- 土壤中分解尿素的微生物或细菌的分离与计数
- 共916题
金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病．金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题．
（1）操作中在血平板上的接种方法是______，接种操作前后需要对接种工具进行______灭菌．
（2）用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______．
（3）在制备血平板时需将pH调节至______（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基______后，再加入适量血液．按培养基功能分类，血平板属于______培养基．
（4）多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，需要对本次操作进行完善，完善的方案是______．
（5）为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B______．为方便后续使用该菌种，可将菌液用______的方法长期保存．
正确答案
平板划线法
灼烧
金黄色葡萄球菌
微碱性
冷却
鉴别
周围存在透明圈
设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组
敏感
不敏感
甘油管藏
解析
解：（1）使用接种环进行接种应该只用平板划线法；接种工具灭菌的方式是灼烧灭菌．
（2）用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是分离出金黄色葡萄球菌．
（3）血液是碱性的，所以培养基应该调至碱性；灭菌法方法是高压蒸汽灭菌法，所以应该等到培养基冷却后加入血液，否则会破坏血细胞；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基．
（4）根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；但这个实验要这是对照实验，对照实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶．
（5）对相应抗生素敏感的细菌，在含有抗生素的培养基上不能生长；反之，则能生长．含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；菌种长期保存，用甘油管藏的方法．
故答案为：（1）平板划线法 灼烧
（2）分离出金黄色葡萄球菌
（3）微碱性 冷却 鉴别
（4）周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组
（5）敏感 不敏感 甘油管藏
利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β-紫罗酮的培养基上生长．菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程．
（1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是______．从真菌细胞中提取酶时，常常采用______法将相对分子质量不同的酶进行分离．
（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供______；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加______．
（3）进行③过程时，应选取______色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，采取重复______（填图甲中数字）过程．
（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是______；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是______．
（5）过程⑥是______，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量______，提取的色素少．
（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是①制备MS培养基；②______；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培．
正确答案
解：（1）三孢布拉霉负菌为真核细胞，细菌为原核细胞，它们共同具有的细胞器是核糖体．从真菌细胞中提取酶时，常常采用凝胶色谱法将相对分子质量不同的酶进行分离．
（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源（碳源和能源）；由于未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10-5M的β━紫罗酮．该培养基按用途分属于选择培养基．
（3）菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复③④过程．
（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示，所以该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖．
（5）过程⑥是浓缩，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量过少，提取的色素少．
（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是：①制备MS培养基；②外植体消毒；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培．
故答案为：
（1）核糖体 凝胶色谱
（2）碳源 10-5M的β━紫罗酮
（3）橙红 ③④
（4）稀释涂布平板法 基因突变频率低和不定向性
（5）浓缩 过少
（6）外植体消毒
解析
解：（1）三孢布拉霉负菌为真核细胞，细菌为原核细胞，它们共同具有的细胞器是核糖体．从真菌细胞中提取酶时，常常采用凝胶色谱法将相对分子质量不同的酶进行分离．
（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源（碳源和能源）；由于未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10-5M的β━紫罗酮．该培养基按用途分属于选择培养基．
（3）菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复③④过程．
（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示，所以该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖．
（5）过程⑥是浓缩，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量过少，提取的色素少．
（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是：①制备MS培养基；②外植体消毒；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培．
故答案为：
（1）核糖体 凝胶色谱
（2）碳源 10-5M的β━紫罗酮
（3）橙红 ③④
（4）稀释涂布平板法 基因突变频率低和不定向性
（5）浓缩 过少
（6）外植体消毒
如何判断制作的培养基是否灭菌彻底（ ）
正确答案
解析
解：微生物实验室培养的关键就在于防止杂菌污染，在未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后有无菌落生长，可判断是否灭菌彻底，C正确．
故选：C．
“树橘柚者，食之则甘，嗅之则香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季节．橘子全身都是宝：不仅果肉的营养价值高，药用价值较高，其皮、核、络、叶都是“地道药材”．请回答下列问题．
（1）江南某橘子盛产地想建立一个大型的果酒、果醋加工厂，需要的发酵菌种是______和______．分离纯化这两种微生物的常用方法是：将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用______将菌液铺平．这种接种方法称为______．
（2）提取桔皮的胡萝卜素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是______．
（3）四川一果汁加工厂在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊，为提高出汁率，可加入适量的______使果汁变得澄清．
（4）为了保持某橘子品种的品质，可用组织培养繁殖试管苗．培养外植体的培养基中常用的凝固剂是______．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化．对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是______．
（5）为了检测其中某种菌对于抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A、B两种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B______．
正确答案
解：（1）果酒、果醋加工需要的发酵菌种分别是酵母菌和醋酸菌．分离纯化这两种微生物的常用方法是：稀释涂布平板法，即将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平．
（2）提取桔皮的胡萝卜素过程中，为防止石油醚等有机溶剂的挥发，在萃取加热时需安装冷凝回流装置．
（3）果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，也是果汁变得澄清，所以在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊，为提高出汁率，可加入适量的果胶酶使果汁变得澄清．
（4）培养基中常用的凝固剂是琼脂．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；高时，有利于根的分化．对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（5）由于抗生素能抑制对抗生素敏感的微生物，因此将含有A，B两种抗生素的滤纸片均匀置于接种微生物平板上的不同位置，培养一段时间后，如果含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；如果含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感．
故答案为：
（1）酵母菌 醋酸菌 涂布器 稀释涂布平板法
（2）防止有机溶剂（石油醚）的挥发
（3）果胶酶
（4）琼脂 低 高压蒸汽灭菌
（5）敏感 不敏感
解析
解：（1）果酒、果醋加工需要的发酵菌种分别是酵母菌和醋酸菌．分离纯化这两种微生物的常用方法是：稀释涂布平板法，即将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平．
（2）提取桔皮的胡萝卜素过程中，为防止石油醚等有机溶剂的挥发，在萃取加热时需安装冷凝回流装置．
（3）果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，也是果汁变得澄清，所以在制作橘子汁的过程中发现果汁有些浑浊，为提高出汁率，可加入适量的果胶酶使果汁变得澄清．
（4）培养基中常用的凝固剂是琼脂．培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；高时，有利于根的分化．对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（5）由于抗生素能抑制对抗生素敏感的微生物，因此将含有A，B两种抗生素的滤纸片均匀置于接种微生物平板上的不同位置，培养一段时间后，如果含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；如果含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感．
故答案为：
（1）酵母菌 醋酸菌 涂布器 稀释涂布平板法
（2）防止有机溶剂（石油醚）的挥发
（3）果胶酶
（4）琼脂 低 高压蒸汽灭菌
（5）敏感 不敏感
下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是（ ）
正确答案
解析
解：A、硝化细菌能利用氮源，且能利用氧化NH3释放的化学能进行化能合成作用合成有机物，属于自养需要型生物，A正确；
B、乳酸菌是异养厌氧型生物，不能直接利用氮气，且能量来源为糖类，B错误；
C、根瘤菌进行生命活动所需要的能量来自糖类等有机物的氧化分解，属于异养需氧型生物，C错误；
D、衣藻是低等植物，能利用光能进行光合作用制造有机物，属于自养需氧型生物，D正确．
故选：AD．
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