- 培养基成分及无菌技术
- 共460题
根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入______制成选择培养基进行分离：若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是______．
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是______，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是______．
（3）Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园，它的发现促成了PCR技术的自动这是因为它为PCR技术提供了______． PCR技术是DNA循环复制的过程每次循环可以分为______三步．
（4）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在______期，花药培养成功率高，为了挑选到此期的花药，通常选择______的花蕾．
（5）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是______；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是______．
正确答案
解：（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入有机磷农药 制成选择培养基进行分离：若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法．
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染（无菌技术），其中对培养皿进行灭菌常用的方法是干热灭菌法．
（3）Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园，它的发现促成了PCR技术的自动这是因为它为PCR技术提供了 耐高温的DNA聚合酶． PCR技术是DNA循环复制的过程每次循环可以分为变性、复性、延伸三步．
（4）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在单核靠边期，花药培养成功率高，为了挑选到此期的花药，通常选择 完全未开放 的花蕾．
（5）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏法；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是玫瑰精油与水分开．
故答案为：
（1）有机磷农药 稀释涂布平板法
（2）防止外来杂菌的污染（无菌技术） 干热灭菌法
（3）耐高温的DNA聚合酶 变性、复性、延伸
（4）单核靠边 完全未开放
（5）水蒸气蒸馏法 玫瑰精油与水分开
解析
解：（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入有机磷农药 制成选择培养基进行分离：若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法．
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染（无菌技术），其中对培养皿进行灭菌常用的方法是干热灭菌法．
（3）Taq细菌1966年被发现于美国黄石国家公园，它的发现促成了PCR技术的自动这是因为它为PCR技术提供了 耐高温的DNA聚合酶． PCR技术是DNA循环复制的过程每次循环可以分为变性、复性、延伸三步．
（4）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在单核靠边期，花药培养成功率高，为了挑选到此期的花药，通常选择 完全未开放 的花蕾．
（5）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏法；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是玫瑰精油与水分开．
故答案为：
（1）有机磷农药 稀释涂布平板法
（2）防止外来杂菌的污染（无菌技术） 干热灭菌法
（3）耐高温的DNA聚合酶 变性、复性、延伸
（4）单核靠边 完全未开放
（5）水蒸气蒸馏法 玫瑰精油与水分开
（1）培养含脲没细菌的培养基应以______为唯一氨源，并加入______指示剂加以鉴别，在接种前应采用______对培养基进行灭菌．
（2）如图所示该菌钝化培养结果，其采用的接种方法是______，图中______（填编号）区域出现了较多的单个菌落，通过该接种方法______（填“能”或“不能”）获得含脲酶细菌在土壤中的数量．
（3）用凝胶色谱法分离脲酶时，相对分子质量______的物质会较快从层析注中洗脱出来．
（4）为比较游离含脲酶和固定化含脲酶细菌的污水处理效率，研究人员用1g游离含脲酶细菌和1g固定化含脲酶细菌，分别加入到30mL含有浓度1%尿素的pH为7.5缓冲液中，37℃保温30分钟，通过检测溶液中______含量大小达到该目的．
正确答案
解：（1）培养含脲没细菌的培养基应以尿素为唯一氨源，并加入酚红指示剂，观察是否变红．在接种前应采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌．
（2）根据题意和图示分析可知：该菌钝化培养采用的接种方法是平板划线法，图中2区域出现了较多的单个菌落，通过该接种方法不能获得含脲酶细菌在土壤中的数量．
（3）由于分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，所以用凝胶色谱法分离脲酶时，相对分子质量较大的物质会较快从层析注中洗脱出来．
（4）为比较游离含脲酶和固定化含脲酶细菌的污水处理效率，研究人员用1g游离含脲酶细菌和1g固定化含脲酶细菌，分别加入到30mL含有浓度1%尿素的pH为7.5缓冲液中，37℃保温30分钟，通过检测溶液中氨或尿素含量大小，判断两者的污水处理效率．
故答案为：
（1）尿素 酚红 高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线法 2 不能
（3）较大
（4）氨或尿素
解析
解：（1）培养含脲没细菌的培养基应以尿素为唯一氨源，并加入酚红指示剂，观察是否变红．在接种前应采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌．
（2）根据题意和图示分析可知：该菌钝化培养采用的接种方法是平板划线法，图中2区域出现了较多的单个菌落，通过该接种方法不能获得含脲酶细菌在土壤中的数量．
（3）由于分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，所以用凝胶色谱法分离脲酶时，相对分子质量较大的物质会较快从层析注中洗脱出来．
（4）为比较游离含脲酶和固定化含脲酶细菌的污水处理效率，研究人员用1g游离含脲酶细菌和1g固定化含脲酶细菌，分别加入到30mL含有浓度1%尿素的pH为7.5缓冲液中，37℃保温30分钟，通过检测溶液中氨或尿素含量大小，判断两者的污水处理效率．
故答案为：
（1）尿素 酚红 高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线法 2 不能
（3）较大
（4）氨或尿素
【生物技术实践】
啤酒是我们日常生活中最常见的饮料之一．在啤酒生产过程中，发酵是重要环节．生产过程大致如下：将经过灭菌的麦芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌种后输入发酵罐．初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精浓度渐渐上升，泡沫不断增多．当糖度下降到一定程度后，结束发酵．最后分别输出有形物质和啤酒．根据上述过程，回答以下问题：
（1）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理．
步骤2：制备选择培养基．在基本培养基的基础上，注意______和______，加琼脂后灭菌，制成固体平板．
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板．
步骤4：根据______筛选出突变菌．
（2）上述步骤2、3和4的依据分别是______．
（3）酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是______．
（4）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH值，判断取样先后顺序的主要依据是______．
正确答案
解：（1）筛选耐高糖和耐酸特性的酵母菌，则应添加高浓度蔗糖（葡萄糖），调低pH，加琼脂后形成固体培养基，灭菌，制成固体平板，在恒温培养箱培养，根据是否能在选择培养基上生长筛选出突变菌．
（2）步骤2中添加高浓度蔗糖（葡萄糖），调低pH是为了提供高糖和酸性的筛选环境，步骤3稀释涂布平板是为了获得单个细菌繁殖而来的菌落，步骤4是为了筛选出能生长的具有耐高糖和耐酸的特性菌落．
（3）酵母菌是兼性厌氧性生物，在酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是隔绝空气．
（4）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况可通过pH值的大小来判定，酵母菌喜欢偏酸，故一般情况下pH值越小取样时间越靠后．
故答案为：
（1）添加高浓度蔗糖（葡萄糖） 调低pH值 是否能在选择培养基上生长
（2）提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性
（3）隔绝空气
（4）pH值的大小，pH值越小取样时间越靠后
解析
解：（1）筛选耐高糖和耐酸特性的酵母菌，则应添加高浓度蔗糖（葡萄糖），调低pH，加琼脂后形成固体培养基，灭菌，制成固体平板，在恒温培养箱培养，根据是否能在选择培养基上生长筛选出突变菌．
（2）步骤2中添加高浓度蔗糖（葡萄糖），调低pH是为了提供高糖和酸性的筛选环境，步骤3稀释涂布平板是为了获得单个细菌繁殖而来的菌落，步骤4是为了筛选出能生长的具有耐高糖和耐酸的特性菌落．
（3）酵母菌是兼性厌氧性生物，在酿酒过程中，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是隔绝空气．
（4）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况可通过pH值的大小来判定，酵母菌喜欢偏酸，故一般情况下pH值越小取样时间越靠后．
故答案为：
（1）添加高浓度蔗糖（葡萄糖） 调低pH值 是否能在选择培养基上生长
（2）提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性
（3）隔绝空气
（4）pH值的大小，pH值越小取样时间越靠后
（1）生物乙醇是以生物质为原料生产的可再生能源，工业上利用微生物将木屑、废纸（主要成分为木质纤维）转化为乙醇的基本工艺流程如图所示，筛选微生物X菌种的培养基中，应以______为唯一碳源，在培养基中加入______，并根据水解圈的大小来筛选微生物X．
（2）生物柴油是一种可再生的清洁能源，可从油料作物中提取植物油与甲醇在脂肪酶的催化下生成生物柴油，从微生物中提取脂肪酶通常需要检测______，为降低柴油生产成本，可利用______技术使脂肪酶能重复使用．
（3）野生资源减少，可以通过人工栽培增加产量．某农科院借助微型繁殖技术扩大了明党参的种植面积，这项技术不仅可以保持品种的______，而且可以______实现种苗的大量繁殖．栽培过程中，可对某优良变异植株进行单倍体育种处理．这种方法最大的优点是______．育种取材的关键是选取______期的花粉．
正确答案
解：（1）要筛选能分解木屑、废纸（主要成分为木质纤维）的微生物X菌种的培养基中，应以纤维素为唯一碳源，并在培养基中加入刚果红，根据水解圈的大小来筛选微生物X．
（2）分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值；可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶．
（3）野生资源减少，可以通过人工栽培增加产量．某农科院借助微型繁殖技术扩大了明党参的种植面积，这项技术不仅可以保持品种的遗传特性，而且可以高效快速实现种苗的大量繁殖．栽培过程中，可对某优良变异植株进行单倍体育种处理．这种方法最大的优点是明显缩短育种年限．育种取材的关键是选取单核期的花粉．
故答案为：
（1）纤维素 刚果红
（2）酶活性 固定化酶
（3）遗传特性 高效快速 明显缩短育种年限 单核
解析
解：（1）要筛选能分解木屑、废纸（主要成分为木质纤维）的微生物X菌种的培养基中，应以纤维素为唯一碳源，并在培养基中加入刚果红，根据水解圈的大小来筛选微生物X．
（2）分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值；可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶．
（3）野生资源减少，可以通过人工栽培增加产量．某农科院借助微型繁殖技术扩大了明党参的种植面积，这项技术不仅可以保持品种的遗传特性，而且可以高效快速实现种苗的大量繁殖．栽培过程中，可对某优良变异植株进行单倍体育种处理．这种方法最大的优点是明显缩短育种年限．育种取材的关键是选取单核期的花粉．
故答案为：
（1）纤维素 刚果红
（2）酶活性 固定化酶
（3）遗传特性 高效快速 明显缩短育种年限 单核
用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ）
正确答案
解析
解：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此牛肉膏蛋白胨培养基是对照组．对照组遵循的原则是单一变量，所以需要与选择培养基一样接种、培养．
故选：D．
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