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简答题

下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程。请据图回答下列有关问题:

(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,那么在①过程中,应用限制酶______切割质粒,用限制酶______切割抗虫基因。①过程在______(体内/体外)进行。

(2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有______的培养基上,能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入,该培养基从功能方面属于________培养基。

(3)重组质粒导入大肠杆菌的目的是______________。

(4)经筛选分析,该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段,因此可以把它看做是杂合子。理论上该转基因植株自交产生的F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的_______________。

(5)⑤过程所用技术称为_________,从遗传学角度来看,根本原因是根细胞具有_____________。

正确答案

(1)Ⅱ   Ⅰ(Ⅰ和Ⅱ)   体外

(2)四环素   选择

(3)大量复制目的基因(抗虫基因)

(4)3/4

(5)植物组织培养   发育成完整个体的全部遗传物质

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简答题

科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如下图,请回答:

番茄软化过程培育示意图

(1)重组DNA的构建需要的工具酶有限制性核酸内切酶和__________。

(2)在构建基因表达载体时,除了要在重组DNA中插入目的基因外,还需要有启动子、终止子以及_____。

(3)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接导致了_______合成,最终使番茄获得了抗软化的性状。

(4)普通番茄细胞导入目的基因后,先要接种到诱导培养基上培养,脱分化后得到________,再转接到分化培养基上,诱导出试管后,然后进一步培养成正常植株。

正确答案

(1)DNA连接酶

(2)标记基因

(3)多聚半乳糖醛酸酶

(4)愈伤组织

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为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。

(1)该实验设计主要体现了__________________原则。

(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。

(3)根据表中数据,请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。

(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明显增多。

正确答案

(1)对照(单一变量)

(2)3   2

(3)

(4)GGATCT       CCTAGA

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应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题:

材料一:蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度,可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。

材料二:注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦,将疫苗藏身于水果蔬菜中,人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力,因而无需免疫接种,这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

(1)过程①⑤所需要的工具酶有____________,构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由_____________等部分组成。

(2)过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞,受体细胞应选择__________,采用最多的也是最有效的导入方法是____________;过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞,受体细胞可为___________,采用最多的导入方法是_____________。

(3)通过①~④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器,从___________中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器,从____________中提取所需蛛丝蛋白,简化提取过程。

正确答案

(1)限制酶和DNA连接酶;乙肝表面抗原蛋白基因、启动子、终止子、标记基因

(2)山羊的受精卵细胞;显微注射法;莴苣的体细胞或受精卵细胞;农杆菌转化法

(3)乳汁;尿液

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下图a表示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了检查运载体是否导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌(受体细胞),将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图b的结果(黑点表示菌落)。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的 位置)。据此分析并回答:

(1)pBR322质粒的化学本质是__________,其控制着___________等性状,质粒的复制必须在________中完成。

(2)根据用途,题中所用培养基属于_________,与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是______________,由此说明目的基因插入了______________中。

(3)基因工程的核心是___________。将目的基因与质粒重组中用到的工具酶是_________和___________。

(4)目的基因能与质粒重组的原因是__________________。

正确答案

(1)DNA抗氨苄青霉素和抗四环素 大肠杆菌(受体细胞)

(2)选择培养基 能抗氨苄青霉素,但不能抗四环素 Tetr

(3)基因表达载体的构建  限制性内切酶 DNA连接酶

(4)目的基因能与质粒具有相同的结构

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