- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。
(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体,则该基因表达载体的组成包括_______、_______、_______、______等。
(2)科学家常采用_______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_______技术检测目的基因是否插入了番茄的基因组。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸,从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期,请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。
正确答案
(1)目的基因 启动子 终止子 标记基因
(2)农杆菌转化 DNA分子杂交
(3)蛋白质工程方法的步骤为:①.PG酶蛋白的功能分析;②.PG酶蛋白的结构预测和设计;③.PG酶基因的改造;④.改造后的基因表达出新蛋白。
盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一,中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因五个耐盐基因导入水稻,获得了一批耐盐转基因植株。请分析回答下列问题:
(1)水稻耐盐性状由_____个基因控制。
(2)获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____(填“a”或“b”)处。耐盐基因的载体是____。
(3)由导入耐盐基因的水稻细胞培养成植株需要利用________技术。
(4)从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可采用什么方法?_____________。
正确答案
(1)多
(2)a 农杆菌的质粒
(3)植物组织培养
(4)用一定浓度盐水浇灌水稻(将水稻移栽到盐碱地中)
限制性同切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
(1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
(2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
(3)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
正确答案
(1)
(2)
(3)能,由于黏性末端之间符合碱基互补配对原则,所以在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能连接起来
(选做题)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图:
请回答:
(1)过程①代表的是_________。
(2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用_______和_______两种工具酶。
(3)过程③采用的实验技术是________,获得的X是________。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行______比较;或用图中的________进行特异性结合检测。
正确答案
(1)逆(反)转录
(2)限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶(注:两空顺序可颠倒)
(3)细胞融合 杂交瘤细胞
(4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体
棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死,而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法,科学家采用花粉粒通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达,棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡。花粉粒通道法是指:利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊,近而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞,借助天然的种胚系统,形成含有目的基因的种胚。
(1)下列所示的黏性末端是由_______________种限制性内切酶作用产生的。
(2)利用花粉粒通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞,此过程是基因操作的基本步骤中的第三步,即 _________________________。
(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与运载体结合,目前经常使用的运载体有_______、噬菌体和动植物病毒。
(4)检测该目的基因是否表达的方法是___________________。
正确答案
(1)4
(2)将目的基因导入受体细胞
(3)质粒
(4)让害虫吃棉花,观察害虫的生存状态
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