热门试卷

解：（1）标准的PCR过程一般分为高温变性、低温复性和中温延伸三大步骤．

（2）PCR过程中，必须加入一小段DNA或RNA作为引物，结合到互补链DNA上．

（3）当温度降低时，引物与模板3‘端结合，在DNA聚合酶作用下，引物沿着模板延伸，此过程中原料是四种脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则．

（4）如果循环3次，则可形成8个DNA分子，其中含有15N标记的DNA分子为2个，占子代DNA的．

故答案为：

（1）变性    复性    延伸

（2）DNA或RNA

（3）3'四种脱氧核苷酸    碱基互补配对原则

（4）

解：（1）在基因工程中，A→B为PCR技术，利用的原理是DNA复制，其中①为DNA解旋过程，该过程是高温解链，不需要解旋酶．

（2）加热至94℃的目的是使DNA中的两条链之间的氢键断裂，这一过程在细胞内是通过解旋酶的作用下，消耗ATP来完成的．

（3）当温度降低时，引物与模板末端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板链延伸，最终合成两条DNA分子．此过程中原料是4种脱氧核苷酸，遵循的原则是碱基互补配对原则．

故答案为：

（1）PCR

（2）氢  解旋酶

（3）碱基互补配对原则

解：（1）①由图可知，由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时，两种引物都含有，故第四轮循环共产生16个DNA分子，其中含有引物A的分子是15个，占．

②由图示可知，第一、二轮循环合成的子链长度均不同，根据半保留复制特点可知，前两轮循环产生的四个DNA分子的两条链均不等长，第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链，如上图．

（2）在第1组引物中，引物Ⅰ的部分碱基序列是CAGGCT，引物Ⅱ的部分碱基序列是AGCCTG，若利用这两个引物进行DNA扩增，会因其中的部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效．在第2组引物中，引物Ⅰ′的部分碱基序列是AACTG和CAGTT，该引物一旦发生自身折叠，也将会出现部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效．

（3）图中直接将两个脱氧核苷酸合成DNA单链，这不能反映DNA聚合酶的功能，因为DNA聚合酶只能在DNA模板存在的条件下，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上．

（4）根据图示，该质粒为环形质粒．用限制酶EcoRⅤ单独切割该质粒时，只形成一个片段，说明该质粒上只有1个限制酶EcoRⅤ的识别位点．用限制酶MboⅠ单独切割该质粒时，形成两个片段，说明该质粒上有两个限制酶MboⅠ的识别位点．用限制酶EcoRⅤ和MboⅠ联合切割该质粒时，形成三个片段，其中有一个片段的长度与用MboⅠ单独切割该质粒时产生的片段长度相同（2.5kb），另外的两个片段是5.5kb和6kb，这说明限制酶EcoRⅤ的切割位点存在于用MboⅠ单独切割该质粒时产生的另一片段（11.5kb）上．质粒上EcoRV、MboI的切割位点如图所示：．

故答案为：

（1）①   ②三

（2）①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效

②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效

（3）DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上

（4）如图：

解：（1）PCR即多聚酶链式反应，在PCR技术中先要用95℃高温处理的目的是使DNA变性，从而使DNA的两条链解开，在延伸阶段需要需要用到的酶是TaqDNA聚合酶．DNA分子中，通常将含有游离的磷酸基团的末端称为5′端，另一端为3′，DNA聚合酶从引物的3′开始延伸DNA链，所以DNA子链复制的方向是从5′端到3′端．

（2）纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌．因此，刚果红染色法能通过颜色反应直接对微生物进行筛选．

故答案为：

（1）使DNA变性 　 TaqDNA聚合酶    从5′端到3′端

（2）C1酶  CX酶   刚果红染色法    颜色反应