- DNA和蛋白质技术
- 共447题
图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:
(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入______并搅拌,可使鸡血细胞破裂.
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的______.
(3)步骤三、四的操作原理是______,
步骤四通过向溶液中加入______调节NaCl溶液的物质的量浓度为______mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质.
(4)步骤七:向步骤六过滤后的______中,加入等体积的冷却的______,静置2~3min,溶液中会出现______色丝状物,这就是粗提取的DNA.
(5)步骤七:DNA遇______试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈______色.
正确答案
解:(1)步骤一中,利用渗透原理,向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌,可使鸡血细胞破裂.
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的滤液.
(3)步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L(此时DNA的溶解度最小)时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质.
(4)步骤七:向步骤六过滤后的滤液中,加入等体积的冷却的酒精,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA.
(5)步骤七:DNA遇二苯胺试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈蓝色.
故答案为:
(1)蒸馏水
(2)滤液
(3)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 蒸馏水 0.14
(4)滤液 酒精 白
(5)二苯胺 蓝
解析
解:(1)步骤一中,利用渗透原理,向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌,可使鸡血细胞破裂.
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的滤液.
(3)步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L(此时DNA的溶解度最小)时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质.
(4)步骤七:向步骤六过滤后的滤液中,加入等体积的冷却的酒精,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA.
(5)步骤七:DNA遇二苯胺试剂,沸水浴5min,冷却后,溶液呈蓝色.
故答案为:
(1)蒸馏水
(2)滤液
(3)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 蒸馏水 0.14
(4)滤液 酒精 白
(5)二苯胺 蓝
关于DNA粗提取实验材料的选择,也经过了多次实验结果的比较,最终选择了鸡血做实验材料,请回答:
(1)最终选择鸡血作为实验材料,是因为家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中______细胞数目较多,且这类细胞具有______,可以提供丰富的DNA.
(2)实验前可以通过______或______二种方法使鸡血细胞沉淀于试管底部,以便除去血清.
(3)在牧区采集牛、羊和马血比较方便,但若用这些实验材料完成实验,则很难提取到DNA,这是因为哺乳动物血中红细胞在结构上______,而白细胞数量______.
(4)若改用哺乳动物的肝脏作为DNA粗提的实验材料是否可行?______若可行,应对材料作怎样的处理,使其核物质释放出来?______.
正确答案
解:(1)DNA粗提取实验材料的选择的原则为:材料易取,DNA含量高.最终选择鸡血作为实验材料,是因为家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,且这类细胞具有细胞核,可以提供丰富的DNA.
(2)实验前可以通过离心或静置二种方法使鸡血细胞沉淀于试管底部,以便除去血清.
(3)哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器,并且白细胞的数量少,因此不能作为提取DNA的材料.
(4)哺乳动物的肝脏细胞具有细胞核,因此可以作为DNA粗提的实验材料.在实验过程中,可以先将肝脏切碎、研磨,然后加入蒸馏水是肝细胞吸水涨破,从而提取其中的DNA.
故答案为:
(1)红 细胞核
(2)离心 静置
(3)无细胞核 少
(4)可行 先将肝脏切碎、研磨,然后加入蒸馏水
解析
解:(1)DNA粗提取实验材料的选择的原则为:材料易取,DNA含量高.最终选择鸡血作为实验材料,是因为家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,且这类细胞具有细胞核,可以提供丰富的DNA.
(2)实验前可以通过离心或静置二种方法使鸡血细胞沉淀于试管底部,以便除去血清.
(3)哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器,并且白细胞的数量少,因此不能作为提取DNA的材料.
(4)哺乳动物的肝脏细胞具有细胞核,因此可以作为DNA粗提的实验材料.在实验过程中,可以先将肝脏切碎、研磨,然后加入蒸馏水是肝细胞吸水涨破,从而提取其中的DNA.
故答案为:
(1)红 细胞核
(2)离心 静置
(3)无细胞核 少
(4)可行 先将肝脏切碎、研磨,然后加入蒸馏水
回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题.如图为该实验过程中的一些重要操作示意图.
(1)正确的操作顺序是______.(请用字母和箭头表示)
(2)上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是______和______
(3)上图A步骤中所用酒精必须是经过______的才能使用,该步骤的目的是______
(4)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加______试剂后沸水浴,如果出现______则证明该丝状物的主要成分为DNA.
正确答案
解:(1)DNA的粗提取和鉴定步骤是:加入蒸馏水,破碎细胞→过滤,获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定.所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A.
(2)C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低,析出DNA.
(3)DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNA.
(4)DNA鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色.
故答案为:
(1)C→B→E→D→A
(2)加速细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出
(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
(4)二苯胺 蓝色
解析
解:(1)DNA的粗提取和鉴定步骤是:加入蒸馏水,破碎细胞→过滤,获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定.所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A.
(2)C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低,析出DNA.
(3)DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNA.
(4)DNA鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色.
故答案为:
(1)C→B→E→D→A
(2)加速细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出
(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
(4)二苯胺 蓝色
下列实验中所用试剂错误的是
[ ]
正确答案
下列关于实验叙述中,不正确的是
[ ]
正确答案
下列关于dna和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中,错误的是
[ ]
正确答案
下列关于dna的粗提取实验和血红蛋白的提取实验,叙述正确的是:
[ ]
正确答案
下列关于酒精在相关实验中运用的叙述,正确的是
①在接种前一般要用50%的酒精擦拭双手②在提取叶绿体中色素时可用酒精代替丙酮③在95%的冷酒精中dna的溶解度较大④用苏丹Ⅲ染液鉴定花生子叶中的脂肪时需要用酒精洗去浮色
[ ]
正确答案
准确地选择实验材料是实验成功的关键,下列有关实验材料选择的叙述正确的是
[ ]
正确答案
以下叙述不正确的是
[ ]
正确答案
在DNA的鉴定实验中,鉴定DNA的试剂是______,DNA遇该试剂会染成______色.在高盐溶液中,DNA的溶解度最______.向破碎的植物细胞加入洗涤剂的目的是______;向动物细胞液中加入蒸馏水的目的是______;向溶有DNA的氯化钠溶液中加入95%的酒精,其目的是______.
正确答案
解:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色;DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最小,而在高盐溶液中DNA的溶解度最大.洗涤剂能瓦解细胞膜;根据渗透原理,向动物细胞液中加入蒸馏水能使鸡血细胞吸水胀破;DNA不溶于酒精溶液,因此向溶有DNA的氯化钠溶液中加入体积分数为95%的冷却酒精可以加速DNA的析出.
故答案为:
二苯胺 蓝色 大 溶解细胞膜和细胞核膜上的脂质分子,使细胞核内的DNA分子释放出来
使鸡血细胞加速破裂 加速DNA析出
解析
解:在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色;DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最小,而在高盐溶液中DNA的溶解度最大.洗涤剂能瓦解细胞膜;根据渗透原理,向动物细胞液中加入蒸馏水能使鸡血细胞吸水胀破;DNA不溶于酒精溶液,因此向溶有DNA的氯化钠溶液中加入体积分数为95%的冷却酒精可以加速DNA的析出.
故答案为:
二苯胺 蓝色 大 溶解细胞膜和细胞核膜上的脂质分子,使细胞核内的DNA分子释放出来
使鸡血细胞加速破裂 加速DNA析出
如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置:
(1)在图①所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是______,通过图②所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是______;图③所示实验步骤中加蒸馏水的目的是______.
(2)鉴定DNA的方法是,向溶有DNA丝状物的试管中加入______试剂,混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,冷却后可观察到溶液呈______;也可取少许DNA丝状物置于载玻片上,滴一滴______溶液,片刻后用水冲洗,可见丝状物被染成______.
正确答案
解:(1)实验中为了提取出细胞核物质,利用渗透作用原理,向鸡血球液中加入蒸馏水,加上玻璃棒的快速搅拌,使血细胞吸水胀裂,释放出其中的核物质.DNA物质在不同浓度NaCl深液中的溶解度不同,在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大而呈溶解状态;在0.14 mol/LNaCI溶液中溶解度最小而析出,成为白色丝状物.所以向溶有DNA的2mol/LNaCI中缓慢加入蒸馏水,使NaCl溶液的浓度降低到0.14mol/L时,DNA物质即可析出.
(2)鉴定DNA分子的试剂有甲基绿、二苯胺等,前者遇DNA呈现蓝绿色,后者遇DNA在沸水浴条件下呈现浅蓝色.
故答案为:
(1)使血细胞破裂 使滤液中DNA溶于浓NaCl溶液 降低盐溶液浓度,使DNA析出
(2)二苯胺 蓝色 甲基绿 绿色
解析
解:(1)实验中为了提取出细胞核物质,利用渗透作用原理,向鸡血球液中加入蒸馏水,加上玻璃棒的快速搅拌,使血细胞吸水胀裂,释放出其中的核物质.DNA物质在不同浓度NaCl深液中的溶解度不同,在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大而呈溶解状态;在0.14 mol/LNaCI溶液中溶解度最小而析出,成为白色丝状物.所以向溶有DNA的2mol/LNaCI中缓慢加入蒸馏水,使NaCl溶液的浓度降低到0.14mol/L时,DNA物质即可析出.
(2)鉴定DNA分子的试剂有甲基绿、二苯胺等,前者遇DNA呈现蓝绿色,后者遇DNA在沸水浴条件下呈现浅蓝色.
故答案为:
(1)使血细胞破裂 使滤液中DNA溶于浓NaCl溶液 降低盐溶液浓度,使DNA析出
(2)二苯胺 蓝色 甲基绿 绿色
关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:
(1)鸡血细胞中红细胞______,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中______细胞数目较多,可以提供丰富的______.
(2)实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是______.
(3)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是______,这是因为这些动物和人一样,成熟的红细胞中______,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行.这是因为______.
(4)若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加______程序,使组织细胞更易分离.
正确答案
解:(1)鸡血细胞中,红细胞含细胞核,由于家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,可以提供丰富的DNA.
(2)DNA存在于鸡血细胞中,因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血.
(3)牛、羊和马属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核核细胞器,因此若用它们的血液作为实验材料将很难提取到DNA,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行,这是因为肝细胞有细胞核.
(4)若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加研磨程序,使组织细胞更易分离.
故答案为:
(1)含细胞核 红 DNA
(2)鸡血细胞液中DNA相对含量高
(3)很难提取到DNA 无细胞核 肝细胞有细胞核
(4)研磨
解析
解:(1)鸡血细胞中,红细胞含细胞核,由于家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中红细胞数目较多,可以提供丰富的DNA.
(2)DNA存在于鸡血细胞中,因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血.
(3)牛、羊和马属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核核细胞器,因此若用它们的血液作为实验材料将很难提取到DNA,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行,这是因为肝细胞有细胞核.
(4)若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加研磨程序,使组织细胞更易分离.
故答案为:
(1)含细胞核 红 DNA
(2)鸡血细胞液中DNA相对含量高
(3)很难提取到DNA 无细胞核 肝细胞有细胞核
(4)研磨
为了从动物组织中提取纯净的DNA,首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞.消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性剂处理、变性剂处理等.某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本,并提取猪的DNA.实验步骤如下:
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合,在一定温度条件下水浴消化24h.
②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液抽提.
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37.C水浴th.
④加醋酸钠和无水乙醇,4cc高速离心15min.
⑤用70qo乙醇洗涤沉淀两次,风干,得到高纯度的DNA.
请回答有关问题:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是______.
(2)步骤②的目的是______.
步骤③的目的是______.
(3)步骤④中使用无水乙醇的目的是______,高速离心时温度保持在4℃的原因有______、______ 等.
(4)如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比,请简要说明实验设计思路.______.
正确答案
解:(1)细胞膜被破坏可导致细胞裂解,由于细胞膜中含有蛋白质,所以蛋白酶可以促进细胞裂解,另外表面活性剂等可以破坏细胞膜.
(2)苯酚、氯仿、异丙醇混合液,可以促进蛋白质变性;RNA水解酶可以水解RNA,说明酶的专一性.
(3)无水乙醇可以析出DNA,提取含杂质较少DNA,高速离心时温度保持在4℃,原因有降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子运动,易于形成沉淀析出.
(4)实验目的是验证蛋白酶K法提取DNA的效果,因此将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K,其他实验步骤相同,得到DNA后,测定DNA的量和纯度.
故答案为:(1)洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜.
(2)使得蛋白质变性,提取蛋白质 水解DNA
(3)析出DNA,提取含杂质较少DNA 降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解 降低分子运动,易于形成沉淀析出.
(4)将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K,其他实验步骤相同,得到DNA后,测定DNA的量和纯度
解析
解:(1)细胞膜被破坏可导致细胞裂解,由于细胞膜中含有蛋白质,所以蛋白酶可以促进细胞裂解,另外表面活性剂等可以破坏细胞膜.
(2)苯酚、氯仿、异丙醇混合液,可以促进蛋白质变性;RNA水解酶可以水解RNA,说明酶的专一性.
(3)无水乙醇可以析出DNA,提取含杂质较少DNA,高速离心时温度保持在4℃,原因有降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子运动,易于形成沉淀析出.
(4)实验目的是验证蛋白酶K法提取DNA的效果,因此将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K,其他实验步骤相同,得到DNA后,测定DNA的量和纯度.
故答案为:(1)洗衣粉中蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜.
(2)使得蛋白质变性,提取蛋白质 水解DNA
(3)析出DNA,提取含杂质较少DNA 降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解 降低分子运动,易于形成沉淀析出.
(4)将上述实验中的加酶洗衣粉换成蛋白酶K,其他实验步骤相同,得到DNA后,测定DNA的量和纯度
图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,回答下列问题:
(1)图中正确的实验操作顺序是______(用序号与箭头表示).
(2)步骤③中加入蒸馏水的目的是______;步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出,该操作的原理是______.
(3)步骤①中所用酒精最佳是经过______后再使用,该步骤的目的是______.
(4)DNA可用______试剂鉴定,沸水浴后的颜色反应为______.
(5)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最可能是______.
正确答案
解:(1)由以上分析可知,图中表示正确的实验操作顺序是③→②→⑤→④→①.
(2)步骤③中加入蒸馏水的目的是加速血细胞的破裂;当NaCl溶液浓度大于0.14mol/L时,DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小,因此步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出.
(3)步骤①中所用酒精最佳是经过充分预冷后再使用,该步骤的目的是利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA.
(4)DNA可用二苯胺试剂鉴定,沸水浴后的颜色反应为蓝色.
(5)人是哺乳动物,哺乳动物血液中的红细胞没有细胞核和细胞器,因此用人血代替鸡血来进行该实验难以取得成功.
故答案为:
(1)③→②→⑤→④→①
(2)加速血细胞的破裂 DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小
(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA)
(4)二苯胺 蓝色
(5)人血含DNA太少(成熟的红细胞没有细胞核)
解析
解:(1)由以上分析可知,图中表示正确的实验操作顺序是③→②→⑤→④→①.
(2)步骤③中加入蒸馏水的目的是加速血细胞的破裂;当NaCl溶液浓度大于0.14mol/L时,DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小,因此步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出.
(3)步骤①中所用酒精最佳是经过充分预冷后再使用,该步骤的目的是利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA.
(4)DNA可用二苯胺试剂鉴定,沸水浴后的颜色反应为蓝色.
(5)人是哺乳动物,哺乳动物血液中的红细胞没有细胞核和细胞器,因此用人血代替鸡血来进行该实验难以取得成功.
故答案为:
(1)③→②→⑤→④→①
(2)加速血细胞的破裂 DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小
(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA)
(4)二苯胺 蓝色
(5)人血含DNA太少(成熟的红细胞没有细胞核)
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