- 微生物的培养与应用
- 共1581题
急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水中细菌、病毒的量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：
(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为________。上图所示的四种菌落分布中，不可能由该方法得到的是____________。
(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？__________为什么？____________。
(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻璃棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操者的双手。其中需要消毒的是_________，需要灭菌的是_________。
(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸、产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具有塞子的试管，应如何判断水样中是否有大肠杆菌？____________________________。
正确答案
(1)稀释涂布平板法 D
(2)需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)
(3)③ ①②
(4)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37℃恒温箱培养24h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌，否则，说明水样中无大肠杆菌
研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
(1)柚皮易焦糊，宜采用_________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。
(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或_______接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是______。实验前需对超净工作台进行_________处理。
(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供__________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。
(4)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
正确答案
(1)压榨 过滤
(2)稀释涂布平板法 高压蒸汽灭菌锅 紫外线消毒
(3)碳源和氮源 越慢
(4)大小
下面有关探究细菌群体生长规律的实验设计方案中，操作或说明有错误的步骤是
[ ]
A．步骤1
B．步骤2
C．步骤3
D．步骤4
正确答案
B
下表是某微生物培养基成分，据表回答下列问题。
(1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型是___________，判断依据是_________。
(2)若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基成分如何调整？_________，依据是___________________。
(3)若表中培养基用于观察菌落形态，应增加的成分是____________。
(4)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，某些微生物仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加_____________。下列选项中属于该类物质的有________。(不定项选择)
A．某些维生素 B．某些氨基酸 C．酶 D．激素
正确答案
(1)自养；无有机碳源
(2)去除培养基的②成分，加入有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源，但由于自生固氮菌是异养，培养基中还需加入有机碳源。
(3)琼脂
(4)生长因子；AB
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是___________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_______作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有多种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越__________。
正确答案
(1)氮源、碳源 无机盐、水
(2)高压蒸汽灭菌
(3)无菌水
(4)高
下表是某培养液成分含量表。请据表回答：
(1)若用于培养微生物，该培养液中有_____类营养物质，可培养的微生物的同化作用类型是______。
(2)此培养液若用来培养固氮微生物，则应除去的成分是___________，应加入的物质是_______。
(3)若用该培养液进行植物的无土栽培，则_______成功，原因是___________________。
(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应加入的物质是___________；为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入_________，将呈_________反应。
正确答案
(1)五 自养型
(2)① 有机物
(3)不能 矿质元素种类不全
(4)纤维素粉 刚果红 红色
如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：
(1)依物理性质，该培养基属于_________培养基。依用途划分，则属于__________培养基。
(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是__________。
(3)该培养基中的碳源是__________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是______________。
(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_______，应加入的物质是________，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入__________，将呈_________反应。
正确答案
(1)．固体 选择
(2)．异养型
(3)．葡萄糖 先调整pH
(4)．青霉素和葡萄糖 纤维素粉 刚果红 红色（透明圈）
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：
(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和________。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是____________。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是______________。
(3)若用平板划线法获得纯净的菌株，请回答：
①．在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？________________。
②．除此接种方法之外，还常用_______________的接种方法来获得纯净的菌株。
正确答案
(1)氮源(碳源不作要求) 碳源 水和无机盐
(2)高压蒸汽灭菌
(3)①．划线结束后仍要灼烧接种环，以免菌种污染环境和感染操作者 ②．稀释涂布平板
下图为制作果酒、果醋的实验流程，请回答：
(1)制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应______________。
A．一直打开 B．打开并盖上一层纱布 C．定时拧松 D．一直拧紧
(2)写出由果酒酿制成果醋过程的总反应式：________________。
(3)从自然菌样中筛选较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用___________接种方法。
正确答案
(1)C
(2)
(3)平板划线法(或稀释涂布平板法)
下图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。
图中在________( 填图中编号) 区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是_________个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是_________(用编号表示)。
正确答案
②；1 ；①③②
(选做题)生物技术实践
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在乎板上产生______，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间的_______表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图：
Ⅰ中的主要成分为________；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为构建基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包括多次循环，每次循环包括三步：_______。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________。
(4)除植酸酶外，微生物还能应用在哪些酶的生产中？(至少写两种)
正确答案
(1)透明圈 植酸钠的消耗量(减少量)或磷酸(肌醇)的生成量(产量)
(2)小分子杂质 凝胶色谱法：根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法：根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化)
(3)变性、复性和延伸(长) 加热(或高温处理)
(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶
下表是某微生物培养基成分，据表回答下列问题。
(1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型是_______，判断依据是_________。
(2)若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基成分如何调整？_______，依据是____________。
(3)若表中培养基用于观察菌落形态，应增加的成分是_________。
(4)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，某些微生物仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加_____________。
(5)下列选项中属于该类物质的有________。(不定项选择)
A．某些维生素 B．某些氨基酸 C．酶 D．激素
正确答案
(1)自养；无有机碳源
(2)去除培养基的②成分，加入有机碳源。 自生固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源，但由于自生固氮菌是异养，培养基中还需加入有机碳源。
(3)琼脂
(4)生长因子
(5)(A、B)
谷氨酸是生物体内一种重要的有机小分子，谷氨酸钠是它的钠盐，是味精等调味品的主要成分。目前谷氨酸生产最常用的方法是利用微生物发酵。
(1)谷氨酸的R基为-CH2-CH2-COOH，其结构式为_____________。
(2)图甲中表示蛋白质生物合成过程中携带谷氨酸的一种转移RNA，与该谷氨酸对应的DNA片段的碱基顺序为_______________________。
(3)用于谷氨酸发酵的培养基通常由豆饼的水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等配制而成。这样的培养基从物理性质分析属于________培养基。由培养基的成分分析谷氨酸棒状杆菌的同化作用类型是_____________。如果谷氨酸发酵过程中产生了大量的乳酸，从发酵过程分析，其原因很可能是______________。
(4)根据乙图分析在谷氨酸发酵生产过程中，需要添加氨水，它不仅为细菌生长提供所需的________________，而且起到调节培养液______________的作用。
(5)用图丙中的发酵装置进行谷氨酸发酵可以大大提高产量，试阐述原因________________。
正确答案
(1)
(2)
(3)液体培养基 异养型 通气量不足（溶氧不足）
(4)氮源 pH
(5)保证微生物对营养物质的需求，排出部分代谢产物（或延长稳定期），使微生物保持较长时间的高速生长
阅读下列文字，回答以下问题：PCR是一种具有选择性的体外扩增DNA片段的方法。其特异性由两个人工合成的引物DNA序列决定。所谓引物是指与待扩增核酸片段两端互补的寡核苷酸，其本质是ssDNA(单链DNA)片段。
(1)PCR的引物为___________。
(2)现有一段DNA序列
(3)如果用32P对模板进行标记，扩增20次后，含标记的DNA分子占总数的_____________。
正确答案
(1)人工合成的一段DNA序列
(2)5′CAA―OH
(3)1/219
谷氨酸是生物体内一种重要的有机小分子，谷氨酸钠是它的钠盐，是味精等调味品的主要成分。目前谷氨酸生产最常用的方法是利用微生物发酵。
(1)谷氨酸的R基为—CH2—CH2—COOH，其结构式为________________。
(2)上图中甲图表示蛋白质生物合成过程中携带谷氨酸的一种转移RNA，与该谷氨酸对应的DNA片段的碱基顺序为______________。
(3)谷氨酸发酵的培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图中乙图所示。由此可以判断谷氨酸棒状杆菌的新陈代谢类型是_____________。如果谷氨酸发酵过程中产生了大量的乳酸，从生产流程分析，其原因很可能是__________________。
(4)谷氨酸发酵生产过程中，需要添加氨水，它不仅是细菌生长所需的________，而且起到调节培养液________的作用，所以应该分次加入。
(5)某厂的发酵液因被噬菌体污染，菌群死亡殆尽。而人们从中获得了少数可抵抗噬菌体的新菌种。细菌这种新性状的产生来自于_____________。
(6)用图中的发酵装置进行谷氨酸发酵可以大大提高生产效率，试阐述其中的两个原因______________。
正确答案
(1)
(2)
(3)异养、需氧型 通气量不足
(4)氮源 pH
(5)基因突变(或突变)
(6)①．保证微生物对营养物质的需求 ②．排出部分代谢产物 ③．使微生物保持较长时间的快速生长
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