- 土壤中分解尿素的微生物或细菌的分离与计数
- 共916题
回答有关微生物的问题．
已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A．现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图．
（1）步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、______等营养物质（至少写出3种）；该培养基是______（多选）．
A．固体培养基 B．液体培养基 C．通用培养基 D．选择培养基
（2）步骤一采用______接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是______．
（3）无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是______．
（4）步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：
①A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，两者未分离．
②______．
③______．
（4）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都如39题中①的情况，则应______，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．
正确答案
解：（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，该培养基是通用培养基或液体培养基或选择培养基．
（2）由图可知，步骤一采用平板划线法接种，步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌．
（3）接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染．
（4）若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ．
（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤1和步骤2再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．
故答案为：
（1）无机盐、碳源、氮源 B、C、D
（2）划线法 筛选、分离两种类型的细菌
（3）防止杂菌污染
（4）②A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ③B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ
（5）重复步骤1和步骤2
解析
解：（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，该培养基是通用培养基或液体培养基或选择培养基．
（2）由图可知，步骤一采用平板划线法接种，步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌．
（3）接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染．
（4）若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ．
（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤1和步骤2再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止．
故答案为：
（1）无机盐、碳源、氮源 B、C、D
（2）划线法 筛选、分离两种类型的细菌
（3）防止杂菌污染
（4）②A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ③B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ
（5）重复步骤1和步骤2
白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治．白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管．同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内的养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身．
请根据上述材料回答下面的问题．
（1）从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→______→性能测定．白僵菌的菌样应从______中采集．
（2）分离白僵菌菌种的培养基属于______培养基．在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于______（营养物质）．
正确答案
解：（1）筛选理想菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．白僵菌的菌样应从感病昆虫中采集．
（2）选择培养基是加入抗生素或某些化学物质抑制某些细菌的生长，而促进或不影响另一些细菌，如分离白僵菌菌种的培养基属于选择培养基，培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐，在配制白僵菌培养基时加入蔗糖提供碳源，而硫酸铵、硝酸钾属于氮源或无机盐营养物质．
故答案为：
（1）纯种分离 感病昆虫
（2）选择 碳源
解析
解：（1）筛选理想菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．白僵菌的菌样应从感病昆虫中采集．
（2）选择培养基是加入抗生素或某些化学物质抑制某些细菌的生长，而促进或不影响另一些细菌，如分离白僵菌菌种的培养基属于选择培养基，培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐，在配制白僵菌培养基时加入蔗糖提供碳源，而硫酸铵、硝酸钾属于氮源或无机盐营养物质．
故答案为：
（1）纯种分离 感病昆虫
（2）选择 碳源
下列有关平板划线操作的叙述，错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧，A正确；
B、接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，B正确；
C、蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，C正确；
D、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连． 因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错误．
故选：D．
下列有关平板划线接种法的操作错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，故A正确；
B、接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，故B正确；
C、蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，故C正确；
D、划线时要避免最后一区的划线与第一区线连． 因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，故D错误．
故选：D．
人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源．现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括______和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有______（答2种）．
（2）采用______法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养．在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______旁进行操作．接种后的培养皿______于37℃的恒温箱中培养．
（3）用______培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于______培养基．若培养基中存在有脲酶的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的______，遇培养基中加入的酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源．变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力______．
（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数______．
A．多 B．少 C．相等 D．几乎为零．
正确答案
解：（1）用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等都必须是无菌的；常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌．
（2）采用稀释涂布平板法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养；为避免杂菌污染，操作要在酒精灯火焰旁操作，为防止水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴，培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养．
（3）酚红指示剂可用于鉴别微生物，所以含有酚红指示剂的培养基属于鉴别培养基；尿素被分解成氨可使PH呈碱性，变色区域越大，说明其分解能力越强．
（4）以尿素为氮源的培养基中菌落数少，因为其他微生物不能在该环境中生存．
故答案为：
（1）接种工具和培养基 高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、干热灭菌
（2）稀释涂布平板法 酒精灯火焰旁 倒置
（3）鉴别 氨 越强
（4）B
解析
解：（1）用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等都必须是无菌的；常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌．
（2）采用稀释涂布平板法将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养；为避免杂菌污染，操作要在酒精灯火焰旁操作，为防止水蒸气在皿盖上凝结会产生水滴，培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养．
（3）酚红指示剂可用于鉴别微生物，所以含有酚红指示剂的培养基属于鉴别培养基；尿素被分解成氨可使PH呈碱性，变色区域越大，说明其分解能力越强．
（4）以尿素为氮源的培养基中菌落数少，因为其他微生物不能在该环境中生存．
故答案为：
（1）接种工具和培养基 高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌、干热灭菌
（2）稀释涂布平板法 酒精灯火焰旁 倒置
（3）鉴别 氨 越强
（4）B
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