热门试卷

39.生物---选修1：生物技术实践

高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。其筛选过程如下图所示。

(1)进行①过程的目的是      ；②过程所使用的接种方法是           。

(2)I、II号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是                ；对培养基常用        方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能    。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是：                   。

(3)部分嗜热菌在I号培养基上生长时可释放       分解培养基中的淀粉，在不同菌落周围形成大小不同的透明圈，应挑出           的菌落，接种到II号培养基。

(4)根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是                      。

40. 生物---选修3：现代生物科技专题

下图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答：

（1）④过程应用的生物技术主要是                           。

（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构设计并人工合成的，这

属于                                                  工程技术。

（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为 ，则该酶识别的核苷酸序列是                           。

（4）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（图示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入                           。

②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的         （基因），保证T—DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于                           ；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是                                。

（5）检测“华恢l号”具有抗虫性状的方法是                               。

34．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物a，研究人员用水、有机化合物a、磷酸盐、镁盐及少量维生素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物a的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答下列问题：

（1）培养基中加入化合物a最可能为目的菌的生长提供了_________，这种培养基按其用途属于_________培养基。

（2）实验中振荡培养的目的是__________________。在实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是_________。

（3）制备固体培养基时常加入凝固剂_________，固体培养基接种前应采用的灭菌方法是_________。

（4）某同学根据稀释倍数及接种后在培养基所形成菌落数粗略统计污水池中“目的菌”的总数。实验中还设置了一组不接种的空白培养基作为_________实验，目的是检验培养基是否被杂菌污染。

39.请从39~40题中任选一题作答

39.【生物——选修1：生物技术实践】

废纸的主要成分是木质纤维，人类正努力通过一定的技术将其转化为一种新的资源——乙醇。纤维素酶是实现乙醇工业化生产的关键物质。

（1）纤维素酶可以从（           ）的细菌培养液中提取。

（2）某兴趣小组的同学设计了从土壤中分离该菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。土壤取样时最好选择       的环境采集土样；鉴别培养时可以在培养基中加入（       ）染液，然后挑选产生（       ）的菌落作为菌种进行纯化培养。

（3）下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是（          ），图B效果的接种方法是（            ）。

（4）在“废纸→预处理→纤维素酶糖化→糖液→发酵生产乙醇”生产中，发酵产生乙醇阶段需要的菌种是（            ），在生产乙醇阶段要控制的必要条件是  （            ） 。

40.【生物——选修3：现代生物科技专题】）

2012诺贝尔生理或医学奖颁给研究“细胞核重编程”和“诱导性多能干细胞”的约翰·格登与山中伸弥。这项技术以人体自身细胞复制成“万用细胞”干细胞备受瞩目，为培育自体器官组织提供帮助。请回答下列问题：

（1）约翰·格登发现，蝌蚪的一个普通的上皮细胞核也能够让去核卵细胞发育成为一个蝌蚪，进而变成一只成熟的爪蟾。由于动物细胞的全能性会随着动物细胞（        ）程度的提高而逐渐受到限制，直到今天也还不能用类似____（填植物细胞工程的一种技术手段）的方法获得完整的动物个体。因此，约翰·格登培育“克隆青蛙”，实际是通过     （填动物细胞工程的一种技术手段）来实现的。

（2）2006年，山中伸弥通过一系列艰苦努力，找到了四个关键基因并把4个基因通过逆转录病毒转入从老鼠尾巴中所提取的体细胞中。他发现当这四个基因重新在细胞内开始表达的时候，这个细胞就具有了类似干细胞的可诱导分化的能力。在该技术中，逆转录病毒是     ，它能够携带外源基因进入受体细胞，并整合到其染色体的（      ）上。

（3）所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导回早期干细胞状态，即获得“诱导性多能干细胞”（iPS细胞），iPS细胞与胚胎干细胞一样，具有发育的（      ），即可以分他为成年动物体内任何一种组织细胞，我们可以用更安全的方法，用这些细胞来修复体内潜在的受损器官或组织。同时与经典的胚胎干细胞技术和体细胞核移植技术不同，iPS技术不使用（      ），因此没有伦理学的问题。利用iPS技术可以用病人自己的体细胞制备干细胞，所以不会有（     ）的问题。

在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答：

33．圆褐固氮菌是自生固氮菌，青霉素会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖而不影响酵母菌等真菌的生长繁殖。现有圆褐固氮菌和酵母菌的混合物，请你设计一个实验，分离并得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

（1）材料用具：（略）

（2）方法步骤：

①制备两种培养基，一种是（             ）培养基，另一种是 （            ）培养基，将这两种培养基各自分成两份，依次标上A、a和B、b。

②分别向A、B培养基中接种混合菌，适宜条件下培养3~4天。

③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种分别接种到a、b培养基中，在适宜条件下培养3~4天。

（3）请回答：

①本实验配制的培养基属于（       ）培养基，实验步骤③的目的是（           ） 。

②圆褐固氮菌大量积累次级代谢产物的时期是（                ），其与酵母菌在基因结构上的主要差异为（                               ） 。

③青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。据此推测青霉素不影响酵母菌生长繁殖的原因是（                                ）。

④生产上常用圆褐固氮菌制成菌剂施放到土壤中，以提高农作物的产量，其原因是 （                                                     ）。

37.请从37-38题中任选一题作答。

37.选修1-现代生物技术实践

让金黄色葡萄球菌得名的那种金黄色，实际上是类胡萝卜素。金黄色葡萄球菌广泛分布在大气、土壤中，对热敏感，能耐高盐生长。通常大于105菌落数／克时可产生致病性肠毒素，因常规烹饪等处理方式不能破坏肠毒素而引起食物中毒。卫生部今年9月公布的《速冻面米制品食品安全国家标准（征求意见稿）》，规定每批产品抽检5个样品中，至多只能有1个样品每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量在1000至10000个之间。

（1）食用无菌的熟制品，(          )（是、否）一定不会引起因为细菌而导致的食物中毒。

（2）利用高盐的培养基，可从生制品的微生物中筛选出金黄色葡萄球菌，依据的原理是(          ).。

（3）每批产品抽检5个样品，属于(          )调查法。若只是检测生制品是否合格，可将样品以克为单位进行稀释处理，其稀释倍数最好为(          )（0．10、102、103、104、105）倍。采用(          ) 法将稀释液接种到平板培养基上培养，以保证能从中选择出菌落数在30。300之间的平板进行计数。培养得到的菌落数常常会(          )（大于、等于、小于）实际含菌数量。

（4）从色素角度分析，金黄色葡萄球菌不能进行光合作用是由于其缺少(          )

38.选修3-现代生物技术（共15介）

研究表明，让金黄色葡萄球菌得名的那种金黄色，实际上是类胡萝卜素。为进行对比，研究人员用基因“敲出”技术，制造了一种不能产生类胡萝卜素的葡萄球菌。他们发现，金黄色葡萄球菌能抵御免疫系统中杀伤细胞生成的氧化物攻击，甚至能抵御双氧水等常用于消毒的强氧化剂。反之，不能产生类胡萝卜素的葡萄球菌很快就被免疫系统攻击杀死，甚至不能造成机体局部感染。在进一步研究中，科学家将生成类胡萝卜素的基因“敲人”一种威胁很小的链球菌中，结果转基因的链球菌不仅变成了金黄色，也能抵抗氧化剂的攻击。

（1）金黄色葡萄球菌敲出特定基因后，成为不能产生类胡萝卜素的葡萄球菌。据此可将基因与性状的关系描述为：(          )。

（2）基因工程的核心是(          )。

（3）用Ca2+处理链球菌，使其处于感受态，再将重组DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，从而可完成(          )过程。

（4）目的基因导入受体后，其遗传特性是否可以(          )，只有通过检测和鉴定才能知道。在分子水平上，常利用(          )技术对DNA与RNA分子依次进行检测；利用抗体的特异性，依据抗原一一抗体杂交的现象检测(          ) 。“转基因的链球菌不仅变成了金黄色，也能抵抗氧化剂的攻击”，这句话表达了(          )水平的鉴定结果。

34．利用微生物分解作物淀粉生产糖浆，有广阔的应用前景。某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的____________（填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。

（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理，之后，将菌液涂布接种于以____________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计____________作为空白对照。

（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是_________，则说明此种菌能够____________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，进行进一步的纯化。

31.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养结合显微镜检以及菌落的特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配置一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。

（1）用无氮培养基可以筛选出（                 ） 。

（2）用不含有机碳源的培养基可以筛选出（                 ） 。

（3）酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入（                 ） 。

（4）用加入了较高浓度的NaCl的选择培养基可以筛选出（                 ） 。

（5）在无氧条件下培养混合菌，（                 ） 可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，可抑制（                 ） 菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可成功分离。

（6）要确定其中混有大肠杆菌，应在培养基中添加  （                 ） ，根据在培养基上形成的菌落呈（                 ） 色并带有金属光泽进行判断。

请从39～40题中任选一题作答

39.[生物——选修1生物技术实践]

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有（         ），（                ），水，无机盐等基本营养物质。

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行（               ），而且须将接种后的培养皿呈（                  ）状态放置。

（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成（           ）。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的（                ）就能大致推测出样品中的活菌数。

（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A~E五种菌株中，（              ）是产植酸酶的理想菌株。

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行 （              ） 。

40.[生物－现代生物科技专题]

通过胚胎工程建立的转基因动物模型，常用于基因表达调控的研究．良种动物的筛选以及基因药物的生产等。制备转基因鼠的流程如图所示：

（1）体外受精时，人工采集的动物精子必须经过（       ）处理才能完成图示中的①过程，完成②过程常采用的方法是（                    ）。

（2）④过程中，为维持培养液pH的相对稳定，必须将培养瓶放置在（               ）中进行培养，培养过程中用（                )酶处理才能获得单个细胞。

（3）图示中甲为（                )时期的去核卵母细胞，⑤过程操作技术叫做（                )。

（4）在上述转基因鼠的培养过程中，所用到的主要胚胎工程技术有体外受精，早期胚胎培养和（                )。

（5）转基因鼠只携带一个B基因，常采用（                )的方法来培育出基因型为BB的个体。

请从39～40题中任选一题作答

39.【生物—选修模块1：生物技术实践】

从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。

（1）接种前要对培养基进行（         ）处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在（         ）条件下进行。

（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从（         ）环境中采集。

（3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制（         ）培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的 （         ）。

（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是 （         ），当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生（         ）来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是（               ）。

40.【生物—选修模块3：现代生物科技专题】

植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程如下图所示：

（1）获得原生质体后，需对其进行活力检查，下列各实验中，最合适的检测实验是（         ）

A．观察原生质体的结构是否完整       

B．观察细胞质的流动

C．观察细胞有丝分裂      

D．观察叶绿体数目的多少

（2）从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，需要经过（         ）。

①无丝分裂   ②减数分裂  ③有丝分裂   ④原代培养

⑤传代培养  ⑥植物体细胞杂交    ⑦脱分化

⑧再分化   ⑨细胞融合

A．①④⑤⑧⑨      

B. ②④⑤⑥⑧⑨    

C．②⑧⑨          

D．③⑦⑧

（3）c步骤的DPD培养基与d步骤所用培养基的主要区别是（                     ）。

（4）若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到（         ）。若为了获得三七的人工种子，则需要培养到（         ）。

（5）如果愈伤组织是转基因植物细胞培养产生的，在通过基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有 （         ） 、（         ）、（         ） 。

回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(10分)

基因工程中pIJ702是一种常用质粒（图20），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。

请考生从给出的3道物理题、3道化学题、2道生物题中每科任选一题做答。

39．请回答下列生物技术方面的问题：

（1）生产上为扩大菊花的种植，常采用组织培养技术。如果组织培养中外植体选取的材料是菊花的茎段，插入培养基时应注意 （           ）。进行菊花组织培养时，在无菌箱中进行，一般pH控制在5．8左右，温度控制在18～22℃，并且 （            ） 。

（2）为提高果酒的品质，要筛选得到纯净的酵母菌菌种，通常使用的培养基按功能来分，可称为（           ）。

（3）测定亚硝酸盐含量的操作程序是①配制溶液；② （             ） ；③ （           ）；

④比色。泡菜发酵过程中产生的亚硝酸盐在（         ）酸化条件下，与对氨基苯磺酸的反应产物能与N－1－萘基乙二胺盐酸盐偶联成（           ） 色化合物。

（4）血红蛋白的提取方法可以采用（      ），该方法是依据（              ）分离蛋白质的有效方法。判断纯化的蛋白质是否达到要求，需进行蛋白质纯度的鉴定，使用最多的方法是 （                                 ） 。

40．血清白蛋白临床上需求量大，通常从人血液中提取。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛受精卵细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：

请回答下列问题：（1）培育“乳腺反应器”动物的一个重要环节是获得人体血清白蛋白基因。获得人体血清白蛋白基因的常用方法是从人的细胞获得血清白蛋白基因的mRNA，然后在___________酶的催化作用下合成血清白蛋白基因，再经过______________技术获得大量血清白蛋白基因，该技术中的引物化学成分是________________。

（2）重组表达载体构建是基因工程的核心，除了目的基因外还必须有（         ） 、（         ）以及标记基因等部分，在此过程中除了使用工具酶外，还需使用的工具是（             ） 。

（3）若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行______________处理，经过“最后一道工序”________________，植入到受体母牛体内。

（4）由于转基因表达产物存在于奶牛的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法是从转基因生物中提取蛋白质，用（                              ） ，表明目的基因已形成蛋白质产品。