- DNA和蛋白质技术
- 共447题
萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA？某生物小组对此进行研究，他们从网上查阅资料得知：①蛋白质在10%NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；③DNA溶于10%NaCl溶液但在95%酒精中呈白色絮状沉淀，析出．
实验材料：白萝卜．
实验用具：粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻棒、镊子、载玻片、天平、纱布．
药品及试剂：蒸馏水、NaCl、95%酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品．
请你根据所提供的条件参与实验设计并完成实验．
一、材料处理：______
二、提取：______
三、鉴定及结果：______
四、讨论：
（1）蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用是______．
（2）DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的______．
正确答案
解：该实验的原理是，DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小．提取较纯净的DNA时可加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出．DNA溶液中加入二苯胺试剂加热后才会变成蓝色．
一、材料处理：称取50g萝卜冼净切块，加水30ml，粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤．
二、提取：
（1）向经纱布过滤得到的滤液中加入10%NaCl，直至沉淀析出．经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1ml蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定．
（2）除去蛋白质的滤液中，加入95%酒精，用玻棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于DNA鉴定．
三、鉴定及结果：
（1）在用于蛋白质鉴定的试验试管中，加入双缩脲试剂，产生呈色反应，同时将蛋白质标准样品和1ml蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生呈色反应．观察到两试管中颜色基本一致，说明试验试管中有蛋白质存在．
（2）在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈现蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA．
（3）通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明有蛋白质和DNA的存在．
四、讨论：
（1）蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用是，蛋白质是细胞膜等生物膜的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分．
（2）DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的细胞核中，少量存在于细胞质中．
故答案为：
一、材料处理
（1）称取50g萝卜冼净切块，加水30ml，粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤
二、提取
（1）向经纱布过滤得到的滤液中加入10%NaCl，直至沉淀析出．经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1ml蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定
（2）除去蛋白质的滤液中，加入95%酒精，用玻棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于DNA鉴定
三、鉴定及结果
（1）在用于蛋白质鉴定的试验试管中，加入双缩脲试剂，产生呈色反应，同时将蛋白质标准样品和1ml蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生呈色反应．观察到两试管中颜色基本一致，说明试验试管中有蛋白质存在
（2）在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈现蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA
（3）通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明有蛋白质和DNA的存在
四、讨论
（1）是细胞膜等生物膜的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分
（2）细胞核
解析
解：该实验的原理是，DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小．提取较纯净的DNA时可加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出．DNA溶液中加入二苯胺试剂加热后才会变成蓝色．
一、材料处理：称取50g萝卜冼净切块，加水30ml，粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤．
二、提取：
（1）向经纱布过滤得到的滤液中加入10%NaCl，直至沉淀析出．经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1ml蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定．
（2）除去蛋白质的滤液中，加入95%酒精，用玻棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于DNA鉴定．
三、鉴定及结果：
（1）在用于蛋白质鉴定的试验试管中，加入双缩脲试剂，产生呈色反应，同时将蛋白质标准样品和1ml蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生呈色反应．观察到两试管中颜色基本一致，说明试验试管中有蛋白质存在．
（2）在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈现蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA．
（3）通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明有蛋白质和DNA的存在．
四、讨论：
（1）蛋白质在萝卜贮藏根组织细胞中所起的作用是，蛋白质是细胞膜等生物膜的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分．
（2）DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的细胞核中，少量存在于细胞质中．
故答案为：
一、材料处理
（1）称取50g萝卜冼净切块，加水30ml，粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤
二、提取
（1）向经纱布过滤得到的滤液中加入10%NaCl，直至沉淀析出．经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1ml蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定
（2）除去蛋白质的滤液中，加入95%酒精，用玻棒轻轻搅拌，见有白色絮状沉淀产生，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于DNA鉴定
三、鉴定及结果
（1）在用于蛋白质鉴定的试验试管中，加入双缩脲试剂，产生呈色反应，同时将蛋白质标准样品和1ml蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生呈色反应．观察到两试管中颜色基本一致，说明试验试管中有蛋白质存在
（2）在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，DNA呈现蓝绿色，说明该白色絮状沉淀为DNA
（3）通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明有蛋白质和DNA的存在
四、讨论
（1）是细胞膜等生物膜的结构成分，酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分
（2）细胞核
（1）血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有______功能．
（2）甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是______；乙装置中，C溶液的作用是______．
（3）甲装置用于______，目的是______．用乙装置分离蛋白质的方法叫______，是根据______分离蛋白质的有效方法．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待______时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括______、______、收集血红蛋白溶液．
正确答案
解：（1）红细胞中含有血红蛋白，血红蛋白可以运输氧，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能．
（2）由血红蛋白提取和分离的实验原理可知，甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是磷酸缓冲液，抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定；乙装置中，C溶液的作用是洗脱血红蛋白．
（3）甲装置用于透析，目的是去除样品中分子量较小的杂质．用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，分子量大的，流动快．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括、红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、收集血红蛋白溶液四个步骤．
故答案为：
（1）运输
（2）（磷酸）缓冲液 洗脱血红蛋白
（3）透析（粗分离） 去除样品中分子量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小
（4）红色的蛋白质接近色谱柱底端
（5）红细胞的洗涤 血红蛋白的释放
解析
解：（1）红细胞中含有血红蛋白，血红蛋白可以运输氧，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能．
（2）由血红蛋白提取和分离的实验原理可知，甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是磷酸缓冲液，抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定；乙装置中，C溶液的作用是洗脱血红蛋白．
（3）甲装置用于透析，目的是去除样品中分子量较小的杂质．用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，分子量大的，流动快．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括、红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、收集血红蛋白溶液四个步骤．
故答案为：
（1）运输
（2）（磷酸）缓冲液 洗脱血红蛋白
（3）透析（粗分离） 去除样品中分子量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小
（4）红色的蛋白质接近色谱柱底端
（5）红细胞的洗涤 血红蛋白的释放
红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳．我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：______、______、______和______．
（2）第一步即是样品处理，它包括______、______、分离血红蛋白溶液．
（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中进行透析，这就是样品的粗分离．透析过程中为了较为彻底地除去样品中的小分子杂质，可以采用______的方法．
（4）然后通过______将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．血红蛋白有什么特点？______．这一特点对进行蛋白质的分离纯化有什么意义？______．
正确答案
解：（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）第一步即是样品处理，它包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液．
（3）①透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白，为了较为彻底地除去样品中的小分子杂质，可以采用反复透析的方法．
（4）样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，血红蛋白呈红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作程序．
故答案为：
（1）样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）红细胞的洗涤、血红蛋白的释放
（3）反复透析（多次更换透析液）
（4）凝胶色谱法 血红蛋白呈现红色 血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集流出液（待红色蛋白质接近色谱柱底端时收集流出液）
解析
解：（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）第一步即是样品处理，它包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液．
（3）①透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白，为了较为彻底地除去样品中的小分子杂质，可以采用反复透析的方法．
（4）样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，血红蛋白呈红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作程序．
故答案为：
（1）样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）红细胞的洗涤、血红蛋白的释放
（3）反复透析（多次更换透析液）
（4）凝胶色谱法 血红蛋白呈现红色 血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集流出液（待红色蛋白质接近色谱柱底端时收集流出液）
（1）血红蛋白提取和分离的程度可分为四步：______、______、______和纯度鉴定．
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为4层：第一层为无色透明的______，第二层为______白色薄层固体，是物质的沉淀层，第三层是红色透明液体，是______的水溶液，第四层是其他杂质的暗红色沉淀物．
（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离．
①透析的目的是______．②透析的原理是______．
（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．
下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入（图I）和洗脱（图Ⅱ）示意图，请据图回答下列问题．
a．在加样示意图中，正确的加样顺序是______．
b．用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①待缓冲液降到与凝胶面齐平再加样．②贴着管壁加样______．
c．等样品完全进入凝胶后，才加入缓冲液洗脱．待______接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
①品纯化目的是______．
②血红蛋白呈现红色，这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？______．
正确答案
解：（1）血红蛋白提取和分离步骤：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为4层：第一层为无色透明的甲苯层，第二层为脂溶性物质的白色薄层固体，是物质的沉淀层，第三层是红色透明液体，是血红蛋白的水溶液，第四层是其他杂质的暗红色沉淀物．
（3）透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此透析可以去除相对分子质量较小的杂质．
（4）a．加样和洗脱的具体过程为：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质，因此正确的加样顺序是②①④③．
b．用吸管加样时，应注意正确操作，分别是：①待缓冲液降到与凝胶面齐平再加样．②贴着管壁加样，不要破坏凝胶面．
c．①品纯化目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去．
②血红蛋白呈现红色，因此可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这也使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作．
故答案为：
（1）样品处理；粗分离；纯化；纯度鉴定
（2）甲苯层；脂溶性物质；血红蛋白；
（3）①去除分子质量较小的杂质②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
（4）a、②①④③b、③不要破坏凝胶面 c、红色蛋白质
①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
②可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液；这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作．
解析
解：（1）血红蛋白提取和分离步骤：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．
（2）分离血红蛋白溶液时，将混合液离心后可看到试管中的液体分为4层：第一层为无色透明的甲苯层，第二层为脂溶性物质的白色薄层固体，是物质的沉淀层，第三层是红色透明液体，是血红蛋白的水溶液，第四层是其他杂质的暗红色沉淀物．
（3）透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此透析可以去除相对分子质量较小的杂质．
（4）a．加样和洗脱的具体过程为：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质，因此正确的加样顺序是②①④③．
b．用吸管加样时，应注意正确操作，分别是：①待缓冲液降到与凝胶面齐平再加样．②贴着管壁加样，不要破坏凝胶面．
c．①品纯化目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去．
②血红蛋白呈现红色，因此可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这也使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作．
故答案为：
（1）样品处理；粗分离；纯化；纯度鉴定
（2）甲苯层；脂溶性物质；血红蛋白；
（3）①去除分子质量较小的杂质②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
（4）a、②①④③b、③不要破坏凝胶面 c、红色蛋白质
①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
②可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液；这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作．
如图表示血红蛋白提取和分离实验的部分装置或操作方法，请回答下列问题：
（1）血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要成分，我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是______．
（2）如图甲表示______过程，该操作目的是去除样品中分子量（大或小）______的杂质．
（3）如图乙，往色谱柱中加样的正确操作顺序是______（用序号表示）．在进行④操作前，应该等样品______，且要______（填“打开”或“关闭”）下端出口．
（4）如图丙，a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是______，原因是______．
正确答案
解：（1）血红蛋白提取和分离实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）图甲表示血红蛋白的透析过程，即血红蛋白的粗分离，目的是去掉分子量较小的杂质．
（3）正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是②③④①；在进行④操作前，应该等样品完全进入凝胶层，且要 关闭下端出口．
（4）a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，所以a先从层析柱中洗脱出来．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）透析（粗分离） 分子量较小
（3）②③④①完全进入凝胶层 关闭
（4）a a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快
解析
解：（1）血红蛋白提取和分离实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）图甲表示血红蛋白的透析过程，即血红蛋白的粗分离，目的是去掉分子量较小的杂质．
（3）正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是②③④①；在进行④操作前，应该等样品完全进入凝胶层，且要 关闭下端出口．
（4）a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，所以a先从层析柱中洗脱出来．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）透析（粗分离） 分子量较小
（3）②③④①完全进入凝胶层 关闭
（4）a a相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快
某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如图1：
试回答下列有关问题：
（1）样品处理中红细胞的洗涤要用______反复冲洗、离心．向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是______．
（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是______．
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的______等的差异，而产生不同的迁移速度，实现各种分子的分离．
（4）一同学通过血红蛋白醋酸迁维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示．由如图2可知携带者有______种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释______．
正确答案
解：（1）样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心．向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）．
（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去小分子杂质．
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同的迁移速度，实现各种分子的分离．
（4）由如图2可知携带者有2种血红蛋白，因为携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质．
故答案为：
（1）生理盐水 渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）
（2）除去小分子杂质 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液
（3）带电性质以及分子大小、形状
（4）2 携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质
解析
解：（1）样品处理中红细胞的洗涤要用生理盐水反复冲洗、离心．向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）．
（2）血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去小分子杂质．
（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异，而产生不同的迁移速度，实现各种分子的分离．
（4）由如图2可知携带者有2种血红蛋白，因为携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质．
故答案为：
（1）生理盐水 渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）
（2）除去小分子杂质 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液
（3）带电性质以及分子大小、形状
（4）2 携带者具有（控制血红蛋白的）一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质
血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2的运输．请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题．
（1）血红蛋白的提取方法可以采用______法．将实验流程补充完整：B为______．
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，洗涤干净的标志是______．释放血红蛋白的过程中起作用的是______．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的______液的目的是准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是______．
正确答案
解：（1）血红蛋白的提取的常用方法是凝胶色谱法．图中A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱．
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，当离心后的上清液中没有黄色，说明洗涤干净了．在释放血红蛋白的过程中需要加入蒸馏水和甲苯．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的磷酸缓冲液可以模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）相对分子质量大的物质，无法进入凝胶珠中的通道孔，只能留在凝胶珠之间的空隙中，图中a分子大，所以a先出来．
故答案为：
（1）凝胶色谱法 样品的加入和洗脱
（2）离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯
（3）磷酸缓冲
（4）a
解析
解：（1）血红蛋白的提取的常用方法是凝胶色谱法．图中A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱．
（2）洗涤红细胞的目的是去除血浆蛋白，当离心后的上清液中没有黄色，说明洗涤干净了．在释放血红蛋白的过程中需要加入蒸馏水和甲苯．
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/的磷酸缓冲液可以模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致．
（4）相对分子质量大的物质，无法进入凝胶珠中的通道孔，只能留在凝胶珠之间的空隙中，图中a分子大，所以a先出来．
故答案为：
（1）凝胶色谱法 样品的加入和洗脱
（2）离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯
（3）磷酸缓冲
（4）a
红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：______、______、______和______．
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．
①加入柠檬酸钠的目的是______
②以上所述的过程即是样品处理，它包括______、______、______、透析．
（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离．
①透析的目的是______②透析的原理是______
（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定．样品纯化的目的是______
（5）提取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞，原因是：______．
正确答案
解：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步．
（2）样品处理过程分为红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析四步，实验前取新鲜的血液时，在采血容器中应预先加入柠檬酸钠，以防止血液凝固．
（3）血红蛋白的粗分离是通过透析完成的，透析的目的是除去分子量较小的杂质，原理是透析袋是半透膜，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内．
（4）样品纯化是通过凝胶色谱法除去分子量大的杂蛋白．
（5）由于哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，提取的细胞膜相对单一，只有细胞膜，因此取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞．
故答案为：
（1）样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定
（2）①防止血液的凝固②红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 分离血红蛋白溶液
（3）①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去 ②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内
（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
（5）因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯
解析
解：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步．
（2）样品处理过程分为红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析四步，实验前取新鲜的血液时，在采血容器中应预先加入柠檬酸钠，以防止血液凝固．
（3）血红蛋白的粗分离是通过透析完成的，透析的目的是除去分子量较小的杂质，原理是透析袋是半透膜，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内．
（4）样品纯化是通过凝胶色谱法除去分子量大的杂蛋白．
（5）由于哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，提取的细胞膜相对单一，只有细胞膜，因此取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞．
故答案为：
（1）样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定
（2）①防止血液的凝固②红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 分离血红蛋白溶液
（3）①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去 ②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内
（4）通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
（5）因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯
血液中含有钙，它与血液凝固有关，如果设法除去血液中的钙，可阻止血液凝固．（柠檬酸钠能去除血液中的钙）．请你协助设计一份探究计划，证明这一结论．
（1）探究的问题：______？
（2）做出的假设：______．
（3）材料器具：试管架、试管2支、标签2张、新鲜动物血液、柠檬酸钠溶液、生理盐水．
（4）实验步骤：
①先用标签“甲”和“乙”对两支试管进行编号．
②在“甲”试管中加入少量柠檬酸钠，“乙”试管中______．
③取新鲜动物血液10mL，在两支试管中各加入5mL，并轻轻震荡，然后将试管静置于试管架上．
④15分钟后，可见“甲”试管中的血液______，“乙”试管中血液______．
⑤实验结论：______．
正确答案
解：（1）根据“血液中含有钙，它与血液凝固有关，如果设法除去血液中的钙，可阻止血液凝固”可知，实验探究的问题是钙对血液凝固有没有影响？
（2）根据探究的问题做出的假设为钙对血液凝固有影响．
（4）实验步骤：
②根据实验材料和单一变量原则，在“甲”试管中加入少量柠檬酸钠，则“乙”试管中应该加等量的生理盐水，作为对照．
④由于在“甲”试管中加入少量柠檬酸钠（抗凝剂），所以“甲”试管中的血液不凝固，而“乙”试管中血液凝固．
⑤根据以上实验结果说明钙对血液凝固有关．
故答案为：
（1）钙对血液凝固有没有影响
（2）钙对血液凝固有影响
（4）②加等量的生理盐水
④不凝固 凝固
⑤钙对血液凝固有关
解析
解：（1）根据“血液中含有钙，它与血液凝固有关，如果设法除去血液中的钙，可阻止血液凝固”可知，实验探究的问题是钙对血液凝固有没有影响？
（2）根据探究的问题做出的假设为钙对血液凝固有影响．
（4）实验步骤：
②根据实验材料和单一变量原则，在“甲”试管中加入少量柠檬酸钠，则“乙”试管中应该加等量的生理盐水，作为对照．
④由于在“甲”试管中加入少量柠檬酸钠（抗凝剂），所以“甲”试管中的血液不凝固，而“乙”试管中血液凝固．
⑤根据以上实验结果说明钙对血液凝固有关．
故答案为：
（1）钙对血液凝固有没有影响
（2）钙对血液凝固有影响
（4）②加等量的生理盐水
④不凝固 凝固
⑤钙对血液凝固有关
（1）血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能，一个血红蛋白分子至少含有______个游离的氨基．
（2）甲装置用于______，原理是______．
（3）乙装置中，C溶液是______．用乙装置分离蛋白质的方法叫______．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待______接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括：红细胞的洗涤、______、分离血红蛋白溶液；纯度鉴定常采用的方法是______．
正确答案
解：（1）人体内的血红蛋白由四个亚基构成，即含有四条肽链，所以一个血红蛋白分子至少含有4个游离的氨基．
（2）甲装置用于透析，原理是透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过．
（3）乙装置中，C溶液是磷酸缓冲溶液．用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液；纯度鉴定常采用的方法是SDS聚丙稀酰氨凝胶电泳．
故答案为：
（1）4
（2）透析（或粗分离） 透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过（或渗透作用）
（3）磷酸缓冲溶液 凝胶色谱法
（4）红色的蛋白质
（5）血红蛋白的释放 SDS聚丙稀酰氨凝胶电泳
解析
解：（1）人体内的血红蛋白由四个亚基构成，即含有四条肽链，所以一个血红蛋白分子至少含有4个游离的氨基．
（2）甲装置用于透析，原理是透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过．
（3）乙装置中，C溶液是磷酸缓冲溶液．用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法．
（4）用乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集．
（5）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．其中样品处理包括：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液；纯度鉴定常采用的方法是SDS聚丙稀酰氨凝胶电泳．
故答案为：
（1）4
（2）透析（或粗分离） 透析袋是半透膜制作的，小分子物质可以通过，大分子物质不能通过（或渗透作用）
（3）磷酸缓冲溶液 凝胶色谱法
（4）红色的蛋白质
（5）血红蛋白的释放 SDS聚丙稀酰氨凝胶电泳
红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．根据材料回答下列问题．
（1）实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液．加入柠檬酸钠的目的是______．
（2）在对样品进行处理时，主要包括______、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤．其中透析技术的原理是______．
（3）同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的______、______以及分子的形状等．
（4）同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离（如图一），他在操作中加样的正确顺序是______，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该______（打开或关闭）
（5）图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果，则图三中与图二中蛋白质P对应的是______．
正确答案
解：（1）加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤．透析的原理是小分子可以自由进出透析袋（半透膜），而大分子不能通过，这样可以除去相对分子质量较小的杂质．
（3）电泳时，影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等．
（4）正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是④①②③；同时进行②环绕加样时，应关闭下出口．
（5）SDS凝胶电泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主要取决于蛋白质分子量的大小，与电荷无关，同时加样在“-”极，通电后，样品蛋白质向“+”极移动，分子量相对小的，移动距离大，因此从图二的电泳结果分析，P比N、M移向“+”距离大，说明P的分子量相对比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图三中的丙．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋（半透膜），而大分子不能通过
（3）大小 带电性质
（4）④①②③关闭
（5）丙
解析
解：（1）加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤．透析的原理是小分子可以自由进出透析袋（半透膜），而大分子不能通过，这样可以除去相对分子质量较小的杂质．
（3）电泳时，影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等．
（4）正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是④①②③；同时进行②环绕加样时，应关闭下出口．
（5）SDS凝胶电泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主要取决于蛋白质分子量的大小，与电荷无关，同时加样在“-”极，通电后，样品蛋白质向“+”极移动，分子量相对小的，移动距离大，因此从图二的电泳结果分析，P比N、M移向“+”距离大，说明P的分子量相对比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图三中的丙．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋（半透膜），而大分子不能通过
（3）大小 带电性质
（4）④①②③关闭
（5）丙
材料仪器：新鲜猪血、低速冷冻离心机、透析袋、电泳仪等．
化学试剂：pH为7.4的缓冲液、柠檬酸钠、奈氏试剂（与NH4+反应出现黄色或红棕色沉淀）、饱和（NH4）2SO4溶液、生理盐水等．
实验步骤：
（1）样品获取：向新鲜猪血中加入______，静置一段时间后取上层______．
（2）盐析法粗提蛋白质：
①向血浆中加入一定体积的饱和（NH4）2SO4溶液，使（NH4）2SO4的浓度达到50%，充分混合后静置、离心，取沉淀物．
②向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解，再向其中加入一定体积的饱和（NH4）2SO4溶液，使（NH4）2SO4的浓度达到33%，充分混合后静置、离心，取沉淀物．
③重复步骤①、②2～3次，最后用生理盐水将沉淀溶解即得粗提品．
盐析粗提“血浆某白蛋白”的主要原理是______，重复步骤①、②的主要目的是______．
（3）透析除盐：将粗提品装入透析袋，以pH为7.4的缓冲液作透析液，每隔4h更换一次透析液，每次更换前利用奈氏试剂检测透析液中NH4+的量．利用缓冲液作透析液的目的是______．检测中，若观察到透析液______时，即可终止透析．
（4）凝胶色谱法分离：透析后的样品经凝胶柱洗脱，获得纯净血浆某白蛋白样品．
（5）分子量测定：化学物质SDS能使蛋白质变性，解聚成单条肽链．在聚丙烯酰胺凝胶电泳中加入一定量的SDS，电泳迁移率完全取决于肽链的分子大小．如图为本实验中用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血浆某白蛋白的结果．根据电泳结果，某同学得出“提取的血浆某白蛋白有两条肽链”的结论，这种说法可靠吗？理由是______．
正确答案
解：实验步骤：
（1）样品获取：向新鲜猪血中加入（适量的）柠檬酸钠以防止血液凝固，静置一段时间后取上层血浆．
（2）盐析法粗提蛋白质：
分析实验步骤可知，盐析粗提“血浆某白蛋白”的主要原理是该血浆白蛋白在50%和33%的（NH4）2SO4溶液中溶解度低，重复步骤①、②的主要目的是除去更多的杂蛋白．
（3）利用缓冲液作透析液的目的是维持pH值的相对稳定，防止pH变化对蛋白质结构造成破坏．检测中，若观察到透析液不出现黄色或红棕色沉淀时，说明小分子血浆蛋白已去除干净，即可终止透析．
（5）不可靠，由图可知，只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，而不一定是只有两条．
故答案为：
（1）（适量的）柠檬酸钠 血浆
（2）该血浆白蛋白在50%和33%的（NH4）2SO4溶液中溶解度低 除去更多的杂蛋白
（3）防止pH变化对蛋白质结构造成破坏 不出现黄色或红棕色沉淀
（5）不可靠，只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，不一定是两条
解析
解：实验步骤：
（1）样品获取：向新鲜猪血中加入（适量的）柠檬酸钠以防止血液凝固，静置一段时间后取上层血浆．
（2）盐析法粗提蛋白质：
分析实验步骤可知，盐析粗提“血浆某白蛋白”的主要原理是该血浆白蛋白在50%和33%的（NH4）2SO4溶液中溶解度低，重复步骤①、②的主要目的是除去更多的杂蛋白．
（3）利用缓冲液作透析液的目的是维持pH值的相对稳定，防止pH变化对蛋白质结构造成破坏．检测中，若观察到透析液不出现黄色或红棕色沉淀时，说明小分子血浆蛋白已去除干净，即可终止透析．
（5）不可靠，由图可知，只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，而不一定是只有两条．
故答案为：
（1）（适量的）柠檬酸钠 血浆
（2）该血浆白蛋白在50%和33%的（NH4）2SO4溶液中溶解度低 除去更多的杂蛋白
（3）防止pH变化对蛋白质结构造成破坏 不出现黄色或红棕色沉淀
（5）不可靠，只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，不一定是两条
红细胞含有大量血红蛋白，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2．我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白．根据材料回答问题：
（1）实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，目的是______．
（2）提取和分离血红蛋白的程序是：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定．
①在样品处理步骤中，洗涤红细胞的目的是______，用______溶液洗涤，洗涤后离心分离的速度和时间要求是______，离心后的上清液没有______就说明红细胞已洗涤干净．
②在粗分离步骤中，透析的目的是______．
③纯化步骤用凝胶色谱法，图一操作中加样的正确顺序是______，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该______（填“打开”或“关闭”）．图二是利用样品分离得到的结果，则图二中蛋白质分子量最小的是______．
④纯度鉴定步骤，利用琼脂糖凝胶电泳技术，将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的______、______以及分子的形状等．而加入SDS后，使得蛋白质的迁移率只取决于______．
正确答案
解：（1）在采血器中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）①在样品处理步骤中，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白或（血浆蛋白 ），用磷酸缓冲液洗涤，洗涤后进行低速、短时间（如500r/min离心2min）离心，离心后的上清液没有黄色就说明红细胞已洗涤干净．
②透析的目的是去除相对分子量较小的杂质．
③纯化步骤：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．图一操作中，加样的正确顺序是④①②③，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该关闭．凝胶色谱法分离蛋白质的原理是凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．因此图二中蛋白质分子量最小的是丙．
④电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定．因此，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的大小、带电性质以及分子的形状等，而加入SDS后，使得蛋白质的迁移率只取决于分子的大小．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）①去除杂蛋白或（血浆蛋白 ） 磷酸缓冲液 低速、短时间（如500r/min离心2min） 黄色
②去除相对分子量较小的杂质
③④①②③关闭 丙
④大小 带电性质 分子的大小
解析
解：（1）在采血器中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固．
（2）①在样品处理步骤中，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白或（血浆蛋白 ），用磷酸缓冲液洗涤，洗涤后进行低速、短时间（如500r/min离心2min）离心，离心后的上清液没有黄色就说明红细胞已洗涤干净．
②透析的目的是去除相对分子量较小的杂质．
③纯化步骤：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．图一操作中，加样的正确顺序是④①②③，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该关闭．凝胶色谱法分离蛋白质的原理是凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离．因此图二中蛋白质分子量最小的是丙．
④电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定．因此，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的大小、带电性质以及分子的形状等，而加入SDS后，使得蛋白质的迁移率只取决于分子的大小．
故答案为：
（1）防止血液凝固
（2）①去除杂蛋白或（血浆蛋白 ） 磷酸缓冲液 低速、短时间（如500r/min离心2min） 黄色
②去除相对分子量较小的杂质
③④①②③关闭 丙
④大小 带电性质 分子的大小
回答下列有关提取生物体内物质的问题：
．
正确答案
解：（1）血红蛋白能运输氧气，这体现了蛋白质具有运输功能．
（2）甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是磷酸缓冲溶液；乙装置中，C是洗脱液，其作用是洗脱血红蛋白．
（3）甲装置用于血红蛋白溶液的透析，目的是去除样品中分子量较小的杂质．
（4）胡萝卜素粗品鉴定的方法是纸层析法，a的作用是防止有机溶剂的挥发，e为标准样品点，若f没及e会导致胡萝卜素溶解于有机溶剂中，导致实验失败．
故答案为：
（1）运输
（2）磷酸缓冲溶液 洗脱血红蛋白
（3）血红蛋白溶液的透析 去除样品中分子量较小的杂质
（4）纸层析法 防止有机溶剂的挥发 标准样品点 胡萝卜素溶解于有机溶剂中，导致实验失败
解析
解：（1）血红蛋白能运输氧气，这体现了蛋白质具有运输功能．
（2）甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是磷酸缓冲溶液；乙装置中，C是洗脱液，其作用是洗脱血红蛋白．
（3）甲装置用于血红蛋白溶液的透析，目的是去除样品中分子量较小的杂质．
（4）胡萝卜素粗品鉴定的方法是纸层析法，a的作用是防止有机溶剂的挥发，e为标准样品点，若f没及e会导致胡萝卜素溶解于有机溶剂中，导致实验失败．
故答案为：
（1）运输
（2）磷酸缓冲溶液 洗脱血红蛋白
（3）血红蛋白溶液的透析 去除样品中分子量较小的杂质
（4）纸层析法 防止有机溶剂的挥发 标准样品点 胡萝卜素溶解于有机溶剂中，导致实验失败
甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病(H对h为显性)。图1中两个家系都有血友病发病史，Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一个性染色体组成是XXY的非血友病儿子(Ⅳ2)，家系中的其他成员性染色体组成均正常。
(1)根据图1， (填“能”或“不能”)确定Ⅳ2两条X染色体的来源；Ⅲ4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是 。
(3)现Ⅲ3再次怀孕，产前诊断显示胎儿(Ⅳ3)细胞的染色体为46，XY；F8基因的PCR检测结果如图2所示。由此建议Ⅲ3 。
(4)补给F8可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是 ；若F8比某些杂蛋白收集到，说明F8的相对分子质量较这些杂蛋白 ______ 。
(5)利用转基因猪乳腺生物反应器可生产F8。要使乳腺细胞合成F8，构建表达载体时，必须将F8基因cDNA与猪乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。F8基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体上的F8基因短，原因是该cDNA没有 _______ 。
(6)为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入 ，构成重组胚胎进行繁殖。
正确答案
(1)不能 0
(2)XHXh
(3)终止妊娠
(4)使凝胶装填紧密 大
(5)启动子 内含子
(6)去核的卵母细胞
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