- 蛋白质工程
- 共12题
请从以下2题中任选一题作答。
【生物-选修1:生物技术实践】(请回答37-39题)
生产果汁时,用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁量。回答下列相关问题:
【生物-选修3:现代生物科技专题】(请回答40-42题)
在体内,人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链,此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原,进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后,产生A、B两条肽链,再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前,利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题:
37.某同学用三种来源的果胶酶进行三组实验,各组实验除酶的来源不同外,其他条件都相同,测定各组的出汁量,据此计算各组果胶酶活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是____________。
38.现有一种新分离出来的果胶酶,为探究其最适温度,某同学设计了如下实验:取试管16支,分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液,混匀,平均分为4组,分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间,然后,测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有______和____________。
39.某同学取5组试管(A~E)分别加入等量的同种果泥,在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶,然后,补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同;E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后,测定各组的出汁量。通过A~D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中,若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量,E组设计___(填“能”或“不能”)达到目的,其原因是__________。
40.人体内合成前胰岛素原的细胞是_____,合成胰高血糖素的细胞是_____。
41.可根据胰岛素原的氨基酸序列,设计并合成编码胰岛素原的_____序列,用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体。再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成_____的基因工程菌。
42.用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,则用该工程菌进行工业发酵时,应从_____中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。
正确答案
探究不同来源果胶酶的活性
解析
根据题意,用三种不同的果胶酶进行三组实验,各组实验除酶的来源不同外,其他条件都相同,测定各组的出汁量,据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较,可见实验的自变量是果胶酶的来源不同,因变量是果胶酶的活性,所以该实验目的是探究不同来源果胶酶的活性。
考查方向
解题思路
从题意可知,只有果胶酶的来源不同,其余均相同,所以实验是探究不同来源的果胶酶的活性。
易错点
注意果胶酶处理的出汁量如何计算。
正确答案
4组的温度设置不合适 各组的酶促反应受两个不同温度影响
解析
根据实验设计可知,该实验是探究果胶酶的最适温度,所以自变量是温度,因变量是果胶酶的活性,用出汁量进行衡量,出汁量越多则果胶酶活性越高。该实验方案中,温度应该在常温范围内设置系列温度梯度且梯度差值相等,所以4组的温度应分别设置为15℃、20℃、25℃、30℃;另外探究温度对酶活性的影响时,应保证酶促反应只能在设定的温度下进行,同一实验组的反应温度只能是一个,所以实验操作应该是将各组盛有果胶酶的试管与盛有果泥的试管分别在设定温度下处理一定时间后再将两只试管混合,才能保证实验在设定的温度下进行。
考查方向
解题思路
为探究最适温度,通常预实验确定大致范围,然后再设置一定梯度进行相关实验。
易错点
注意应先预实验确定大致温度范围。
正确答案
不能 E组加入蒸馏水而不是缓冲液违背了单一变量原则
解析
根据题意,本实验的自变量是果胶酶的量,因变量是出汁量,对照实验的设计应遵循单一变量原则和对照原则,根据实验设置,通过A~D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量,则E组应加入缓冲液而不是蒸馏水,使试管中液体体积与实验组相同,才符合实验设计应遵循的单一变量原则。
考查方向
解题思路
本实验自变量是果胶酶的用量,其余条件即无关变量相同且适宜,对照原则。
易错点
注意单一变量原则。
正确答案
胰岛B细胞 胰岛A细胞
解析
由题意可知,前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素,人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞,所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞;合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。
考查方向
解题思路
胰岛A细胞分泌胰高血糖素,胰岛B细胞分泌胰岛素。
易错点
胰岛A、B细胞分泌的激素混淆。
正确答案
DNA 胰岛素原
解析
根据胰岛素原的氨基酸序列,可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列(即目的基因);用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体,再经过细菌转化、筛选及鉴定,即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。
考查方向
解题思路
通常根据胰岛素原的氨基酸序列,推测出信使RNA上的碱基组成,再反转录形成DNA分子。
易错点
基因控制蛋白质合成,基因可以复制的,而信使RNA不能。
正确答案
菌体
解析
根据题意,培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,所以用该工程菌进行工业发酵时,应从菌体中分离、纯化胰岛素原,经酶处理便可转变为胰岛素。
考查方向
解题思路
胰岛素原存在于菌体内,并没有分泌到培养液中。
易错点
分清胰岛素原处于的位置。
请考生从给出的3道物理题、3道化学题、2道生物题中每科任选一题做答。
39.为了获得月季花来提取精油,可以通过花直接提取,也可以通过植物组织培养,获得大量的细胞来提取,还可以通过基因工程,把相应的基因转移到微生物中,经过发酵后,从发酵液中提取。请回答:
(1)利用月季花进行直接提取时,常用( )法,加热时影响该方法产品的产量或品质的因素有( )。(任一合理因素即可)
(2)经月季花药组织培养,取( ) 期的花药培养至( )时,获得大量的细胞,然后用上一小题的方法进行提取。
(3)培养转基因酵母菌时,可接种到含有( )的培养基,用于抑制培养基内可能存在的细菌。培养到活菌数最多时提取产物,需要通过定期抽样来计数,由于2个或2个以上细胞连在一起,使活菌计数值有所偏低;显微镜直接计数时,由于( ),使活菌计数值有所偏高。
(4)配制培养酵母菌的培养基,马铃薯20g,葡萄糖2g,琼脂2g,水100ml,从化学成分上看,是( )培养基。由于不小心,标签掉了,又接种上月季的花药进行培养,除需要加入植物激素等营养物质外,在形成 ( )后,还需要增加光照。.
40.玉米中赖氨酸的含量较低,原因是赖氨酸合成过程中,天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响。为此,有人提出,将天冬氨酸激酶第352位苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶第104位天冬氨酸变成异亮氨酸,使玉米叶片和种子游离的赖氨酸分别提高5倍和2倍。请回答:
(1)上述材料中,赖氨酸的高产,是通过蛋白质工程来实现的,它通过基因修饰或合成,对现有蛋白质改造后形成的。除此外,还可通过 ( )育种,获得赖氨酸的高产,它是在 ( )等物理因素或亚硝酸、碱基类似物等化学因素下改变基因的碱基对排列顺序,经选育而得。
(2)在基因改造时,需要用到2种工具酶。其中一种酶,如:E•coli DNA连接酶,T4DNA连接酶,后者可以缝合双链DNA片段的 ( ) 末端。除工具酶外,还需要的工具有( ) 。
(3)将改造后的基因导入玉米时,常用( )法,它与常见的双子叶植物的导入方法不同。导入目的基因后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,还需要进行检测与鉴定,检测对象有( )(填一种合理的对象)。有时还要进行个体生物学水平的鉴定。
(4)进行上述基因改造后的玉米体细胞,通过( ) 技术得到高产赖氨酸的玉米植株。有人认为转基因植物可以通过花粉传播,会使周围植物受到基因污染,为此,他们建议导入的目的基因需整合在受体的 ( )上,而不是染色体。
39.为了获得月季花来提取精油,可以通过花直接提取,也可以通过植物组织培养,获得大量的细胞来提取,还可以通过基因工程,把相应的基因转移到微生物中,经过发酵后,从发酵液中提取。请回答:
(1)利用月季花进行直接提取时,常用 法,加热时影响该方法产品的产量或品质的因素有 。(任一合理因素即可)
(2)经月季花药组织培养,取 期的花药培养至 时,获得大量的细胞,然后用上一小题的方法进行提取。
(3)培养转基因酵母菌时,可接种到含有 的培养基,用于抑制培养基内可能存在的细菌。培养到活菌数最多时提取产物,需要通过定期抽样来计数,由于2个或2个以上细胞连在一起,使活菌计数值有所偏低;显微镜直接计数时,由于 ,使活菌计数值有所偏高。
(4)配制培养酵母菌的培养基,马铃薯20g,葡萄糖2g,琼脂2g,水100ml,从化学成分上看,是
培养基。由于不小心,标签掉了,又接种上月季的花药进行培养,除需要加入植物激素等营养物质外,在形成 后,还需要增加光照。.
40.玉米中赖氨酸的含量较低,原因是赖氨酸合成过程中,天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响。为此,有人提出,将天冬氨酸激酶第352位苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶第104位天冬氨酸变成异亮氨酸,使玉米叶片和种子游离的赖氨酸分别提高5倍和2倍。请回答:
(1)上述材料中,赖氨酸的高产,是通过蛋白质工程来实现的,它通过基因修饰或合成,对现有蛋白质改造后形成的。除此外,还可通过 育种,获得赖氨酸的高产,它是在 等物理因素或亚硝酸、碱基类似物等化学因素下改变基因的碱基对排列顺序,经选育而得。
(2)在基因改造时,需要用到2种工具酶。其中一种酶,如:E•coli DNA连接酶,T4DNA连接酶,后者可以缝合双链DNA片段的 末端。除工具酶外,还需要的工具有 。
(3)将改造后的基因导入玉米时,常用 法,它与常见的双子叶植物的导入方法不同。导入目的基因后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,还需要进行检测与鉴定,检测对象有
(填一种合理的对象)。有时还要进行个体生物学水平的鉴定。
(4)进行上述基因改造后的玉米体细胞,通过 技术得到高产赖氨酸的玉米植株。有人认为转基因植物可以通过花粉传播,会使周围植物受到基因污染,为此,他们建议导入的目的基因需整合在受体的 上,而不是染色体。
正确答案
正确答案
31.Ⅰ、抗菌肽是生物体内广泛存在用来抵御外来病原体的一类小分子蛋白质。它具有广谱抗菌活性。请回答下列问题:
(1)从免疫调节的方式上,抗菌肽的作用属于( )免疫。研究发现,抗菌肽可以在细菌细胞膜上穿孔而成离子孔道,从而改变细菌细胞膜的 ( ),导致细菌死亡。
(2)采用基因工程的方法人工合成抗菌肽时,首先根据其氨基酸排列顺序,用(
)的方法获得家蚕抗菌肽基因,该基因与家蚕体内原有的基因相比不具有( )。
(3)将该基因与( )结合导入大肠杆菌细胞中,再将重组大肠杆菌置于适宜条件下培养,当大肠杆菌的群体生长处于( )期时,细胞内会大量积累抗菌肽,这时就可以分离提取抗菌肽。
Ⅱ、右图是对一位患有胃瘘的妇女所进行的临床实验结果。
实验Ⅰ让该妇女吃麦片粥,但该妇女明显对麦片粥厌恶;
实验Ⅱ让该妇女吃自选喜欢的食物如新鲜蔬菜、炸鸡腿、蛋糕等。两次实验中食物经咀嚼后都没有进入胃内。
(1)实验Ⅱ胃液分泌量高于实验Ⅰ,说明( )会影响
低级神经中枢对胃液分泌的调节作用。
(2)把食物通过胃瘘灌入该妇女胃内,一段时间后有胃液分泌;若阻断神经联系,食物在胃内仍能引起少量胃液分泌,该实验结果说明( )。
(3)有人提出了胃泌素的假说,认为胃黏膜可分泌一种物质——胃泌素,能影响胃液的分泌。请探究胃泌素的作用。
①主要实验材料和用品:小鼠若干只、0.9%生理盐水、胃黏膜提取液。
②假设_________________________________________________。
③实验步骤
a.把生长发育相同的健康小鼠分成数量相等的甲、乙两组
b.甲组静脉注射一定浓度的胃黏膜液,乙组注射等量的0.9%生理盐水。
c.在相同且适宜的条件下饲养,观察并记录小鼠胃液的分泌状况。
④实验结果预测:
a.如果出现( ),假设成立 。
b.如果出现( ),假设不成立 。
正确答案
31.Ⅰ、(1)非特异性; 通透
(2)人工合成(化学合成) ; 非编码区和内含子
(3)运载体(质粒); 稳定
Ⅱ、(1)大脑
(2)胃液的分泌是由神经和体液共同调节(胃液分泌不仅有神经调节也有体液调节)
(3)②胃泌素能促进胃液的分泌(胃泌素能抑制胃液的分泌)
④a.甲组鼠胃液分泌量比乙组多
b.甲、乙组鼠胃液分泌量基本相当(或与另一种假设对应)
解析
解析已在路上飞奔,马上就到!
知识点
关于现代生物技术应用的叙述,错误的是
正确答案
解析
蛋白质工程是通过对基因进行一定程度的改造,进而合成新的蛋白质,以合乎人们的需求;植物组培中,由于茎尖几乎不含或少含病毒,因此可以培育出无病毒植株;在转基因动物的培育过程中,可利用动物细胞培养技术,使获得外源基因的受体细胞增殖。B项中的体细胞杂交技术,目前指向于植物体细胞杂交,由此获得杂种植株,要注意专业术语的指向。
知识点
黄曲霉毒素B1 (AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶,将该酶添加在饲料中可以降解AFB1,清除其毒性。
( 1 ) AFB1属于 类致癌因子。
( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上,使该位点受损伤变为G ' ,在DNA复制中,G '会与A配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后,该序列突变为 。
( 3 )下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图
据图回答问题:
① 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株,经测定,甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶:乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶,过程l 应选择 菌液的细胞提取总RNA ,理由是
② 过程Ⅱ中,根据图示,可以看出与引物结合的模版是
③ 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶,应采用 方法。
( 4 )选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料,探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表:
据表回答问题:
① 本实验的两个自变量,分别为 。
② 本实验中,反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。
③ 经测定,某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ,则每千克饲料应添加 克AFB1解毒酶,解毒效果最好,同时节的了成本。
(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是:从提高每的活性出发,设计语气的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的 。
正确答案
(1)化学
( 2 )
(3)①甲 因为甲菌液细胞含解毒酶,意味着完成了基因的表达,所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA
② cDNA. ③ 抗原-抗体杂交
(4)① AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。
② B组 ③ 5
(5)脱氧核苷酸序列。
解析
黄曲霉毒素B1 (AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶,将该酶添加在饲料中可以降解AFB1,清除其毒性。
( 1 ) 黄曲霉毒素B1(AFB1)是化学物质,AFB1属于化学类致癌因子。
( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上,使该位点受损伤变为G ' ,在DNA复制中,G '会与A配对。现有受损伤部位的序列为,经两次复制后,该序列突变为
(3)① 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株,经测定,甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶:乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶,过程l 应选择甲菌液的细胞提取总RNA ,理由是因为甲菌液细胞含解毒酶,意味着完成了基因的表达,所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA
② 过程Ⅱ中,根据图示,可以看出与引物结合的模版是cDNA.
③ 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶,应采用抗原-抗体杂交方法。
(4)① 本实验的两个自变量,分别为AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。
② 本实验中,反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是B组。
③ 经测定,某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ,则每千克饲料应添加5克AFB1解毒酶,解毒效果最好,同时节的了成本。
(5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是:从提高每的活性出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列。
知识点
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