- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示,质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:
(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶_______,对________进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有________,作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有_________,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________。
正确答案
(1)PstⅠ和EcoRⅠ 含抗病基因的DNA、质粒
(2)抗卡那霉素基因
(3)全能性 脱分化、再分化
红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(thEPO),其简要生产流程如图。
请回答:
(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是________,③所指的物质是_______。
(3)培养重组CHO细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换_______。
(4)检测thEPO的体外活性需用抗thEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的______细胞,可由thEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
正确答案
(1)PCR
(2)mRNA thEPO
(3)培养液
(4)杂交瘤
下列是有关基因工程和细胞工程的问题,请据图分析回答。
科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉,其过程大致如图所示。
(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内,原因是__________________。
(2)构建基因表达载体时用到的工具酶有________和___________。上述过程中,将目的基因导入棉花细胞内使用了__________法。检测目的基因是否成功转入受体细胞的方法是:_____________________。
(3)利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和传统的杂交育种方法,具有_____________和______________等突出的优点。
(4)由图中插入了目的基因的棉株细胞培养成抗虫棉需经过___________和____________过程。
正确答案
(1)组成细菌和植物的DNA分子的空间结构和化学组成相同
(2)限制性内切酶 DNA连接酶 农杆菌转化 DNA分子杂交技术
(3)目的性强 能有效地打破物种的生殖隔离界限
(4)脱分化 再分化
质粒是基因工程中常用的载体,存在于许多细菌及酵母菌等生物中。请根据实验原理和材料用具,设计实验选择载体,明确质粒的抗生素基因所控制的抗生素类别。
实验原理:作为载体的质粒必须有标记基因,这一标记基因可以是抗生素抗性基因,故凡有抗生素抗性的细菌,其质粒可以选作载体。
材料用具:青霉素溶液、10万单位/mL的四环素溶液、菌种、灭菌的含有细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱等。
方法步骤:
第一步:取三个灭菌的含细菌培养基的培养皿,编号1、2、3,在酒精灯旁,用三支注射器分别注入1毫升的蒸馏水、青霉素溶液和四环素溶液,并使其在整个培养皿表面均匀分布。
第二步:_________。
第三步:_________。
预期结果及结论:
(1)_____________。
(2)_____________。
(3)_____________。
(4)_____________。
正确答案
方法步骤:
第二步:将接种环在酒精灯上灼烧,并在酒精灯火焰旁对三个培养皿接种
第三步:将接种后的三个培养皿放入37℃恒温箱中24小时
预期结果及结论:
(1)1号培养皿中的细菌正常生长,2、3号培养皿中的细菌都不能存活,说明细菌无青霉素抗性基因,也无四环素抗性基因
(2)1号培养皿中的细菌正常生长2、3号中仅2号存活,说明该细菌有青霉素抗性基因
(3)1号培养皿中的细菌正常生长,2、3号仅3号存活,说明该细菌有四环素抗性基因
(4)1号培养皿中的细菌正常生长,2、3号中都能存活,说明该细菌质粒上有两种抗生素抗性基因
限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有限制酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点。
(1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。_____________________。
(2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。________________。
(3)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?____________________________________。
正确答案
(3)可以连接。因为由两种限制酶切割后所形成的黏性末端是相同的(或“是可以互补的”)
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