热门试卷

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

(1)培养基中除了添加植酸钙以外，应含有___________、水、无机盐等基本营养物质。

(2)为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行_________。接种后须将培养皿呈_______状态放置。

(3)接种以前进进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成______________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的____________就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布_______个平板，取其平均值。若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是_______________。

(4)由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，_________________是产植酸酶最理想的菌株。

下面是有关细菌A的四项实验：

实验1：将A接种于一般培养基上，结果出现菌落。

实验2：用一定剂量的紫外线处理A，产生突变种a1。将a1接种于一般培养基后，不出现菌落；但在培养基内添加营养物质甲后，就出现菌落。

实验3：用另一剂量的紫外线处理A，得突变种a2。将a2接种于一般培养基后，也不出现菌落；但在培养基内添加营养物质乙后，就出现菌落。实验4：将a1和a2一起接种于一般培养基上，数日后出现菌落。

分析实验，回答下列问题：

(1)细菌a1和a2分别接种于一般培养基，均不能生长。其原因是用紫外线处理导致细菌A发生了________，从而缺乏合成营养物质甲或乙的____________。

(2)实验1至3表明，物质甲和乙均是细菌A在代谢过程中产生的_____________代谢产物。在实验2和3中，它们作为__________加入一般培养基的。

A．碳源B．氮源C．生长因子D．无机盐

(3)实验4中出现菌落的原因可能是________________。

在农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。

(1)上图是利用__________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步__________分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：(至少答2项)_______________。

(2)分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4?7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述___________成分，并加入葡萄糖和______物质。

(3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163； 在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？_______________________。

自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般先要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。

实验步骤如下：

A．制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液：

B．为了得到更加准确的结果，你选用_______(填“稀释混合平板法”或“稀释涂布平板法”)接种样品；

C．适宜温度下培养。

结果分析：

(1)测定大肠杆菌数，再对应稀释倍数为106的培养基，得到以下几种统计结果，其中正确可信的是_____

A．一个平板，统计的菌落数是23

B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24

C．三个平板，统计的菌落数是21、5和52，取平均值26

D．四个平板，统计的菌落数是21、30、24和25，取平均值25

(2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(0.2mL)____________。

(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量比测得的数量_____________，因为______________。

(4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？

圆褐固氮菌是自生固氮菌，青霉素会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖而不影响酵母菌等真菌的生长繁殖。现有圆褐固氮菌和酵母菌的混合物，请你设计一个实验，分离并得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

(1)材料用具：(略)

(2)方法步骤：

①．制备两种培养基，一种是______培养基，另一种是______培养基，将这两种培养基各自分成两份，依次标上A、a和B、b。

②．分别向A、B培养基中接种混合菌，适宜条件下培养3～4天。

③．分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种分别接种到a、b培养基中，在适宜条件下培养3～4天。

(3)请回答：

①．本实验配制的培养基属于______培养基，实验步骤③的目的是________。

②．圆褐固氮菌大量积累次级代谢产物的时期是________________，其与酵母菌在基因结构上的主要差异为__________。

③．青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。据此推测青霉素不影响酵母菌生长繁殖的原因是________________。

④．生产上常用圆褐固氮菌制成菌剂施放到土壤中，以提高农作物的产量，其原因是_______________。

利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。

(1)实验步骤：

①．配制________(固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为___________。

②．将___________接入已灭菌的培养基平板上。

③．立即用适当剂量的紫外照射，其目的是_______________。

④．菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现_______现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。

(2)若已得到二株变异菌株Ⅰ和Ⅱ，其淀粉转化率较高。经测定菌株l淀粉酶的催化活性高，菌株Ⅱ的淀粉酶蛋白含量高。经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株Ⅰ的突变发生在_______区，菌株Ⅱ的突变发生在_______区。

炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。

细胞培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。

细菌鉴定：实验流程如下图所示。

(1)对配制的液体培养基等需采取____方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为____(填“无机碳”或“有机碳”)。

(2)挑选可疑菌落制片后，用____观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。

(3)接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是____。对照组试管中应加入____，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组____(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染，反之则排除。

(4)对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_________。