- 微生物的接种方法
- 共101题
(选做题)生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。
(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用_______、_______方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供______,培养基灭菌采用的最适方法是________法。
(3)测定培养液中微生物数量,可选用________法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的__________技术。
正确答案
(1)压榨 萃取(注:两空顺序无先后)
(2)碳源 高压蒸汽灭菌
(3)显微镜直接计数 酶活性(或:酶活力) 固定化酶(或: 固定化细胞)
(4)PCR(或:多聚酶链式反应,聚合酶链式反应)
下表是某微生物培养基成分,据表回答下列问题。
(1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型是___________,判断依据是_________。
(2)若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌,该培养基成分如何调整?_________,依据是___________________。
(3)若表中培养基用于观察菌落形态,应增加的成分是____________。
(4)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,某些微生物仍然不能正常生长,还需要在培养基中添加_____________。下列选项中属于该类物质的有________。(不定项选择)
A.某些维生素 B.某些氨基酸 C.酶 D.激素
正确答案
(1)自养;无有机碳源
(2)去除培养基的②成分,加入有机碳源;自生固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源,但由于自生固氮菌是异养,培养基中还需加入有机碳源。
(3)琼脂
(4)生长因子;AB
下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果:
培养基成分:NaNO3:2g;K2HPO4:1g;KCl:0.5g;MgSO4:0.5g;FeSO4:0.01g;蔗糖:30g;琼脂:15g~20g;蒸馏水:1000mL。
A.实验目的:略。
B.实验材料和用具:略。
C.实验方法和步骤:
(1)接种:
①接种前,准备好上述配方的培养基,放入培养皿中并灭菌,供实验用。
②取10g土壤,放在无菌研钵中,注入5mL蒸馏水,并用无菌玻璃棒搅拌均匀,备用。
③将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。将培养皿盖轻轻放在桌面上,手拿培养皿。将接种环放在培养基边缘处冷却。然后,用接种环蘸取少许泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上,共点接15~20处。
④接种后,轻轻地盖上培养皿盖,将培养皿放在实验桌上。
(2)培养:将接过种的培养皿放人恒温箱内,在28℃~30℃的温度下培养3d~4d。
(3)观察:3d~4d后,取出培养皿,仔细观察培养基上的菌落,其中大而扁、边缘呈现波状或锯齿状并为褐色的菌落为自生固氮菌。
(4)镜检:略。该实验方案和观察结果中有几处明显错误,请指出错误并改正。(至少找出三处)
正确答案
Ⅰ.培养基的配方中含有氮源是错误的,应将NaNO3改为不含N的钠盐;
Ⅱ.实验步骤接种②中用蒸馏水是错误的,应改为无菌水;
Ⅲ.实验步骤接种③中将培养皿盖放在桌面上是错误的,应改为略微打开培养皿盖;
Ⅳ.实验步骤接种④中没有写实验内容、接种人的姓名和接种日期,应在接种步骤④的后面加上“并在皿盖上写明实验内容、接种人的姓名和接种日期”;
Ⅴ.实验步骤观察中“仔细观察培养基上的茵落,其中大而扁、边缘呈现波状或锯齿状并为褐色的茵落”是错误的,应改为“仔细观察培养基上稀泥浆周围出现的黏液。黏液初为无色透明,以后为乳白色,最后变为褐色”。
富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物的生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。
(1)本实验所需培养基为_________,碳源为___________。
(2)实验原理是________________。
(3)①~③重复培养的目的是___________。
(4)⑤的菌落中大部分是降解____________的微生物。
(5)⑥为______组,⑦为______组,设置⑥的目的是____________。
(6)⑤→⑥采用______法,接种到⑥的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是__________。
正确答案
(1)选择培养基 对羟基苯甲酸
(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基,经富集培养,选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物
(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例
(4)对羟基苯甲酸
(5)对照 实验 说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物
(6)单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌,烧红的接种环在空气中冷却,同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中,并塞好棉塞,接种环在火焰上灼烧,杀死残留菌
果酒、面包制作等都需要酵母菌,酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养,培养液中酵母菌种群的增长情况与发酵食品的制作有密切关系。
(1)土壤是酵母菌的大本营,若从自然界分离得到的样品中含有谷氨酸棒状杆菌、硝化细菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌等,现欲筛选出酵母菌,则简便的方案是____。
(2)某生物兴趣小组的同学在不同的条件下,观察酵母菌种群的生长情况。下表中的数据是在有氧情况下培养测得的酵母菌数(×106个/mL)。请根据所学的知识,回答下列有关问题:
实验研究的条件如下:
A:培养液10mL,加入干酵母液0.1mL,环境温度28℃。
B:无菌水10mL,加入干酵母液0.1mL,环境温度28℃。
①.请写出该实验的课题名称:_________________。
②.本实验过程中,每隔24小时取一定量的酵母菌培养液,用血球计数板在显微镜下进行细胞计数,并以多次计数的平均值估算试管中酵母菌的种群密度,这种方法称为________。每次取样前都应振荡试管,目的是使________。如果视野太暗导致看不清晰,应当采取的措施是___________。
③.A组测定的数据中,培养一天和培养六天的酵母菌数均为0.8×l06个/mL,你认为其生长情况相同吗?________,理由是________________。
(3)目前,我国已经利用酵母菌实现了乙肝疫苗、干扰素的商业化生产。在这些技术中使用的工具酶是______。在实际应用中发现,用真菌(酵母菌)生产的基因工程药物(如干扰素)要比用细菌生产的功效好。请从这两类生物细胞结构的相关差异说明原因:__________________。
正确答案
(1)在培养基中加入青霉素或无氧状态培养
(2)①.营养物质对酵母菌种群增长的影响
②.取样调查法 试管中酵母茵分布均匀,减少计数误差 增大光圈或将平面镜改为凹面镜
③.不相同 培养一天和培养六天的酵母茵分别处于调整期和衰亡期
(3)限制性内切酶和DNA连接酶 真菌(酵母菌)细胞有很多细胞器,高尔基体、内质网能将核糖体合成的蛋白质进行加工,与人体内的蛋白质合成过程更相似
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