
故答案为：
（1）限制酶 特定核苷酸序列 磷酸二酯
（2）启动子
（3）DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交
（4）脱分化 再分化
下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．
（1）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次．免疫学细胞A在人体主要介导（参与）______ 免疫．
（2）过程①和②得到的Y细胞称为______． 得到的单克隆抗体最主要的优点是______．
（3）④过程需要______酶，⑤过程则需要特定的限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（4）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构是否相同？______为什么？______
（5）如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用______，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过______技术获得能产抗体的转基因棉花植株．
正确答案
解：（1）向健康人体注射特定抗原，提取出A浆细胞（效应B淋巴细胞），在人体参与体液免疫．
（2）过程①至②获取Y细胞称为杂交瘤细胞，得到的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可能大量制备的优点．
（3）④逆转录过程需要逆转录酶，⑤基因表达载体的构建过程则需要特定的限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（4）抗体1与抗体2相同之处是氨基酸的排列顺序，由于抗体2形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程经过内质网和高尔基体的加工，因此形成的空间结构不同．
（5）如果想用棉花产生该种抗体，常用农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞中，则⑥导入受体细胞过程的受体细胞通常选用土壤农杆菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过技术获得能产抗体的转基因棉花植株．
故答案为：
（1）体液
（2）杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备
（3）逆转录
（4）不同 抗体2形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程经过内质网和高尔基体的加工
（5）农杆菌 植物组织培养
解析
解：（1）向健康人体注射特定抗原，提取出A浆细胞（效应B淋巴细胞），在人体参与体液免疫．
（2）过程①至②获取Y细胞称为杂交瘤细胞，得到的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可能大量制备的优点．
（3）④逆转录过程需要逆转录酶，⑤基因表达载体的构建过程则需要特定的限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（4）抗体1与抗体2相同之处是氨基酸的排列顺序，由于抗体2形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程经过内质网和高尔基体的加工，因此形成的空间结构不同．
（5）如果想用棉花产生该种抗体，常用农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞中，则⑥导入受体细胞过程的受体细胞通常选用土壤农杆菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过技术获得能产抗体的转基因棉花植株．
故答案为：
（1）体液
（2）杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备
（3）逆转录
（4）不同 抗体2形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程经过内质网和高尔基体的加工
（5）农杆菌 植物组织培养
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