热门试卷

在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：

(1)A过程需要的酶有________________。

(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是________、_______。

(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。

(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用____________________作为探针。

(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①．将转基因植株与______杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②．若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。

③．若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_________%。

科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。如图，请据图回答问题：

(1)此图表示的是采取_______合成基因的方法获取______基因的过程。

(2)图中①DNA是以______为模板，_______形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的_______基因。

(3)图中②代表的是_______，在它的作用下将质粒(______DNA)切出_______末端。

(4)图中③代表________DNA含有___________。

(5)图中④表示将________；⑤表示DNA随大肠杆菌的繁殖而进行__________。

(6)如果重组DNA在大肠杆菌中没有成功表达，分子水平的检测包括哪三个步骤______、______和_____。

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。

请根据上述资料，回答下列问题：

(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？________。PCR扩增DNA时必须加入引物，其作用是_____________。

(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是________________。

(3)构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用_________酶对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的___________键打开。

(4)质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是________，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

(5)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入_______________可将变异株细胞筛选出来。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点。下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答。

(1)在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶_______，分别对_______进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_______种。

(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有_______，作为标记基因。

(3)研究人员通常采用______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用_______技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的________________。