热门试卷

解：（1）PCR扩增时需要耐高温的热稳定性DNA聚合酶，要将目的基因（人血清白蛋白基因）与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组．

（2）过程②是受精卵需要经过早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，这属于翻译水平的检测，可采用抗原-抗体杂交技术．

（3）将外源基因插入到受体细胞染色体的目的是使外源基因随染色体DNA一起复制、表达．内细胞团细胞具有发育的全能性．

故答案为：

（1）热稳定DNA聚合酶（Taq酶）

（2）早期胚胎培养（动物细胞培养）和胚胎移植   抗原-抗体杂交

（3）使外源基因随染色体DNA一起复制、表达   发育的全能性

解：（1）基因工程中，常用同一种限制酶切割目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接形成重组质粒．通常根据质粒中的标记基因（如抗生素抗性基因）来筛选转化细胞，再进行目的基因等的鉴定．

（2）甲自交后代中，耐高盐：耐中盐：不耐盐=1：2：1，与单基因不完全显性遗传性状的分离比完全相同（即AA：Aa：aa=1：2：1），这说明耐盐基因已整合到细胞核中的染色体上，因此遵循基因的分离定律．

（3）根据题甲自交后代的性状分离比可推测出甲相当于杂合子，即其的基因型为R+R-．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶（或限制酶）　重组质粒　抗性基因

（2）不完全显性   　染色体

（3）R+R-

解：（1）基因工程的操作对象是基因或DNA分子．（2）基因工程的一般步骤是：获取目的基因、构建基因表达载体、把目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，因此可以填上相应内容．

（3）①从实验结果可以看出，当硫酸铵浓度为30%时，开始析出球蛋白，因此需要控制硫酸铵浓度为30%之前收集纤维蛋白．

②从实验结果中可以看出，当硫酸铵浓度约为65%时，DNA全部析出，因此大约为65%时，DNA的溶解度最小，同时析出的物质还有纤维蛋白、球蛋白和少量的tRNA．

③提纯DNA，实际上就是把DNA与蛋白质分开，可以采用如下方法：DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA；也可以用蛋白酶处理，使蛋白质水解；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温一段时间，蛋白质变性析出，DNA不变性．

故答案为：

（1）DNA

（2）基因表达   表达载体    目的基因整合到受体细胞的DNA上

（3）①在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物

②65%    球蛋白、纤维蛋白（tRNA）

③将DNA与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，收集再次析出物；用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）处理溶有DNA与蛋白质的溶液；将溶有DNA与蛋白质的溶液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温一段时间（答出一点即可）

解：（1）A、质粒运载体自身也可进入细胞，A错误；

B、病毒中没有质粒，质粒运载体可能是从细菌的DNA改造的，B错误；

C、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，不需要整合到受体细胞的DNA中，C错误；

D、将目的基因与质粒运载体结合需要限制酶和DNA连接酶，因此没有限制酶就无法使用质粒运载体，D正确．

故选：ABC．

（2）质粒上原的一个ClaⅠ位点被目的基因置换后，重组质粒仍被ClaⅠ切为线状，故目的基因中必然含有一个ClaⅠ位点；同理原质粒上存在一个PstⅠ、SalⅠ位点，重组质粒用PstⅠ、SalⅠ后有两个片断，故目的基因中必然各含有一个PstⅠ、SalⅠ位点．由此可判断，目的基因内部含有ClaⅠ、PstⅠ、SalⅠ酶切位点．

（3）根据表中数据可知，用SalⅠ单独切割重组质粒后产生2.1kb和4.6kb两种长度的DNA片段，而用PstⅠ单独切割重组质粒后产生1.6kb和5.1kb两种长度的DNA片段，可见SalⅠ和PstⅠ之间的最短距离是2.1-1.6=0.5kb，即用SalⅠ和PstⅠ联合酶切重组质粒，酶切产物中最小片段的长度为0.5kb．

（4）根据第（2）题可知构建重组质粒的过程：用限制性核酸内切酶HindⅢ和BamHⅠ分别对目的基因和质粒进行切割，用DNA连接酶将目的基因与载体拼接成重组质粒．用于用相同的限制性内切酶切割后，目的基因与质粒具有相同的末端，碱基互补而连接（或不同生物DNA的结构具有统一性），所以外源目的基因能“插入”到质粒的DNA内．

（5）①遗传密码具有通用性，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达，①正确；　         

②③基因可独立表达，因此目的基因进入受体细胞后可表达出相应的产物，②正确，③错误；

④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制，因此目的基因进入受体细胞后可不断扩增，④正确．

故选：D．

（6）由图2可知，BamHI的切割位点在G和A之间，即用BamHⅠ限制酶切割外源DNA，切开的是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间相连的磷酸二酯键．

故答案为：

（1）A、B  C

（2）含有ClaⅠ、PstⅠ、SalⅠ酶切位点    质粒上原的一个ClaⅠ位点被目的基因置换后，重组质粒仍被ClaⅠ切为线状，故目的基因中必然含有一个ClaⅠ位点；同理原质粒上存在一个PstⅠ、SalⅠ位点，重组质粒用PstⅠ、SalⅠ后有两个片断，故目的基因中必然各含有一个PstⅠ、SalⅠ位点．

（3）0.5

（4）用限制性核酸内切酶HindⅢ和BamHⅠ分别对目的基因和质粒进行切割，用DNA连接酶将目的基因与载体拼接成重组质粒      用相同的限制性内切酶切割后，目的基因与质粒具有相同的末端，碱基互补而连接（或不同生物DNA的结构具有统一性）

（5）D

（6）鸟嘌呤脱氧核苷酸   腺嘌呤脱氧核苷酸

解：（1）外源DNA是双链的DNA，含有2个游离的磷酸基团；质粒是双链环状DNA分子，没有游离的磷酸基团．

（2）根据表格分析，Sma I限制酶能识别CCGGG，并在C（胞嘧啶脱氧核苷酸）和G（ 鸟嘌呤脱氧核苷酸）之间切割磷酸二酯键．

（3）外源DNA和质粒上都有EcoRⅠ酶切割位点，加入DNA连接酶获得的环状DNA可能有3种情况，即目的基因-目的基因、质粒-质粒、目的基因-质粒．

（4）用EcoRI酶切割外源DNA和质粒两者形成相同的黏性末端，则外源DNA和质粒的黏性末端会自身环化，甚至是反向接入；因此使用BamH I和HindⅢ两种限制酶同时处理外源DNA和质粒，能避免切割的外源DNA、质粒的黏性末端自身环化．

（5）基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子和标记基因；目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用．

（6）质粒中含有抗生素抗性基因，重组质粒导入大肠杆菌培养时，培养基中加入抗生素进行鉴别和筛选含有重组质粒的细胞．

故答案为：

（1）2   0

（2）胞嘧啶脱氧核苷酸   鸟嘌呤脱氧核苷酸

（3）DNA连接酶  3

（4）避免切割的外源DNA、质粒的黏性末端自身环化、

（5）目的基因   启动子  终止子

（6）抗生素    重组质粒

解：（1）在基因工程中，目的基因与运载体结合形成重组DNA，载体常用质粒．

（2）碱基互补配对发生在DNA分子、RNA分子之间，①过程目的基因的DNA分子中有碱基互补配对，②过程目的基因DNA与质粒的黏性末端配对，④过程中基因的表达有碱基互补配对，故基因工程中①②④有碱基互补配对．

（3）图中的步骤②基因表达载体的构建是基因工程的核心，其目的是使目的基因在受体细胞中

（4）不同生物的DNA分子结构（双螺旋结构）和化学组成相同，因此不同种生物之间的基因能拼接成功；自然界所有生物共用一套遗传密码子，因此目的基因在不同的生物细胞中能正确表达．

（5）转基因玉米获得后，公众在食物安全、生物安全和环境安全方面产生了争议．食物方面公众主要担心转基因生物会产生毒性蛋白或过敏蛋白．

（6）利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的空间结构，然后改变植酸酶的氨基酸序列，从而得到新的植酸酶．

故答案为：

（1）运载体   

（2）①②④

（3）②基因表达载体的构建                     稳定存在

（4）不同生物的DNA分子都为双螺旋结构          遗传密码

（5）毒性蛋白或过敏蛋白

（6）空间结构          氨基酸

解：（1）过程①是以mRNA为模板形成基因的过程，属于反转录，此过程需要逆转录酶的参与．

（2）在目的基因导入微生物细胞时，一般用CaCl2处理，以增大细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞．

（3）因本题上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的基因破坏掉，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒A，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因．与图2中b空圈相对应的图2的a中的菌落表现型是抗氨苄青霉素但不抗四环素，说明这些细菌中导入了重组质粒．

（4）所有的生物都共用一套密码子，所以人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达．目的基因导入大肠杆菌中后表达的过程包括转录和翻译，即．

（5）如图3所示“DNA的粗提取和物理性状观察”实验装置：在图3A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是使血细胞破裂，图3中C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是使DNA析出．

故答案为：

（1）逆转录酶

（2）CaCl2　细胞壁

（3）普通质粒或重组质粒　抗氨苄青霉素和四环素抗性　重组质粒

（4）共用一套密码子　

（5）使血细胞破裂        使DNA析出

解：（1）①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要用DNA连接酶将目的基因和切开的运载体连接形成重组质粒．由图可知，标记基因是草丁膦抗性基因，因此可用含草丁膦的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞．目的基因能在植物体内稳定遗传的关键是目的基因整合到受体细胞的DNA上．

（2）若将一个B基因连接到了矮秆油菜（gg）的染色体上并在植株中得到成功表达，由于B基因是另一种植物的高秆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，因此这样的转基因油菜表现为中秆；由于B基因与g基因位于非同源染色体上，它们的遗传遵循基因自由组合定律，该转基因油菜（Bbgg）自交产生的子一代中，高秆植株（BBgg）应占，即25%．

（3）①这四种油菜的细胞中都含有一个G基因和一个B基因，但丙植株的B基因插入G基因中，导致G基因被破坏，即丙植株体细胞内的高秆基因只有一个，表现为中秆，而其余三个均表现为高秆．

②在不考虑交叉互换的前提下，甲的B、b基因和G、g基因不在同一对同源染色体上，它们的遗传遵循基因自由组合定律，其自交后代有9种基因型，5种表现型（含有4个现显性基因、含有3个显性基因、含有2个显性基因、含有1个显性基因，不含显性基因）；乙的B、b基因和G、g基因位于同一对同源染色体上，它们的遗传不遵循基因自由组合定律，其自交只能产生3种基因型（均含有2个显性基因），1种表现型；丙中相当于只有一个显性基因，其自交后代有3种基因型，3种表现型（含有2个显性基因、含有一个显性基因和不含显性基因）；丁的B、b基因和G、g基因位于同一对同源染色体上，它们的遗传不遵循基因自由组合定律，其自交只能产生3种基因型（均含有2个显性基因），1种表现型．因此，自交后代含有3种表现型的是丙．另外还有一种转基因油菜的自交子代也有3种表现型，如图所示

．

故答案为：

（1）DNA连接酶     草丁膦    目的基因整合到受体细胞的DNA上

（2）中秆   25%

（3）①B基因插入G基因中，导致G基因被破坏，植株体细胞内的高秆基因只有一个，仍表现为中秆．   

②丙   5种    （B基因的位置见图）

解：（1）①为逆转录过程，只能发生在被某些病毒侵染的细胞中，在正常细胞中不能发生．

（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生相应的浆细胞，这是体液免疫，从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是B细胞（浆细胞或已免疫B细胞），将无限增殖的基因导入浆细胞，得到的细胞Ⅱ应具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体．

（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于的无菌无毒环境，其次需要提供充足的营养和适宜的温度．

（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和检测（专一）抗体

（5）疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用图中的H7N9抗原蛋白作为疫苗．

故答案为：

（1）否

（2）体液    浆细胞或已免疫B细胞   既能无限增殖，又能产生特异性抗体

（3）无菌、无毒

（4）（专一）抗体

（5）H7N9抗原蛋白