- 微生物的分离和培养
- 共178题
植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_ 分解成_
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR)时，CR可与纤维素形成_ 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的
（3）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲.乙两种培养基（成分见下表)：
注：“+”表示有，“-”表示无。
据表判断，培养基甲_ _〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_ ；培养基乙_ 〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 。
正确答案
（1）纤维二糖 葡萄糖
（2）红 透明圈
（3）不能 液体培养基不能用于分离单菌落
不能 培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
解析
略
知识点
为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（符合无菌操作要求）。请分析上述实验过程并回答下列问题：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、________；培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物生长提供________等营养物质。
（2）本实验样品接种时最好采用________方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的________。
（3）食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用________培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。
（4）请指出本实验设计中的一个明显的错误：________，请加以改正：________。
（5）如何证明所用培养基已经彻底灭菌？________。
正确答案
（1）倒平板；碳源、磷酸盐、维生素、氮源
（2）稀释涂布平板法；一个活菌
（3）伊红美蓝
（4）没有设置对照实验；应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养
（5）对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基灭菌彻底
解析
本题考查微生物培养、分离、检查等有关知识， 属于考纲基础理解运用层次，难度小。微生物生长需要水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，故配制的培养基含有这些成分，而牛肉膏中含有这些营养物质，制备过程有计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤，经过灭菌的培养基放置24h无菌落出现，说明灭菌彻底；提纯菌种方法有划线法和稀释涂布平板法；本实验的菌取自口腔，最好用稀释涂布法分离；因为菌体太小，一般肉眼看到的是菌的集合体，一个菌落是由一个菌体发育来的，这样就可以到的单一菌体；伊红美蓝可以检查大肠杆菌的存在；生物学实验要遵循单一变量、等量、对照原则，该实验没有对照实验。
知识点
分析有关微生物的资料，回答问题并完善实验设计方案。
脂肪酶具有广泛的应用前景。为获得高产脂肪酶的菌株，并将之用于产业化，进行如下的系列实验。
（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的______。
a. 蛋白胨、柠檬酸铁铵
b. 橄榄油、硫酸铵
c. 乳糖、酵母膏
d. 葡萄糖、蛋白胨
（2）进一步调查适合于产脂肪酶菌株生长的碳氮源。根据表2的实验数据，选择理想的碳源为_______。
（3）补全表3中的实验方案，以确定所选碳源的最佳浓度（设浓度梯度的差值为0.2%）。
（4）利用相似方法探得理想氮源的最佳浓度，再进一步确定碳氮源浓度的最佳组合。以a和b分别代表碳源和氮源的浓度，假设酶活a1＞a2＞a3；b2＞b3＞b4，据此形成下列四种方案，其中最佳的是______。
方案一：a1和b2组合。
方案二：将每一种a的浓度分别与b2、b3、b4组合，根据酶活取其中的最佳组合。
方案三：a1和b2组合，a2和b3组合，根据酶活取其中的最佳组合。
方案四：a1分别与每种氮源浓度组合，b2分别与每种碳源浓度组合，根据酶活取其中的最佳组合。
（5）如果脂肪酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活，则应选择图17中的_________固定化工艺。
正确答案
答案： （1）b
（2）蔗糖
（3）参见下表
（4）方案二
（5）c
解析
本题考查微生物培养。
（1） 欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，培养基中应含有脂肪类的碳源，故B正确。
（2） 由表2数据可知，同为1.0%浓度时，应用蔗糖这一碳源，菌株产生脂肪酶酶活最高。
（3） 依题意可知，为进一步探究碳源的最佳浓度，碳源浓度为自变量，脂肪酶酶活为因变量，根据表2数据，以1.0%的浓度为参照设置5个组，碳源浓度梯度为0.2%。5个组的碳源浓度分别为：0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%。
（4） 分别确定碳源和氮源的最佳浓度后，再进一步确定最佳的碳氮源浓度组合，不应是两者最佳浓度的简单相加，而应该将每一种碳源浓度与氮源浓度组合，根据酶活取最佳的组合。
（5） 酶的活性易受多种外界因素的影响而失活，酶的固定化工艺是为了保护酶的活性，并使之在多次使用后仍能维持酶的活性，故在其固定化处理时，应使承载物包裹着酶，同时又不影响酶与底物分子的结合，故应选C。
知识点
为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。
（3）示意图A和B中， 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的 的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。
正确答案
（1）检测培养基平板灭菌是否合格
（2）灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B
（4）溶解氧 营养物质
解析
略
知识点
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
正确答案
（1） 压榨；萃取（注：两空顺序无先后）
（2）碳源 高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数 酶活性（或：酶活力） 固定化酶（或：固定化细胞）
（4）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）
解析
本题综合考查多种生物技术。（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用PCR技术可以扩增基因。
知识点
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