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题型:简答题
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简答题 · 18 分

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖,自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程,请分析回答下列问题:

(1)将自然界中采集到的葡萄糖带回实验室,用___________________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,瓶中的液体经适当稀释后,用___________________方法接种于固体培养基上,在适宜的条件下培养,获得各种菌落。

(2)将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌______________________________________。从存活的酵母菌提取DNA,并用PCR技术大量扩增目的基因

(3)将目的基因连接到一种穿梭质粒(可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒)上。该质粒具有两种标记基因,即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后,应接种于含_______________________的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时,由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖,应选择缺乏_________________能力的酿酒酵母作为受体菌。从细胞结构看,酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是________________。

(4)对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试,结果如下图所示。

据图分析,将转基因酿酒酵母接种在_________为碳源的培养基中进行发酵能力测试,最初培养基中的____________糖被快速消耗,随着发酵继续进行,转基因酿酒酵母能够________________________________________________________,说明所需菌株培育成功。

正确答案

见解析。

解析

(1)无菌水    涂布

(2)不能利用木糖发酵(或缺乏木糖发酵途径)

(3)氨苄青霉素    尿嘧啶合成    有核膜包围的细胞核

(4)葡萄糖和木糖    葡萄    利用木糖产生酒精,并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响

知识点

微生物的分离和培养基因工程的应用
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题型: 单选题
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单选题 · 4 分

从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是

A合成编码目的肽的DNA片段

B构建含目的肽DNA片段的表达载体

C依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽

D筛选出具有优良火性的模拟肽作为目的肽

正确答案

C

解析

由题可知多肽P1为抗菌性强和溶血性也强的多肽,但是要设计出抗菌性强但溶血性弱的多肽,即在P1的基础之上设计出自然界原本不存在的蛋白质,应用蛋白质工程,依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽,即答案为C。

知识点

基因工程的应用
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题型:简答题
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简答题 · 15 分

已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产,乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此,可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内,使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。

回答下列问题:

(1)为了获得丙中蛋白质的基因,在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上,推测出丙中蛋白质的        序列,据此可利用        方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用        、        方法。

(2)在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中,常需使用

酶和        。

(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养,筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织,由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗        的危害。

(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则该植株的种子

(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。

正确答案

(1)基因 化学 基因文库 PCR

(2)限制  DNA连接

(3)乙种昆虫  

(4)不含

解析

(1)在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下,可根据氨基酸和碱基的对应关系,推出合成该蛋白质的基因序列,然后用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因。此外也可以从基因文库中获取目的基因,也可通过PCR方法获取目的基因。

(2)构建重组质粒时,需要用限制酶将运载体切开,并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上,从而构建基因表达载体。

(3)愈伤组织中含有丙蛋白,说明丙蛋白的基因得到了表达,在培养成的植株体内也含有丙蛋白,乙昆虫食用丙蛋白后会死亡,则该植株可抵抗乙昆虫的危害。

(4)直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,仅仅在该叶片内部分细胞中能合成丙蛋白,该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒,也就不含有丙中蛋白质的基因。

知识点

基因工程的原理及技术基因工程的应用
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题型: 单选题
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单选题 · 6 分

下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是

A根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目

B外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

C重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接

D放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置

正确答案

D

解析

本题考查细菌培养和DNA杂交等有关知识。菌落数只能大约推测出活菌数,不能准确计算活菌数,A错误;外源DNA作为一个完整的基因,自身含有启动子和终止子,B错误;DNA杂交是利用碱基互补配对原则进行的,C错误;因为放射性标记的DNA探针能与相应的DNA杂交,而产生放射自显影,而只有特定的DNA才与探针相结合,所以可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置,D正确。

知识点

基因工程的应用
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题型:简答题
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简答题 · 12 分

斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。利用转基因技术将绿色荧光蛋白基因(G)整合到斑马鱼17号染色体上,带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。具有纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。图1和图2所示分别为实验所用的质粒上相关酶切位点以及含绿色荧光蛋白基因(G)的外源DNA片段上具有的相关酶切位点。小水作者

(1)将绿色荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼17号染色体上的实验过程中,首先要将G基因与质粒重组,此过程需要的两种工具酶是                         。

(2)经筛选获得的重组质粒需要经显微注射到斑马鱼的     细胞中加以培养、筛选。如果培养得到的胚胎能          ,说明G基因已经成功整合到染色体上并且该基因已经得以表达。

(3)用图1中的质粒和图2外源DNA构建重组质粒,不能使用        切割,原因是                  。如果要防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,则应选择下列方法     为好。

①只使用EcoR I处理                 ②使用BamH I和Sma I同时处理

③使用BamH I和Hind III          ④使用Sma I和Hind III同时处理

(4)现用转基因个体N和个体M进行如下杂交实验得到的子代胚胎表现型如图3所示,推测亲代M的基因型是     。子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括   (选填选项前的序号,可多选)。①DDGG    ②DDGg    ③DdGg    ④DdGG

(5)杂交后,出现红·绿荧光(既有红色又有绿色荧光)胚胎的原因是             ,导致染色体上的基因重组。(提示:哪一亲本在什么生理过程中发生什么行为)

正确答案

(1)限制性核酸内切酶(限制酶)和DNA连接酶 

(2)受精卵(早期胚胎) 发出绿色荧光 

(3)SmaⅠ   SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因   ③

(4)Ddgg    ②、③

(5)亲代N的初级精(卵)母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的非姐妹染色单体发生了交换

解析


知识点

基因工程的应用
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