- 培养基成分及无菌技术
- 共460题
葡萄洒、葡萄汁是日常生活中常用的一类饮料．在呈酸性的果汁发酵液中，红葡萄皮的色素也会进入发酵液中，且有酸碱指示剂的作用．据某些医学研究机构调查表明，适量饮用红葡萄酒、葡萄汁，对人体有着非同小可的意义．随着人们物质文化生活水平的提高，国内红葡萄酒、葡萄汁的产、销量均逐年增长．
请根据有关材料回答下列问题：
（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌．为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌．要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为______，如在培养基中加入______可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌．
（2）在微生物的实验室培养中常要进行消毒和灭菌的工作，常用的消毒方法有：______．灭菌是指______．
（3）为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁牛产中常用到______．
（4）为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术．酵母细胞的固定多采用______．请列出用干酵母和海藻酸钠制备同定化酵母细胞的步骤：
①酵母细胞的活化，②______，③______，④______，⑤______．
（5）现有a、b两个品牌颜色一样的红葡萄酒，其中a品牌是用100%红葡萄汁酿造，b品牌是以化学物质用人工方法勾兑而成．现提供小苏打、白醋、小烧杯若干，请设计一个实验鉴别两个品牌的红葡萄酒，得出正确结论并说明原理．
①步骤l：______
②步骤2：______
③结论：______
④原理：______．
正确答案
解：（1）要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为选择培养基，如在培养基中加入青霉素可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌．
（2）果胶酶能使果胶水解成半乳糖醛酸，是果汁变得澄清．
（3）实验室常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒和化学药剂消毒，但消毒只能杀死物体表面的微生物，不能杀死芽孢和孢子，灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子．
（4）酵母细胞的固定多采用包埋法，用干酵母和海藻酸钠制备同定化酵母细胞的步骤为酵母细胞的活化、配制（物质的量浓度为0.05mol/L的）CaCl2溶、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合和固定化酵母细胞．
（5）要鉴别两个品牌的红葡萄酒可通过对照实验来确定，具体步骤为取适量a品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第一组，另取等量b品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第二组，做好标签，第二步在每组两只烧杯中分别加入等量的小苏打、白醋，观察颜色变化，然后加小苏打，若出现颜色变化，则是a品牌，因为a品牌红葡萄酒中，含有红葡萄皮的色素，有酸碱指示剂的作用，加小苏打（碱性）会变颜色．
故答案为：
（1）选择培养基 青霉素（抗生素）
（2）①煮沸消毒法、②巴氏消毒法、③紫外线消毒、④化学药剂消毒 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
（3）果胶酶
（4）包埋法 ②配制（物质的量浓度为0.05mol/L的）CaCl2溶液，③配制海藻酸钠溶液，④海藻酸钠溶液与酵母细胞混合，⑤固定化酵母细胞
（5）（4分）①步骤1：取适量a品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第一组，另取等量b品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第二组，做好标签
②步骤2：每组两只烧杯中分别加入等量的小苏打、白醋，观察颜色变化
③结论：加小苏打出现颜色变化的是a品牌
④原理：a品牌红葡萄酒中，含有红葡萄皮的色素，有酸碱指示剂的作用，加小苏打（碱性）会变颜色
解析
解：（1）要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为选择培养基，如在培养基中加入青霉素可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌．
（2）果胶酶能使果胶水解成半乳糖醛酸，是果汁变得澄清．
（3）实验室常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒和化学药剂消毒，但消毒只能杀死物体表面的微生物，不能杀死芽孢和孢子，灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子．
（4）酵母细胞的固定多采用包埋法，用干酵母和海藻酸钠制备同定化酵母细胞的步骤为酵母细胞的活化、配制（物质的量浓度为0.05mol/L的）CaCl2溶、配制海藻酸钠溶液、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合和固定化酵母细胞．
（5）要鉴别两个品牌的红葡萄酒可通过对照实验来确定，具体步骤为取适量a品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第一组，另取等量b品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第二组，做好标签，第二步在每组两只烧杯中分别加入等量的小苏打、白醋，观察颜色变化，然后加小苏打，若出现颜色变化，则是a品牌，因为a品牌红葡萄酒中，含有红葡萄皮的色素，有酸碱指示剂的作用，加小苏打（碱性）会变颜色．
故答案为：
（1）选择培养基 青霉素（抗生素）
（2）①煮沸消毒法、②巴氏消毒法、③紫外线消毒、④化学药剂消毒 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
（3）果胶酶
（4）包埋法 ②配制（物质的量浓度为0.05mol/L的）CaCl2溶液，③配制海藻酸钠溶液，④海藻酸钠溶液与酵母细胞混合，⑤固定化酵母细胞
（5）（4分）①步骤1：取适量a品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第一组，另取等量b品牌红葡萄酒平均加入2只小烧杯中作为第二组，做好标签
②步骤2：每组两只烧杯中分别加入等量的小苏打、白醋，观察颜色变化
③结论：加小苏打出现颜色变化的是a品牌
④原理：a品牌红葡萄酒中，含有红葡萄皮的色素，有酸碱指示剂的作用，加小苏打（碱性）会变颜色
现代生物技术中常用到“筛选“方法．下列筛选能成功的是：（ ）
①在无N培养基上能筛选出硝化细菌②利用加有青霉素的培养基，能筛选出酵母③利用病菌（毒）侵染，能筛选出转基因抗病植物新品种④设置不同浓度梯度溶液培养农作物，可筛选出耐盐植物．
正确答案
解析
解：①利用无氮培养基可筛选出自生固氮菌．硝化细菌不能固氮，因此培养基中需要氮源，在无N培养基上硝化细菌不能生存，①错误；
②在该培养基中加入适量的青霉素和有机碳源，可筛选培养出酵母菌，②正确；
③转基因抗病植物新品种具有抗病菌（毒）基因，能产生相应的基因表达产物，因此基因工程中，在个体水平上，可利用病菌侵染对所育植物品种的抗病性进行筛选，③正确；
④在个体水平上，可以筛选抗盐的植物新品种，即在培养基中加入一定浓度的NaCl溶液，④正确．
故选：B．
分析有关科学探究的资料，回答问题．
原油含有大量“多环芳烃”，它是一种有害的、致癌的、诱发有机体发生突变的化合物，毒性很大，分子结构却很稳定，是当石油泄漏时所要面对解决的最大问题之一．有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈．当原油污染土壤后，如何筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污某小组同学以此为课题设计了有关实验．
实验过程：
（一）筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种
（1）步骤一：配置来源于______土壤稀释液，备用．
（2）步骤二：配置选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是______．
（3）步骤三：______
（4）实验结果与结论：______．
（二）选择高效利用多环芳烃为碳源的菌种：
（5）筛选实验步骤：______．
（6）实验结果与结论：______．
（三）菌种的产业化
（7）要用于生产实践，必须提供大量的高效利用多环芳烃菌种．生产上大量培养菌种的方法是______．
正确答案
解：（一）筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种
（1）步骤一：筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，则在被原油污染的土壤中应该含有，所以配置来源于被原油污染的土壤稀释液，备用．
（2）步骤二：配置选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油（多环芳烃）为唯一碳源．
（3）步骤三：接种：在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养上；培养：在适宜的温度等条件进行培养
（4）实验结果与结论：在选择性培养基形成的菌落，即为能利用多环芳烃为碳源的所需菌种．
（二）选择高效利用多环芳烃为碳源的菌种：
题干有个信息“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所以培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（5）筛选实验步骤：用接种环挑取上述培养基中的菌落，接种到选择性培养基中，将培养皿置于适宜的条件中培养，选择分解圈最大的菌落进行保存．
（6）实验结果与结论：培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（三）菌种的产业化
（7）要用于生产实践，必须提供大量的高效利用多环芳烃菌种．生产上大量培养菌种的方法是投入发酵罐大量增殖（或液体培养）．
故答案为：
（1）被原油污染的土壤
（2）以原油（多环芳烃）为唯一碳源
（3）接种：在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养上；培养：在适宜的温度等条件进行培养
（4）在选择性培养基形成的菌落，即为能利用多环芳烃为碳源的所需菌种．
（5）用接种环挑取上述培养基中的菌落，接种到选择性培养基中，将培养皿置于适宜的条件中培养，选择分解圈最大的菌落进行保存
（6）实验结果与结论：培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（7）投入发酵罐大量增殖（或液体培养）
解析
解：（一）筛选、获取能利用多环芳烃为碳源的菌种
（1）步骤一：筛选能够利用多环芳烃为碳源的菌种，则在被原油污染的土壤中应该含有，所以配置来源于被原油污染的土壤稀释液，备用．
（2）步骤二：配置选择性培养基，该培养基与通用培养基成分的主要区别是以原油（多环芳烃）为唯一碳源．
（3）步骤三：接种：在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养上；培养：在适宜的温度等条件进行培养
（4）实验结果与结论：在选择性培养基形成的菌落，即为能利用多环芳烃为碳源的所需菌种．
（二）选择高效利用多环芳烃为碳源的菌种：
题干有个信息“有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈”，所以培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（5）筛选实验步骤：用接种环挑取上述培养基中的菌落，接种到选择性培养基中，将培养皿置于适宜的条件中培养，选择分解圈最大的菌落进行保存．
（6）实验结果与结论：培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（三）菌种的产业化
（7）要用于生产实践，必须提供大量的高效利用多环芳烃菌种．生产上大量培养菌种的方法是投入发酵罐大量增殖（或液体培养）．
故答案为：
（1）被原油污染的土壤
（2）以原油（多环芳烃）为唯一碳源
（3）接种：在无菌环境下，将土壤稀释液接种到选择培养上；培养：在适宜的温度等条件进行培养
（4）在选择性培养基形成的菌落，即为能利用多环芳烃为碳源的所需菌种．
（5）用接种环挑取上述培养基中的菌落，接种到选择性培养基中，将培养皿置于适宜的条件中培养，选择分解圈最大的菌落进行保存
（6）实验结果与结论：培养基中分解圈大的菌落表明分解多环芳烃的能力最强，解决石油污染能力最强．
（7）投入发酵罐大量增殖（或液体培养）
下表是不同筛选的方法或结果，完全正确的一组是（ ）
正确答案
解析
解：A、用不同浓度的NaCl液处理不同品种杨树幼苗，能正常生长的幼苗为耐盐的杨树品种，A错误；
B、培养基以尿素为唯一氮源，同时添加酚红指示剂，可以筛选出土壤中能分解尿素的细菌，B正确；
C、基因工程中筛选含有目的基因的受体细胞是利用标记基因，但标记基因不一定是抗生素抗性基因，C错误；
D、筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞一般用抗原-抗体杂交的方法，D错误．
故选：B．
如图为通过花药培养月季花粉植株的一种途径．请回答下列相关问题．
（1）选择花药时，一般要通过______来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，一般来说，在______期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，通常选择______的花蕾，花药培养成功率最高．
（2）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成______，再将其诱导分化成植株．
（3）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌．若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入______指示剂培养几种细菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______染料，培养几种细菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌．在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，应采取的措施是______，观察结果，如果______，说明培养基制备成功，否则需要重新制备．
正确答案
解：（1）选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期；对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高．通常选择完全未开放的花蕾，花药培养成功率最高．
（2）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先脱分化形成愈伤组织，再诱导其分化成植株．
（3）鉴定其中是否含有尿素分解菌，可用酚红指示剂，即在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；鉴定其中是否含有纤维素分解菌，可用刚果红染料，即在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料培养几种菌后，培养基中出现现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌．在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，可将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养，观察结果，如果未接种的培养基无菌落生长，说明培养基制备成功，否则需要重新制备．
故答案为：
（1）镜检 单核 完全未开放
（2）愈伤组织
（3）酚红 刚果红 将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养 未接种的培养基无菌落生长
解析
解：（1）选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期；对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高．通常选择完全未开放的花蕾，花药培养成功率最高．
（2）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先脱分化形成愈伤组织，再诱导其分化成植株．
（3）鉴定其中是否含有尿素分解菌，可用酚红指示剂，即在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；鉴定其中是否含有纤维素分解菌，可用刚果红染料，即在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染料培养几种菌后，培养基中出现现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌．在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，可将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养，观察结果，如果未接种的培养基无菌落生长，说明培养基制备成功，否则需要重新制备．
故答案为：
（1）镜检 单核 完全未开放
（2）愈伤组织
（3）酚红 刚果红 将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养 未接种的培养基无菌落生长
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