- 微生物的分离和培养
- 共178题
25.漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是( )
正确答案
解析
生活污水中含有大量微生物,但不一定含有产漆酶的菌株,A错误;筛选生活污水中含有大量微生物,B正确;在涂布平板上长出的菌落,在通过划线进一步纯化,C正确;斜面培养基中含有大量营养物,可在低温下长期保存菌株,D错误。
考查方向
解题思路
微生物分离通常用选择固体培养基,纯化的方法通常有平板划线法和稀释涂布平板法。
易错点
注意分离和计数微生物所使用的接种方法不同。
知识点
下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
58.用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用______两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过__________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于__________________态的大肠杆菌。
59.为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加__________,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中_____________。
60.若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 ,对于该部位,这两种酶 (填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。
61.若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。
正确答案
BclI和HindⅢ 连接 感受
解析
选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点,但BamHI可能使质粒中启动子丢失,因此只能选BclI和HindⅢ。酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于感受态的大肠杆菌。
考查方向
解题思路
不同限制酶识别的碱基序列不同,切割位点不同,但粘性末端可能相同。
易错点
注意保持基因结构的完整性。
正确答案
四环素 引物甲和引物丙
解析
为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,根据质粒上的抗性基因,应在筛选平板培养基中添加四环素。PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合,沿相反的方向合成子链。
考查方向
解题思路
通过没有被破坏的标记基因进行筛选。
易错点
分清被破坏的抗性基因是否被破坏。
正确答案
都不能
解析
根据BamHI和Bcl I的酶切位点,BamHI酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为,与两种酶的酶切位点均不同。
考查方向
解题思路
根据BamHI和Bcl I的酶切位点,BamHI酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接。
易错点
分清不同限制酶识别的碱基序列和切出的粘性末端序列。
正确答案
7
解析
根据BamH 、Bcl I和Sau3A I的酶切位点,Sau3A I在质粒上有三个酶切位点,完全酶切可得到记为A、B、C三种片段,若部分位点被切开,可得到AB、AC、BC、ABC四种片段,所以用Sau3A I切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。
考查方向
解题思路
所有酶、一种酶等各种情况分别考虑即可。
易错点
注意是几种酶切的不同情况。
19. 做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是( )
正确答案
解析
高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,打开排气阀,再开启锅盖,A错误;倒平板时,应将打开的皿盖打开一缝隙,以免培养基溅到皿盖上,B错误;不能趁热挑取菌落,以免杀死微生物,C错误;用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D正确。
考查方向
解题思路
结合知识分析选项,作出判断
易错点
注意事项
知识点
人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。
为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题:
49.在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 (填序号)。
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水
50.在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。
51.向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是 。
52.刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。
53.研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4,在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵,理是 。
正确答案
(1)③
解析
稀释涂布平板法中,培养基位于培养皿中,无菌水用于稀释,涂布在酒精灯火焰旁进行,以免杂菌污染,所以该过程不需要使用显微镜。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
材料
正确答案
(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果
解析
(2)若涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量过多,则会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
原因
正确答案
(3)避免培养基污染棉塞
解析
(3)若试管口粘附有培养基,则需用酒精棉球擦净,以免培养基污染棉塞。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
原因
正确答案
(4)量与活性 ①
解析
有透明降解菌说明纤维素被纤维素酶催化降解,则降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关。降解圈越大,说明降解纤维素能力最强,由图可知,①菌落周围的降解圈最大,说明降解纤维素能力最强 。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
菌株的判断
正确答案
(5)J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高
解析
由于发酵过程中会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高,所以菌株J4更适合用于人工瘤胃发酵。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
原理
高中生物学实验中,以下操作对估测结果的数值准确性影响最大的一项是
正确答案
解析
略
知识点
扫码查看完整答案与解析