热门试卷

β-葡萄糖苷酶是微生物细胞分泌的一种纤维素酶，可催化纤维二糖水解为葡萄糖。已知在β-葡萄糖苷酶的催化下七叶苷分解产生的七叶素可与柠檬酸高铁铵反应形成黑色化合物，该反应在培养基中产生的黑色圈可用来鉴定菌种。研究人员欲从土样中分离筛选出产β-葡萄糖苷酶的菌株，并对该酶的特性进行相关的实验研究。

请分析并回答：

（1）富集与筛选：将适量土样放入液体培养基中，37℃摇床震荡培养。为获得单菌落，可将上述菌液经        后接种到固体培养基上。要想鉴定筛选的菌株，需在培养基中额外添加        。实验结果如下表：

注：“+”的多少代表颜色的深浅

由表中结果分析，菌种        为最适菌种，理由是        。

（2）酶学特性研究：

①酶液的粗提取：将筛选出的菌种进行培养，培养液中的酵母膏和蛋白胨可为菌种提

供        。培养一段时间后，要从培养液中分离得到β-葡萄糖苷酶，可采用

的方法对培养液进行处理，得到的        即为粗提取的酶液。

②测定酶的酸碱稳定性：β-葡萄糖苷酶催化的化学反应速率可以通过测定         来表示。不同pH缓冲液中加入粗酶液后，在最适温度下保温1小时后测得实验结果如下：

分析可知，pH范围在        时，酶的pH稳定性达80%以上，比较酸性和碱性环境对该酶的影响可知，此酶对        环境耐受性较差。

31.（8 分）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。

为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题：

（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是____（填序号）。

①酒精灯  ②培养皿  ③显微镜  ④无菌水

（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是____。

（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是 ____。

（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见上图）。 图中降解圈大小与纤维素酶的____有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是____（填图中序号）。

（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4，在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图，推测菌株    更适合用于人工瘤胃发酵，理是____。

31.现有一种细菌 M ， 能够合成某种酶， 并能分泌到细胞外。 为了研究其培养时间与

细胞数、 细胞外酶浓度和总酶浓度的变化关系， 请根据以下提供的实验材料写出实验思路，

并预测实验结果。

实验材料： 若干个培养瓶、 培养液、 细菌 M

（要求与说明： 实验仅设一组； 实验仪器、 试剂、 用具及操作不做要求； 实验条件适宜）

请回答：

（ 1 ） 实验思路：

①

（ 2 ） 预测实验结果（设计一个坐标系， 并绘制预测的细胞数、 细胞外酶浓度和总酶浓度的

变化曲线）；

（ 3 ） 测定总酶浓度时， 应对细胞做 _________ 处理。

回答下列有关微生物的问题。（9分）

霍乱弧菌（图21）经口感染，通过胃到达小肠，在小肠黏膜细胞的表面生长繁殖并产生霍乱肠毒素，后者导致感染人群腹泻甚至死亡。

45.霍乱弧菌能穿透粘液层（分布于小肠黏膜细胞表面）通常借助于__________。

A.肠道的蠕动

B.消化液的流动

C.细菌鞭毛的运动

D.小肠上皮细胞微绒毛的摆动

用含硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆酸纳、蔗糖的TCBS培养基（pH8.6）能从天然样品中有效地分离出霍乱弧菌。

46.这种TCBS培养基属于______。

A.酸性通用

B.碱性通用

C.酸性选择

D.碱性选择

研究显示、霍乱肠毒素为蛋白质，其编码基因位于CTX噬菌体基因组中.无毒型霍乱弧菌经CTX噬菌体感染后，会转变为产毒素的菌株，且其子代细菌即便在无噬菌体感染的条件下，同样能稳定维持其产毒素特性。

47.造成霍乱弧菌这一特点的机制可能是______。

A.霍乱肠毒素在霍乱弧菌细胞分裂时分裂子代细胞

B.霍乱肠毒素能选择性杀死不含毒素编码基因的霍乱弧菌

C.CTX噬菌体感染霍乱弧菌后增殖了大量且稳定的噬菌体

D.CTX噬菌体在感染霍乱弧菌期间将其基因组插入至宿主基因组上

48.不食不洁生水和生贝壳类海产品是防止霍乱发生措施之一，这属于传染病预防措施中的_________。

49.下列各图中，能准确反映霍乱弧菌疫苗接种者血清中抗霍乱弧菌抗体的浓度随时间变化趋势的是_____。

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题：

（1）将自然界中采集到的葡萄糖带回实验室，用___________________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后，用___________________方法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。

（2）将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌______________________________________。从存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。

（3）将目的基因连接到一种穿梭质粒（可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒）上。该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含_______________________的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏_________________能力的酿酒酵母作为受体菌。从细胞结构看，酵母菌不同于大肠杆菌的主要特点是________________。

（4）对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如下图所示。

。

据图分析，将转基因酿酒酵母接种在_________为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的____________糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够________________________________________________________，说明所需菌株培育成功。

为探究结合双歧杆菌的耐药性，研究者首先对从患者体内提取的病原菌进行培养（如图甲）。

（1）下图乙是经过过程①即细菌纯化培养结果。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是      （用编号表示）。研究者在图甲过程③的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板。该接种方法是       ；推测接种时可能的操作失误是      。

（2）每一次实验前实验室需要经过严格的消毒灭菌创造无菌条件外，为预防接种过程中研究者本身受病原菌感染，你认为研究者还应该采取的防护措施有                    （至少写出实验前和实验后各一项措施）。