热门试卷

一、下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳蛋白基因插入载体，需用            限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含            的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是       （填字母代号）。

a.启动子    b .tetR    c.复制原点     d. ampR

（3）过程①可采用的操作方法是       （填字母代号）。

a.农杆菌转化   b.大肠杆菌转化    c.显微注射  d .细胞融合

（4）过程②可采用的生物技术是           。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的       性。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用       （填字母代号）技术。

a.核酸分子杂交 b.基因序列分析    c.抗原—抗体杂交    d. PCR

二、某地区从1964年开始使用杀虫剂杀灭蚊子幼虫，至1967年中期停用。下图是五年间蚊子幼虫基因型频率变化曲线。R表示杀虫剂抗性基因，S表示野生敏感型基因。据图回答：

（1）R基因的出现是                 的结果。

（2）在RR基因型频率达到峰值时，RS、SS基因型频率分别为4%和1%，此时R基因的频率为          。

（3）1969年中期RR基因型几近消失，表明在        的环境条件下，RR基因型幼虫比SS基因型幼虫的生存适应能力          。

（4）该地区从此不再使用杀虫剂。预测未来种群中，最终频率最高的基因型是      ，原因是                                    。

请回答基因工程方面的有关问题：

（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。  图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：_______；  ②第2组：_______。

（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能，这是因为_______。

（4）用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。

( 1 ) AFB1属于                        类致癌因子。

( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上，使该位点受损伤变为G ' ，在DNA复制中，G '会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为               。

( 3 ）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图

据图回答问题：

① 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶，过程l 应选择        菌液的细胞提取总RNA ，理由是

② 过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是

③ 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用                     方法。

( 4 ）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：

据表回答问题：

① 本实验的两个自变量，分别为                     。

② 本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是                     。

③ 经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加     克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节的了成本。

（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的                     。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：·

（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　  　　和　  　　。

（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　                            　　。

（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即　　　　　DNA连接酶和　　　　　　　DNA连接酶。

（４）反转录作用的模板是　     　　，产物是　　    　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　      　技术。

（５）基因工程中除质粒外，　　　　　和　　　　　　也可作为运载体。

（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是　　　　                                              　　　。

一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如图。

请回答：

（1）过程①是指在体外进行的_______处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程②称为_______。

（2）在对胎儿进行镰刀型细胞贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③_______进行PCR扩增。然后用MstⅡ对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。据此判断，MstⅡ是一种_______酶。

（3）不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④，据此判断胎儿为_______（正常/患者/携带者）。

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①中最常用的运载工具是_______，所需要的酶是限制酶和____________。

（2）在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5％CO2的气体环境中，CO2的作用是_________。

（3）在过程③中，用_______处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行________处理。

（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。